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3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增技术的影响
被引量:
1
1
作者
朱典
万立华
+3 位作者
胡兰
李彩霞
韩俊萍
郝建文
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期589-591,共3页
目的:比较3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增(Lowvolume polymerase chain reaction,LVPCR)技术的影响,为细胞分离检验中细胞核标记物的选择提供依据。方法:显微捕获联合LVPCR中,用苏木素、龙胆紫、亚甲基蓝3种染液对口腔上皮细胞进...
目的:比较3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增(Lowvolume polymerase chain reaction,LVPCR)技术的影响,为细胞分离检验中细胞核标记物的选择提供依据。方法:显微捕获联合LVPCR中,用苏木素、龙胆紫、亚甲基蓝3种染液对口腔上皮细胞进行标识。参照龙胆紫染色法,比较0.5、1、2、5、8μl苏木素染液及2、5、8、10、15μl亚甲基蓝染液的染色效果,优化染色条件;并比较优化后的细胞核标识效果。显微操作仪捕获3种染液染色后的细胞进行DNA检验,比较检测结果;并捕获染色10、30、60 min口腔上皮细胞,比较染色时间对DNA检测结果的影响。结果:100μl口腔上皮细胞悬液加入2μl苏木素、0.5μl龙胆紫或5μl亚甲基蓝染液,细胞核均着色明显,与胞浆对比清晰。5个细胞的分离检验结果示有效分型率分别为90%、100%、66.7%,成功分型率为20%、100%、11.1%;龙胆紫、苏木素染色时间(≤60 min)对DNA检测结果无明显影响,而亚甲基蓝染色时间延长导致等位基因丢失等现象加重,影响检测结果。结论:3种染液均可清晰标识细胞核;而龙胆紫染液对LVPCR技术抑制最弱,为三者中较优的细胞核标记物。
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关键词
法医物证学
碱性染料
低体积扩增
显微捕获单细胞分离检验技术
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职称材料
中国汉族人群CYP2D6、CYP3A4 SNP位点基因多态性分析
被引量:
4
2
作者
杨栋
万立华
+2 位作者
涂政
石屹
胡兰
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期687-690,共4页
目的:通过对药物代谢酶CYP2D6和CYP3A4的相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)筛选检测,获得其在中国汉族人群中遗传多态性分布的相关数据。方法:筛选11个关于CYP2D6、CYP3A4基因的SNP位点,取192份中国汉族无关个体...
目的:通过对药物代谢酶CYP2D6和CYP3A4的相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)筛选检测,获得其在中国汉族人群中遗传多态性分布的相关数据。方法:筛选11个关于CYP2D6、CYP3A4基因的SNP位点,取192份中国汉族无关个体健康自愿者的血液样本获得基因组DNA,根据单碱基延伸技术通过GenomeLabTM SNPstreamR基因分型系统进行SNP分型。结果:本次检测的11个SNP位点在研究人群中全部具有多态性(最小等位基因频率>0.01),其中7个SNP(RS28624811、RS28670611、RS9623531、RS5758589、RS3735451、RS2246709、RS2404955、RS4646440)位点的等位基因频率在此人群与白种人相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:汉族人群可能有继承特定的遗传信息,导致与其他人群具有不同药物代谢率。
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关键词
单核苷酸多态性
CYP2D6
CYP3A4
内含子
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职称材料
题名
3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增技术的影响
被引量:
1
1
作者
朱典
万立华
胡兰
李彩霞
韩俊萍
郝建文
机构
重庆医科大学基础医学院
法医
学教研室
公安部物证鉴定中心法医遗传学重点实验室
中国人民
公安
大学刑事科学技术系
重庆市
公安
局技术处
法医
科
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期589-591,共3页
基金
"十一.五"国家科技支撑计划资助项目(编号:2006BAK07B01)
文摘
目的:比较3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增(Lowvolume polymerase chain reaction,LVPCR)技术的影响,为细胞分离检验中细胞核标记物的选择提供依据。方法:显微捕获联合LVPCR中,用苏木素、龙胆紫、亚甲基蓝3种染液对口腔上皮细胞进行标识。参照龙胆紫染色法,比较0.5、1、2、5、8μl苏木素染液及2、5、8、10、15μl亚甲基蓝染液的染色效果,优化染色条件;并比较优化后的细胞核标识效果。显微操作仪捕获3种染液染色后的细胞进行DNA检验,比较检测结果;并捕获染色10、30、60 min口腔上皮细胞,比较染色时间对DNA检测结果的影响。结果:100μl口腔上皮细胞悬液加入2μl苏木素、0.5μl龙胆紫或5μl亚甲基蓝染液,细胞核均着色明显,与胞浆对比清晰。5个细胞的分离检验结果示有效分型率分别为90%、100%、66.7%,成功分型率为20%、100%、11.1%;龙胆紫、苏木素染色时间(≤60 min)对DNA检测结果无明显影响,而亚甲基蓝染色时间延长导致等位基因丢失等现象加重,影响检测结果。结论:3种染液均可清晰标识细胞核;而龙胆紫染液对LVPCR技术抑制最弱,为三者中较优的细胞核标记物。
关键词
法医物证学
碱性染料
低体积扩增
显微捕获单细胞分离检验技术
Keywords
forensic genetic
basic dyes
LVPCR
testing technique of micromanipulation method of single cell
分类号
R89 [医药卫生—法医学]
D919.2 [医药卫生—法医学]
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职称材料
题名
中国汉族人群CYP2D6、CYP3A4 SNP位点基因多态性分析
被引量:
4
2
作者
杨栋
万立华
涂政
石屹
胡兰
机构
重庆医科大学基础医学院
法医
系
公安部物证鉴定中心法医遗传学重点实验室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期687-690,共4页
文摘
目的:通过对药物代谢酶CYP2D6和CYP3A4的相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)筛选检测,获得其在中国汉族人群中遗传多态性分布的相关数据。方法:筛选11个关于CYP2D6、CYP3A4基因的SNP位点,取192份中国汉族无关个体健康自愿者的血液样本获得基因组DNA,根据单碱基延伸技术通过GenomeLabTM SNPstreamR基因分型系统进行SNP分型。结果:本次检测的11个SNP位点在研究人群中全部具有多态性(最小等位基因频率>0.01),其中7个SNP(RS28624811、RS28670611、RS9623531、RS5758589、RS3735451、RS2246709、RS2404955、RS4646440)位点的等位基因频率在此人群与白种人相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:汉族人群可能有继承特定的遗传信息,导致与其他人群具有不同药物代谢率。
关键词
单核苷酸多态性
CYP2D6
CYP3A4
内含子
Keywords
single nucleotide polymorphism
CYP2D6
CYP3A4
intron
分类号
R89 [医药卫生—法医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增技术的影响
朱典
万立华
胡兰
李彩霞
韩俊萍
郝建文
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
中国汉族人群CYP2D6、CYP3A4 SNP位点基因多态性分析
杨栋
万立华
涂政
石屹
胡兰
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
4
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已选择
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