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植物基因组编辑检测方法
被引量：
7
1
作者
刘春霞
耿立召
许建平
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期1075-1091,共17页
以CRISPR/Cas9技术为代表的基因组编辑在生物领域的革命性应用使得生命科学研究迈入新篇章。该技术以其灵活性、易用性且扩展性强等优势,大大加快了基因工程研究,也加速了植物分子育种的步伐。但是,遗传转化过程中产生大量潜在的基因编...
以CRISPR/Cas9技术为代表的基因组编辑在生物领域的革命性应用使得生命科学研究迈入新篇章。该技术以其灵活性、易用性且扩展性强等优势,大大加快了基因工程研究,也加速了植物分子育种的步伐。但是,遗传转化过程中产生大量潜在的基因编辑植株,使得早期高通量快速筛选和检测目标编辑植株面临很大挑战。本文综述了近年来植物基因组编辑检测的各种方法,比较了其优缺点和适用范围;同时,还对近几年植物基因组编辑检测方法的发展趋势进行了深入分析和展望,以期对基因组编辑技术在植物中的应用提供参考。
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关键词
非同源末端连接
同源重组
PCR/RE
错配切割
Sanger测序法
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职称材料
CRISPR/Cas核糖核蛋白介导的植物基因组编辑
被引量：
6
2
作者
李霞
施皖
+1 位作者
耿立召
许建平
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期556-564,共9页
CRISPR/Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated proteins)系统作为一种重要的基因编辑工具,自诞生以来被广泛应用于作物的性状改良。与CRISPR/Cas DNA载体介导的植物基因组编辑相比,CRISPR/...
CRISPR/Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated proteins)系统作为一种重要的基因编辑工具,自诞生以来被广泛应用于作物的性状改良。与CRISPR/Cas DNA载体介导的植物基因组编辑相比,CRISPR/Cas核糖核蛋白(CRISPR/Cas ribonucleoprotein,CRISPR/Cas RNP)介导的植物基因组编辑具有作用迅速、脱靶率低和无外源DNA插入(DNA-free)等优点,因而无需清除CRISPR编辑工具而更容易获得纯合的编辑体。但是,由于植物细胞转化方法和细胞再生技术的限制,不借助筛选标记的辅助将CRISPR/Cas RNP直接导入植物细胞并获得高效基因编辑仍比较困难,直接限制了CRISPR/Cas RNP在植物基因组编辑中的广泛应用。本文系统介绍了CRISPR/Cas RNP基因组编辑技术的分子作用机理及其优势,并总结了CRISPR/Cas RNP导入植物细胞的方法,最后对CRISPR/Cas RNP在植物基因组编辑中的新应用和新思路进行了展望,以期为进一步改进CRISPR/Cas RNP基因组编辑技术和扩大其在作物改良中的应用提供参考。
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关键词
CRISPR/Cas
基因编辑
核糖核蛋白
无外源DNA插入
植物转化
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职称材料
题名
植物基因组编辑检测方法
被引量：
7
1
作者
刘春霞
耿立召
许建平
机构
先正达北京创新中心
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期1075-1091,共17页
文摘
以CRISPR/Cas9技术为代表的基因组编辑在生物领域的革命性应用使得生命科学研究迈入新篇章。该技术以其灵活性、易用性且扩展性强等优势,大大加快了基因工程研究,也加速了植物分子育种的步伐。但是,遗传转化过程中产生大量潜在的基因编辑植株,使得早期高通量快速筛选和检测目标编辑植株面临很大挑战。本文综述了近年来植物基因组编辑检测的各种方法,比较了其优缺点和适用范围;同时,还对近几年植物基因组编辑检测方法的发展趋势进行了深入分析和展望,以期对基因组编辑技术在植物中的应用提供参考。
关键词
非同源末端连接
同源重组
PCR/RE
错配切割
Sanger测序法
Keywords
non-homologous end joining(NHEJ)
homologous recombination(HR)
PCR/RE
mismatch cleavageassay
Sanger sequencing
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
CRISPR/Cas核糖核蛋白介导的植物基因组编辑
被引量：
6
2
作者
李霞
施皖
耿立召
许建平
机构
先正达北京创新中心
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期556-564,共9页
文摘
CRISPR/Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated proteins)系统作为一种重要的基因编辑工具,自诞生以来被广泛应用于作物的性状改良。与CRISPR/Cas DNA载体介导的植物基因组编辑相比,CRISPR/Cas核糖核蛋白(CRISPR/Cas ribonucleoprotein,CRISPR/Cas RNP)介导的植物基因组编辑具有作用迅速、脱靶率低和无外源DNA插入(DNA-free)等优点,因而无需清除CRISPR编辑工具而更容易获得纯合的编辑体。但是,由于植物细胞转化方法和细胞再生技术的限制,不借助筛选标记的辅助将CRISPR/Cas RNP直接导入植物细胞并获得高效基因编辑仍比较困难,直接限制了CRISPR/Cas RNP在植物基因组编辑中的广泛应用。本文系统介绍了CRISPR/Cas RNP基因组编辑技术的分子作用机理及其优势,并总结了CRISPR/Cas RNP导入植物细胞的方法,最后对CRISPR/Cas RNP在植物基因组编辑中的新应用和新思路进行了展望,以期为进一步改进CRISPR/Cas RNP基因组编辑技术和扩大其在作物改良中的应用提供参考。
关键词
CRISPR/Cas
基因编辑
核糖核蛋白
无外源DNA插入
植物转化
Keywords
CRISPR/Cas
genome editing
ribonucleoprotein(RNP)
DNA-free
plant transformation
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
植物基因组编辑检测方法
刘春霞
耿立召
许建平
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2018
7
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职称材料
2
CRISPR/Cas核糖核蛋白介导的植物基因组编辑
李霞
施皖
耿立召
许建平
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2020
6
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