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猪肺炎支原体实时荧光重组酶介导的等温扩增快速检测方法的建立和应用: 1; 作者康浩然黄雨薇 +7 位作者宋程高鹏张永宁周磊盖新娜韩军郭鑫杨汉春《中国兽医杂志》北大核心 2025年第9期1-9,共9页; 猪肺炎支原体(Mhp)是引起猪支原体肺炎(MPS)的病原,给全球养猪业带来了巨大的经济损失。早期快速诊断和实时监测对该病的防控至关重要,目前常用的核酸检测方法难以满足临床上即时检测(POCT)的实际需求。本试验针对Mhp细胞膜表面脂蛋白基... 展开更多; 关键词重组酶介导的等温扩增技术猪肺炎支原体实时荧光定量PCR 快速检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸭坦布苏病毒单克隆抗体的制备和治疗效果分析被引量：2: 2; 作者王丹娜乌兰李三《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期27-31,共5页; 为了制备、筛选和评价治疗鸭坦布苏病毒(DTMUV)感染的中和抗体,本试验克隆DTMUV E基因,连接至原核表达载体pET-30a(+),转化至大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态,提取质粒,鉴定重组质粒pET30-E,转化E.coli BL21感受态,经异丙基-β-D-硫代半乳... 展开更多; 关键词鸭坦布苏病毒单克隆抗体中和活性治疗效果; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同免疫增强剂对杆状病毒表达猪圆环病毒2型Cap蛋白免疫效果的影响被引量：2: 3; 作者汤波刘奇 +7 位作者吕帅阳石磊王建华徐慧敏于萍萍刘飞石艳丽孙石静《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期526-531,共6页; 为了研究不同免疫增强剂对猪圆环病毒2型衣壳蛋白(PCV2-Cap)免疫效果的影响,本研究将BALB/c小鼠随机分为10组,分别为非免疫对照组(Control组),Cap蛋白免疫对照组(Cap组),佐剂疫苗免疫对照组(15A组),以及佐剂组(IL-2组、Poly I:C组、R84... 展开更多; 关键词免疫增强剂免疫效果 PCV2 CAP蛋白细胞因子; 在线阅读下载PDF 职称材料

蜂胶佐剂在兽用疫苗中的应用被引量：1: 4; 作者王建华徐慧敏《农业技术与装备》 2022年第5期140-141,144,共3页; 随着相关研究实践的不断深入,蜂胶在兽用疫苗层面的应用实践也已经得到了业内人士的关注和重视。文章结合工作经验,在分析整合国内外学者研究现状的基础上,对蜂胶佐剂在兽用疫苗中的应用问题进行了研究论述,希望能够进一步推进各项细节... 展开更多; 关键词蜂胶兽用疫苗佐剂应用实践; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪肺炎支原体实时荧光重组酶介导的等温扩增快速检测方法的建立和应用: 1; 作者康浩然黄雨薇宋程高鹏张永宁周磊盖新娜韩军郭鑫杨汉春; 机构中国农业大学动物医学院兽医公共卫生安全全国重点实验室中国农业大学动物医学院农业农村部动物流行病学重点实验室兆丰华生物科技(南京)有限公司北京生物医药科技中心; 出处《中国兽医杂志》北大核心 2025年第9期1-9,共9页; 基金教育部产学合作协同育人项目(220904860093831)。; 文摘猪肺炎支原体(Mhp)是引起猪支原体肺炎(MPS)的病原,给全球养猪业带来了巨大的经济损失。早期快速诊断和实时监测对该病的防控至关重要,目前常用的核酸检测方法难以满足临床上即时检测(POCT)的实际需求。本试验针对Mhp细胞膜表面脂蛋白基因p46,通过序列比对和系统性的引物筛选设计了exo探针及其对应的重组酶介导的等温扩增(RAA)技术引物对,建立了Mhp实时荧光(real-time)RAA快速检测方法;随后,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检测,并使用该方法和实时荧光定量PCR(qPCR)对比检测临床样本。结果显示,该方法与猪链球菌、肺炎克雷伯氏菌、猪格拉瑟氏菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门菌和大肠杆菌均无交叉反应,特异性好;Mhp real-time RAA及其可视化方法的检测敏感性分别为18和29 copies/μL(95%置信区间),敏感性强;组内和组间重复性试验变异系数均小于8.0%,重复性好;对108份猪临床样本的检测结果显示,该方法及其可视化方法与Mhp qPCR方法的符合率分别为98.15%和99.07%。本试验所建立Mhp real-time RAA方法可以通过便捷式蓝光仪器实现结果的可视化,更适用于资源匮乏的诊断实验室和基层现场,为MPS的防控提供了技术手段。; 关键词重组酶介导的等温扩增技术猪肺炎支原体实时荧光定量PCR 快速检测; Keywords recombinase-aided amplification Mycoplasma hyopneumoniae quantitative real-time polymerase chain reac⁃tion rapid detection; 分类号 S855.1 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸭坦布苏病毒单克隆抗体的制备和治疗效果分析被引量：2: 2; 作者王丹娜乌兰李三; 机构兆丰华生物科技(南京)有限公司北京生物医药科技中心; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期27-31,共5页; 文摘为了制备、筛选和评价治疗鸭坦布苏病毒(DTMUV)感染的中和抗体,本试验克隆DTMUV E基因,连接至原核表达载体pET-30a(+),转化至大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态,提取质粒,鉴定重组质粒pET30-E,转化E.coli BL21感受态,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析E蛋白表达,使用镍柱亲和层析纯化E蛋白,将E蛋白与弗氏佐剂混合、乳化,免疫6周龄雌性BALB/c小鼠3次后,取小鼠脾脏,分离脾细胞,在聚乙二醇(PEG)的作用下,将脾细胞与SP2/0细胞融合,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)筛选分泌抗E蛋白抗体的杂交瘤细胞株,通过Western blot进行单克隆抗体鉴定,通过间接免疫荧光技术检测DTMUV,病毒中和试验评价单克隆抗体中和DTMUV感染的能力,并评价单克隆抗体治疗DTMUV感染小鼠的能力。结果显示,含质粒pET30-E的E.coli BL21经诱导后可在裂解的沉淀物中表达E蛋白;制备的E蛋白单克隆抗体4A1可以与E蛋白发生免疫反应,不与鸭A型肝炎病毒、呼肠孤病毒、新城疫病毒、细小病毒和H9亚型禽流感病毒发生交叉反应;4A1株杂交瘤细胞株分泌的抗体对DTMUV具有中和活性,且能够很好地识别DTMUV并与之发生中和反应,可完全清除感染小鼠血液中的DTMUV。结果表明,本试验制备的单克隆抗体4A1在应对DTMUV感染方面具有潜在治疗价值。; 关键词鸭坦布苏病毒单克隆抗体中和活性治疗效果; Keywords duck tembusu virus monoclonal antibody neutralizing activity therapeutic effect; 分类号 S834 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同免疫增强剂对杆状病毒表达猪圆环病毒2型Cap蛋白免疫效果的影响被引量：2: 3; 作者汤波刘奇吕帅阳石磊王建华徐慧敏于萍萍刘飞石艳丽孙石静; 机构兆丰华生物科技(南京)有限公司北京生物医药科技中心中国农业大学动物医学院北京景达医疗器械有限公司; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期526-531,共6页; 基金 2018年度北京市优秀人才培养资助青年拔尖团队项目。; 文摘为了研究不同免疫增强剂对猪圆环病毒2型衣壳蛋白(PCV2-Cap)免疫效果的影响,本研究将BALB/c小鼠随机分为10组,分别为非免疫对照组(Control组),Cap蛋白免疫对照组(Cap组),佐剂疫苗免疫对照组(15A组),以及佐剂组(IL-2组、Poly I:C组、R848组、QuilA组、QS21组、MPLA组)、商品疫苗免疫对照组(Con-V组),选择6种不同的免疫增强剂(IL-2、PolyI:C、R848、Quil-A、QS21、MPLA)分别与等量PCV2-Cap蛋白(15μg/只)混合制备疫苗,免疫BALB/c小鼠,免疫后定期采血,采用相应试剂盒检测PCV2抗体和细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-12水平;免疫28 d,对所有小鼠以0.5 mL/只剂量腹腔注射PCV2 SX-07株(1×106.0TCID50/mL),攻毒后21 d采集全血,利用PCR方法检测PCV2病毒血症。结果显示,各佐剂疫苗免疫后对小鼠存在短暂的刺激,但能快速恢复正常,对小鼠安全性优于对照商品疫苗;抗体检测结果显示,首免后21 d,IL-2组、QuilA组和MPLA组小鼠抗体水平高于其他佐剂组,IL-2组、QuilA组均高于Cap组和15A组,且差异极显著(P<0.05),IL-2组、QuilA组和MPLA组高于Con-V组,但差异不显著(P>0.05);首免后28 d抗体检测结果显示,IL-2组、QuilA组、QS21组和MPLA组小鼠抗体水平高于Con-V组,但差异不显著(P>0.05),且所有佐剂组和Con-V组均高于Cap组,且差异均显著(P<0.05);细胞因子检测结果显示,MPLA组小鼠的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-12等各细胞因子表达水平均显著高于其他组(P<0.05);QS21组TNF-α的表达水平最高;MPLA、QS21、IL-2、R848诱导小鼠特异性细胞免疫的能力高于商品佐剂和商品疫苗;病毒血症检测结果显示,Control组中小鼠PCV2攻毒后均为PCV2病毒血症阳性,Cap蛋白组中33.3%小鼠为阳性,15A组中16.7%为阳性,其他组均为阴性。综合以上研究结果首次表明,在6种选用的增强剂中,MPLA、IL-2和QS21既能够提高PCV2 Cap蛋白疫苗免疫后机体的抗体水平,又能显著提高免疫后的细胞免疫应答水平,为PCV2亚单位疫苗的新型佐剂后期开发和应用奠定实验基础。; 关键词免疫增强剂免疫效果 PCV2 CAP蛋白细胞因子; Keywords immunostimulant efficiency of immune response porcine circovirus type 2(PCV2) Cap protein cytokines; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蜂胶佐剂在兽用疫苗中的应用被引量：1: 4; 作者王建华徐慧敏; 机构兆丰华生物科技(南京)有限公司北京生物医药科技中心; 出处《农业技术与装备》 2022年第5期140-141,144,共3页; 文摘随着相关研究实践的不断深入,蜂胶在兽用疫苗层面的应用实践也已经得到了业内人士的关注和重视。文章结合工作经验,在分析整合国内外学者研究现状的基础上,对蜂胶佐剂在兽用疫苗中的应用问题进行了研究论述,希望能够进一步推进各项细节工作的优化调整,营造出全新的兽用免疫佐剂应用开发格局。; 关键词蜂胶兽用疫苗佐剂应用实践; Keywords propolis veterinary vaccine adjuvant application practice; 分类号 S859.1 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪肺炎支原体实时荧光重组酶介导的等温扩增快速检测方法的建立和应用	康浩然黄雨薇宋程高鹏张永宁周磊盖新娜韩军郭鑫杨汉春	《中国兽医杂志》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	鸭坦布苏病毒单克隆抗体的制备和治疗效果分析	王丹娜乌兰李三	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2024	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	不同免疫增强剂对杆状病毒表达猪圆环病毒2型Cap蛋白免疫效果的影响	汤波刘奇吕帅阳石磊王建华徐慧敏于萍萍刘飞石艳丽孙石静	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	蜂胶佐剂在兽用疫苗中的应用	王建华徐慧敏	《农业技术与装备》	2022	1	在线阅读下载PDF 职称材料