期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
骨发育相关基因在SEDT中差异表达的研究
1
作者 胡玉娟 熊丰 +2 位作者 朱高慧 罗庆 朱岷 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期118-123,共6页
目的:分别靶向增强和干扰人软骨细胞(human chondrocytes-articular,HC-a)X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良(Xlinked spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDL)基因,骨再生PCR芯片检测细胞内骨发育相关基因表达变化,观察干扰后基因表达谱... 目的:分别靶向增强和干扰人软骨细胞(human chondrocytes-articular,HC-a)X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良(Xlinked spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDL)基因,骨再生PCR芯片检测细胞内骨发育相关基因表达变化,观察干扰后基因表达谱的变化。方法:分别转入前期构建的靶向增强SEDL的腺病毒质粒p Ad5-SEDL和靶向干扰SEDL的慢病毒质粒LVsi SEDL到293T细胞包装成重组腺病毒p Ad5-SEDL和重组慢病毒LV-si SEDL,扩增重组腺病毒,收集病毒液,检测病毒滴度。将重组腺病毒、重组慢病毒以最适感染复数(multiplicity of infection,MOI)分别感染HC-a,实验分4组:增强组(HC-a/p Ad5-SEDL,重组腺病毒p Ad5-SEDL感染HC-a增强SEDL基因表达)、增强阴性对照组(HC-a/空载体(p Ad5),空白腺病毒p Ad5感染HC-a作阴性对照)、干扰组(HC-a/LV-si SEDL,重组慢病毒LV-si SEDL感染HC-a干扰SEDL基因表达)、干扰阴性对照组(HC-a/空载体(LV),空白慢病毒LV感染HC-a作阴性对照),通过QPCR检测HC-a中SEDL基因表达、Western blot检测HC-a中sedlin蛋白表达,验证是否成功干扰或增强SEDL基因表达,收集4组细胞m RNA进行骨再生PCR芯片(含84个基因)检测。结果:(1)收获高滴度重组腺病毒p Ad5-SEDL,病毒滴度为2.6×1011 pfu/ml。并使重组腺病毒p Ad5-SEDL和重组慢病毒LV-si SEDL成功感染HC-a。(2)HC-a SEDL基因表达量中增强组(2.14±0.36)较增强阴性对照组(1.21±0.25)增高(P=0.022),干扰组(0.86±0.11)较干扰阴性对照组(1.34±0.06)降低(P=0.003);sedlin蛋白表达量中,增强组(0.56±0.04)较增强阴性对照组(0.37±0.05)增高(P=0.006),干扰组(0.13±0.02)较干扰阴性对照组(0.36±0.04)降低(P=0.001)。(3)基因芯片结果:HC-a内SEDL基因干扰后,芯片结果显示:基因上调21个,下调5个。HC-a内SEDL基因增强后,骨再生PCR芯片结果显示:基因上调27个,下调12个。干扰组的差异表达基因中,在增强组中呈反向变化,且与软骨发育相关的基因有5个:COL2A、BMP3、FLT1、GDF10、IGF1。结论:通过增强及沉默软骨细胞内SEDL基因,发现骨发育相关基因中COL2A、BMP3、FLT1、GDF10、IGF1出现差异表达,可能与SEDL基因有关联。 展开更多
关键词 X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良 基因芯片 基因重组病毒
在线阅读 下载PDF
外周血hsa-miR-342-5p诊断儿童结核的特异度和灵敏度 被引量:1
2
作者 周梦瑶 詹学 张祯祯 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期784-787,共4页
目的评估外周血hsa-miR-342-5p检测对早期诊断儿童结核的价值。方法收集初治涂片阳性、涂片阴性结核患儿,肺炎患儿和正常儿童各20例,采集静脉血,TRIzol法提取外周血总RNA,q RT-PCR检测hsa-mi R-342-5p在各组间的相对表达水平,ROC曲线分... 目的评估外周血hsa-miR-342-5p检测对早期诊断儿童结核的价值。方法收集初治涂片阳性、涂片阴性结核患儿,肺炎患儿和正常儿童各20例,采集静脉血,TRIzol法提取外周血总RNA,q RT-PCR检测hsa-mi R-342-5p在各组间的相对表达水平,ROC曲线分析hsa-mi R-342-5p诊断儿童结核的特异度和灵敏度。结果 hsa-mi R-342-5p在涂片阳性结核、涂片阴性结核患儿、肺炎患儿和正常儿童四组间的差异具有统计学意义(F=21.94,P=0.00)。与正常儿童相比,hsami R-342-5p在涂片阳性结核、涂片阴性结核和肺炎患儿中的表达水平均下调,差异有统计学意义(P均<0.01);与肺炎患儿相比,hsa-mi R-342-5p在涂片阳性结核、涂片阴性结核患儿中的表达也明显下调,差异有统计学意义(P<0.01)。对于区分涂片阳性结核和肺炎,hsa-mi R-342-5p的特异度和灵敏度性均为90%;而区分涂片阴性结核和肺炎,其特异度和灵敏度分别为65%和100%。结论外周血hsa-mi R-342-5p有望成为新的分子指标用于儿童结核的早期诊断。 展开更多
关键词 微小RNA 生物标志 结核 诊断 儿童
在线阅读 下载PDF
血红素加氧酶-1联合C反应蛋白对川崎病冠状动脉病变的预测研究 被引量:7
3
作者 何先凤 张静 +2 位作者 钟家蓉 邓兵 陈华琼 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期1881-1885,共5页
目的探讨川崎病(kawasaki disease,KD)患儿血清血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)与C反应蛋白(C reactive protein,CRP)水平变化对川崎病冠状动脉病变(coronary artery lesions,CAL)的预测作用。方法采集KD患儿外周血89例,分为无... 目的探讨川崎病(kawasaki disease,KD)患儿血清血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)与C反应蛋白(C reactive protein,CRP)水平变化对川崎病冠状动脉病变(coronary artery lesions,CAL)的预测作用。方法采集KD患儿外周血89例,分为无冠脉病变(NCAL)组35例、扩张内径<5 mm冠脉病变(CAL<5 mm)组44例,及扩张内径≥5 mm冠脉病变(CAL≥5 mm)组10例,并设置发热对照(F)组34例和健康对照(N)组45例。检测血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)、HO-1、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),并结合CRP和Hb进行分析,对部分患儿IVIG治疗前后以上指标进行对比。结果急性期,KD各组MDA水平显著增高;CAL<5 mm组HO-1明显高于其他4组;仅CAL≥5 mm组SOD水平低于N组;CAL≥5 mm组CRP显著高于其他4组。在HO-1≥9 ng/m L的30例KD患者中,当CRP>44 mg/L时,CAL的发生率为56.52%(13/23),明显高于NCAL(0%,0/7)。在HO-1<9 ng/m L的31例CAL患者中,当CRP>85 mg,CAL≥5 mm的发生率为(88.89%,8/9),明显高于CAL<5 mm的发生率(36.36%,8/22)。CAL组HO-1与Hb呈负相关(r=-0.37,P<0.05)。IVIG治疗后,KD患者H0-1明显升高,仅CAL组MDA水平下降明显,SOD的改变并不显著(P>0.05)。结论联合应用HO-1与CRP的水平变化,可能对于川崎病急性期预测冠脉病变发生与否及严重程度具有重要的意义。 展开更多
关键词 川崎病 冠状动脉病变 血红素加氧酶-1 C反应蛋白 氧化应激 炎症反应
在线阅读 下载PDF
小鼠骨髓源树突状细胞体外诱导培养及初步鉴定 被引量:4
4
作者 刘铮 代继宏 +1 位作者 符州 冯琳琳 《生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期25-27,31,共4页
用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)体外诱导小鼠骨髓细胞分化为树突状细胞,进行形态学变化观察,分析细胞表面分子,刺激T细胞增殖,探讨小鼠骨髓源树突状细胞(BMDC)体外诱导培养并进行初步... 用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)体外诱导小鼠骨髓细胞分化为树突状细胞,进行形态学变化观察,分析细胞表面分子,刺激T细胞增殖,探讨小鼠骨髓源树突状细胞(BMDC)体外诱导培养并进行初步鉴定。体外培养9d后BMDC可达80%以上,光镜下可见典型的树突状细胞形态。清楚表达成熟期主要表面标志物,可显著刺激同种异体混合淋巴细胞增殖。获得了较高纯度的BMDC,避免了使用传统磁珠分离方法所带来的成本高,操作复杂,产出率低的弊端,为研究BMDC功能以及运用开展下游实验提供材料。 展开更多
关键词 树突状细胞 体外诱导培养 初步鉴定
在线阅读 下载PDF
微创外科封堵术治疗婴幼儿房、室间隔缺损 被引量:2
5
作者 赵录 安永 +7 位作者 吴春 潘征夏 李勇刚 李洪波 王刚 代江涛 雷洪波 夏世辉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期123-126,共4页
目的:观察微创外科封堵术治疗婴幼儿房间隔缺损(atrial septal defect,ASD)、室间隔缺损(ventricular septal defect,VSD)的疗效。方法:我科76例患儿成功行经食管心脏超声微创外科封堵术,对其手术时间、住院时间、并发症等进行统... 目的:观察微创外科封堵术治疗婴幼儿房间隔缺损(atrial septal defect,ASD)、室间隔缺损(ventricular septal defect,VSD)的疗效。方法:我科76例患儿成功行经食管心脏超声微创外科封堵术,对其手术时间、住院时间、并发症等进行统计分析,评价疗效。结果:76例患儿手术顺利,无死亡及封堵器脱落发生。ASD患儿28例,年龄6月~12岁,平均体质量13 kg,平均总住院时间10 d,平均手术时间75 min,术后使用呼吸机时间平均193 min,术后随访心脏彩超均提示封堵器位置良好,无残余分流、心律失常等并发症,VSD患儿48例,年龄1岁~12岁10月,平均体质量15 kg,平均总住院时间11 d,平均手术时间93 min,术后使用呼吸机时间平均170 min,术后随访彩超提示封堵器位置良好,无残余分流46例,2例极少量残余分流,1例出现室性早搏,1例不全性右束支传导阻滞。结论:微创外科封堵术是治疗儿童房、室间隔缺损的一种技术成熟,损伤小,术后恢复快,并发症少,可控性高,安全有效的方法,适合各年龄阶段婴幼儿。 展开更多
关键词 微创外科 婴幼儿 房间隔缺损 室间隔缺损
在线阅读 下载PDF
TGF-β2对心肌细胞H9C2转录因子表达的影响及其组蛋白H3乙酰化调控机制 被引量:2
6
作者 王文文 田杰 +2 位作者 郑敏 孙慧超 陈国珍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期639-643,共5页
目的探讨转化生长因子-β2(transforming growth factor beta2,TGF-β2)对心肌细胞H9C2转录因子Mef2c和GATA4的影响及其与组蛋白H3乙酰化的关系。方法比较TGF-β2对细胞生长的影响。利用Real-time PCR检测心肌细胞的心脏相关转录因子Me... 目的探讨转化生长因子-β2(transforming growth factor beta2,TGF-β2)对心肌细胞H9C2转录因子Mef2c和GATA4的影响及其与组蛋白H3乙酰化的关系。方法比较TGF-β2对细胞生长的影响。利用Real-time PCR检测心肌细胞的心脏相关转录因子Mef2c和GATA4 mRNA的相对表达量,筛选合适的TGF-β2干预浓度。采用Western blot检测心肌细胞乙酰化组蛋白H3(acetylated histone H3,acH3)的表达差异。染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)Real-time PCR检测Mef2c和GATA4启动子区与acH3结合DNA的相对表达水平。比色分析法检测TGF-β2对心肌细胞的总体组蛋白乙酰化酶(HATs)活性的影响。结果①TGF-β2干预组相对于对照组心肌细胞的增殖能力增强(P<0.05)。②心肌细胞的心脏相关转录因子Mef2c和GATA4 mRNA的相对表达量随着TGF-β2浓度的升高呈现先升高后降低的趋势,在5μg/L的浓度时均达到最高,Mef2c mRNA相对表达量是对照组的1.8倍,GATA4 mRNA是对照组的2.3倍(P<0.05)。③TGF-β2干预72 h后acH3蛋白表达量是对照组的4倍(P<0.05),HATs活性是对照组的1.34倍(P<0.05)。④TGF-β2干预组Mef2c和GATA4启动子区组蛋白H3的乙酰化水平分别是对照组的2.56和2.16倍(P<0.05)。结论 5μg/L TGF-β2可以促进心肌细胞H9C2的分裂与增殖,并上调心脏相关转录因子Mef2c和GATA4的表达,组蛋白H3乙酰化水平的升高可能是Mef2c和GATA4表达上调的机制之一。 展开更多
关键词 TGF—β2 心肌细胞H9C2 组蛋白H3 乙酰化 表观遗传学
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部