目的:初步研究肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)入侵人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的机制。方法:将临床EV71分离株接种于人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞,扩增和纯化病毒;MTT法检测不同病毒胞吞途径阻断剂对SKN-SH细胞生长...目的:初步研究肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)入侵人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的机制。方法:将临床EV71分离株接种于人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞,扩增和纯化病毒;MTT法检测不同病毒胞吞途径阻断剂对SKN-SH细胞生长抑制作用;用特异性的化学阻断剂预处理靶细胞后,Taq Man real-time PCR验证其对EV71 m RNA表达的影响。结果:RD细胞能够成功扩增出EV71病毒,病毒滴度为1×105 TCID50。随着药物浓度梯度的增加,SK-N-SH细胞的生长增殖受到抑制。Taq Man荧光定量RT-PCR结果显示氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)能够抑制EV71 m RNA的表达(Ρ<0.05),制霉菌素(nystatin,NT)对其影响不大(Ρ>0.05)。结论:初步推测EV71入侵SK-N-SH细胞是通过网格蛋白依赖性的内吞作用入胞。展开更多
目的：探讨5例乙肝疫苗接种失败儿童及其母亲在母婴传播过程中乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）＂a＂决定簇准种变化趋势。方法：选择5例重庆地区乙肝疫苗接种失败的儿童及其母亲,应用PCR法扩增其HBV基因组全长,构建HBV全基因组...目的：探讨5例乙肝疫苗接种失败儿童及其母亲在母婴传播过程中乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）＂a＂决定簇准种变化趋势。方法：选择5例重庆地区乙肝疫苗接种失败的儿童及其母亲,应用PCR法扩增其HBV基因组全长,构建HBV全基因组测序文库后进行solexa高通量测序,并对测序数据进行生物信息学分析。结果：母子HBV序列同源性为99%～100%;5对母子HBV基因型均为B＋C混合型,其中4对优势基因型为B型,1对为C型,母子优势基因型相同;所有儿童均在＂a＂决定簇存在复杂度明显增高位点;5对母子＂a＂决定簇复杂度明显增高的氨基酸（Amino acid,aa）位点共有10个,仅存在于儿童的有2个,为aa126和aa143,儿童中有1例发生优势氨基酸突变,突变形式为G145R。结论：乙肝疫苗接种失败儿童在＂a＂决定簇存在准种现象,儿童体内的突变株可能来源于其母亲。展开更多
文摘目的:初步研究肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)入侵人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的机制。方法:将临床EV71分离株接种于人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞,扩增和纯化病毒;MTT法检测不同病毒胞吞途径阻断剂对SKN-SH细胞生长抑制作用;用特异性的化学阻断剂预处理靶细胞后,Taq Man real-time PCR验证其对EV71 m RNA表达的影响。结果:RD细胞能够成功扩增出EV71病毒,病毒滴度为1×105 TCID50。随着药物浓度梯度的增加,SK-N-SH细胞的生长增殖受到抑制。Taq Man荧光定量RT-PCR结果显示氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)能够抑制EV71 m RNA的表达(Ρ<0.05),制霉菌素(nystatin,NT)对其影响不大(Ρ>0.05)。结论:初步推测EV71入侵SK-N-SH细胞是通过网格蛋白依赖性的内吞作用入胞。
文摘目的：探讨5例乙肝疫苗接种失败儿童及其母亲在母婴传播过程中乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）＂a＂决定簇准种变化趋势。方法：选择5例重庆地区乙肝疫苗接种失败的儿童及其母亲,应用PCR法扩增其HBV基因组全长,构建HBV全基因组测序文库后进行solexa高通量测序,并对测序数据进行生物信息学分析。结果：母子HBV序列同源性为99%～100%;5对母子HBV基因型均为B＋C混合型,其中4对优势基因型为B型,1对为C型,母子优势基因型相同;所有儿童均在＂a＂决定簇存在复杂度明显增高位点;5对母子＂a＂决定簇复杂度明显增高的氨基酸（Amino acid,aa）位点共有10个,仅存在于儿童的有2个,为aa126和aa143,儿童中有1例发生优势氨基酸突变,突变形式为G145R。结论：乙肝疫苗接种失败儿童在＂a＂决定簇存在准种现象,儿童体内的突变株可能来源于其母亲。
