miR-543/SNTB1轴调控结直肠癌免疫微环境

1

作者 张敏 李敏 +3 位作者 肖猛 陈才 郑小菊 雷雨广 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第13期1484-1493,共10页

目的探讨miR-543/互养蛋白β1(syntrophin beta 1,SNTB1)轴在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的临床意义及其对免疫微环境的影响。方法收集癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因型组织表达(Genotype-Tissue Expressio... 目的探讨miR-543/互养蛋白β1(syntrophin beta 1,SNTB1)轴在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的临床意义及其对免疫微环境的影响。方法收集癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因型组织表达(Genotype-Tissue Expression,GTEx)、人类蛋白质图谱(Human Protein Atlas,HPA)等公开数据对CRC组织中SNTB1的表达进行分析,并通过Kaplan-Meier生存分析、单因素Cox回归分析及相关性分析评估SNTB1在CRC患者中的预后价值及其与免疫微环境的关系。在线数据库结合CRC细胞HT-29荧光活性实验检测miR-543与SNTB1的靶向关系。CRC细胞HT-29经过相应处理后(转染si-SNTB1、miR-543 mimics或/和SNTB1过表达质粒)与CD8^(+)T细胞构建体外共培养体系,分别采用RT-qPCR、Western blot、流式细胞术、ELISA以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验检测miR-543、SNTB1的表达以及CD8^(+)T细胞的活性及细胞毒性。结果对公共数据库的分析显示SNTB1在CRC中的表达显著高于正常组织(P<0.001);相较于SNTB1低表达组,SNTB1高表达的患者预后较差(P<0.05)。SNTB1高表达与CRC肿瘤微环境免疫评分以及CD8^(+)T细胞等免疫细胞的浸润呈负相关关系(P<0.05),且在HT-29细胞中敲减SNTB1可增强CD8^(+)T细胞的杀伤力(P<0.01)。在线数据库结合细胞实验证实了miR-543和SNTB1的靶向结合关系,同时miR-543在CRC中表达降低(P<0.001)。转染miR-543 mimic可抑制HT-29细胞中SNTB1的表达(P<0.001),而过表达SNTB1可逆转miR-543 mimic对CD8^(+)T细胞体外杀伤能力的促进效应(P<0.05)。结论miR-543可通过与SNTB1的靶向结合促进CD8^(+)T细胞的活化并增强其对HT-29细胞的杀伤力。 展开更多

关键词 miR-543 结直肠癌 互养蛋白β1 肿瘤免疫微环境

在线阅读 下载PDF 职称材料

河南信阳地区种猪群衣原体血清抗体检测

2

作者 马超锋 高进勇 +3 位作者 胡积霞 李何 马云 徐永杰 《动物医学进展》 北大核心 2016年第10期119-122,共4页

为了解信阳地区种猪群衣原体病流行情况,笔者于2013年3月—2015年10月,采用正向间接血凝试验(IHA)对信阳市65家猪场的1 324份猪血清样品进行了衣原体抗体检测。结果显示,猪衣原体抗体阳性猪场有27个,占检测猪场的41.5%,抗体阳性率为11.3... 为了解信阳地区种猪群衣原体病流行情况,笔者于2013年3月—2015年10月,采用正向间接血凝试验(IHA)对信阳市65家猪场的1 324份猪血清样品进行了衣原体抗体检测。结果显示,猪衣原体抗体阳性猪场有27个,占检测猪场的41.5%,抗体阳性率为11.3%;2013年—2015年抗体阳性率分别为10.1%、11.4%和12.1%;不同季节抗体阳性率有变化,夏季最高,为13.1%,冬季最低,为9.6%;不同性别间抗体阳性率,母猪为11.7%,公猪为11.0%;1岁以内抗体阳性率最低,为8.0%,3岁以上最高,达到16.8%;不同年龄间猪衣原体抗体阳性率差异极显著(P<0.01),且随年龄增长阳性率有增长的趋势,不同年份、不同季节、不同性别间抗体阳性率差异不显著(P>0.05)。鉴于猪衣原体病的流行状况,建议有关部门要做好该病的防控工作。 展开更多

关键词 种猪 衣原体病 正向间接血凝试验 血清抗体 检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

双水相萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定倒提壶中8种生物碱 被引量：6

3

作者 樊轻亚 许卫军 代春美 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1328-1334,共7页

建立了乙醇-磷酸氢二钾双水相萃取技术结合超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定倒提壶中8种生物碱含量的方法。采用单因素实验考察了双水相的萃取条件对倒提壶中8种生物碱萃取率的影响,最佳萃取条件为:乙醇质量分数为30%,K2... 建立了乙醇-磷酸氢二钾双水相萃取技术结合超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定倒提壶中8种生物碱含量的方法。采用单因素实验考察了双水相的萃取条件对倒提壶中8种生物碱萃取率的影响,最佳萃取条件为:乙醇质量分数为30%,K2HPO4·3H2O的质量分数为20%,萃取剂与样品相比为6∶1,水相的pH值为4.0。以乙腈-0.1 mol/L醋酸铵为流动相进行UHPLC-MS/MS分析,8种生物碱之间具有良好的分离度,各成分在一定质量浓度范围内具有良好的线性关系(r^2>0.99)。方法的精密度、重复性及加标回收率的相对标准偏差(RSD)均小于3.0%。方法简单快捷、灵敏准确,可满足倒提壶中生物碱检测的要求。 展开更多

关键词 倒提壶 生物碱 双水相萃取 超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)

在线阅读 下载PDF 职称材料

树脂法分离纯化倒提壶生物碱的研究 被引量：5

4

作者 樊轻亚 张宏辉 王万好 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1338-1342,共5页

采用阳离子交换树脂和大孔吸附树脂联用的方法,将倒提壶生物碱提取液依次经过阳离子交换树脂和两次大孔吸附树脂,对其中的天芥菜碱和毛果天芥菜碱进行分离纯化。结果表明,倒提壶生物碱溶液采用阳离子交换树脂经过水洗和NaCl洗脱与大孔... 采用阳离子交换树脂和大孔吸附树脂联用的方法,将倒提壶生物碱提取液依次经过阳离子交换树脂和两次大孔吸附树脂,对其中的天芥菜碱和毛果天芥菜碱进行分离纯化。结果表明,倒提壶生物碱溶液采用阳离子交换树脂经过水洗和NaCl洗脱与大孔吸附树脂两次经乙醚和50%乙醇洗脱后,毛果天芥菜碱与天芥菜碱的纯度分别从0.73%和2.2%提高至81.6%和79.2%,提取量分别由4.6 mg/g和10.7 mg/g提高至50.6mg/g和92.7 mg/g。该文所建立的分离纯化方法具有成本低、污染小、周期短、操作简便和分离纯化效率高等特点,适合工业化生产。 展开更多

关键词 阳离子交换树脂 大孔吸附树脂 倒提壶生物碱 天芥菜碱 毛果天芥菜碱 分离 纯化

在线阅读 下载PDF 职称材料

密闭微波辅助提取-HPLC法测定还亮草中硬飞燕草碱和巴比翠雀碱的含量 被引量：3

5

作者 樊轻亚 郝艳红 代春美 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期106-111,共6页

采用密闭微波辅助法(PMAE)提取还亮草中的硬飞燕草碱和巴比翠雀碱。采用单因素试验结合正交试验方法对微波实验条件进行优化。得到硬飞燕草碱和巴比翠雀碱的最佳提取方案:药物颗粒度100目,固液比1∶60,微波温度80℃,微波功率560 W,微波... 采用密闭微波辅助法(PMAE)提取还亮草中的硬飞燕草碱和巴比翠雀碱。采用单因素试验结合正交试验方法对微波实验条件进行优化。得到硬飞燕草碱和巴比翠雀碱的最佳提取方案:药物颗粒度100目,固液比1∶60,微波温度80℃,微波功率560 W,微波时间10 min。以甲醇-0.2%三乙胺(45∶55)为流动相,建立了高效液相色谱(HPLC)测定硬飞燕草碱和巴比翠雀碱含量的方法。硬飞燕草碱和巴比翠雀碱分别在0.50~50.0,0.30~30.0 mg/L范围内呈良好的线性关系,回收率为98.3%~104.5%,相对标准偏差(RSD)分别为2.0%和2.2%。与传统溶剂回流法(SRE)进行比较,该方法简单、提取率更高。 展开更多

关键词 还亮草 密闭微波提取 硬飞燕草碱 巴比翠雀碱 正交试验

在线阅读 下载PDF 职称材料

微波辐射-溶剂回流法提取/HPLC法测定倒提壶中天芥菜碱与毛果天芥菜碱的含量 被引量：3

6

作者 樊轻亚 李光霞 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期605-609,共5页

采用单因素试验,对微波辐射-溶剂回流提取法的实验条件进行优化,得到最佳提取条件：药材颗粒度100目,微波功率60%档（总功率为700 W）,微波辐射时间90 s,固液比1∶25,提取温度90℃,提取时间45 min。以天芥菜碱和毛果天芥菜碱为提取目标... 采用单因素试验,对微波辐射-溶剂回流提取法的实验条件进行优化,得到最佳提取条件：药材颗粒度100目,微波功率60%档（总功率为700 W）,微波辐射时间90 s,固液比1∶25,提取温度90℃,提取时间45 min。以天芥菜碱和毛果天芥菜碱为提取目标物,通过HPLC法测定其含量,其分析条件为：以乙腈-0.1%乙酸溶液（p H 5.6,体积比5∶95）为流动相,在220 nm处检测。毛果天芥菜碱和天芥菜碱的浓度在50~900 mg/L范围内均呈良好线性关系,检出限分别为1.50 mg/L和1.52 mg/L,加标回收率分别为95.0%~98.5%和96.5%~101%,RSD分别为1.8%和2.4%,方法简单、灵敏度高。 展开更多

关键词 微波辅射-溶剂回流法提取 倒提壶 天芥菜碱 毛果天芥菜碱 高效液相色谱法

在线阅读 下载PDF 职称材料

聚焦微波辅助提取/HPLC法测定倒提壶中天芥菜碱的含量 被引量：4

7

作者 樊轻亚 吴长忠 王万好 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1073-1077,共5页

采用正交实验方法对聚焦微波辅助提取（FMAE）的实验条件进行优化，以天芥菜碱为提取目标物，HPLC法测定其含量。通过优化，得到最佳实验条件：药材粒度60目，液料比l：35，微波功率420W，微波时间50min。HPLC分析条件：以甲醇-0.05％... 采用正交实验方法对聚焦微波辅助提取（FMAE）的实验条件进行优化，以天芥菜碱为提取目标物，HPLC法测定其含量。通过优化，得到最佳实验条件：药材粒度60目，液料比l：35，微波功率420W，微波时间50min。HPLC分析条件：以甲醇-0.05％三乙胺（pH7.5）（30：70）为流动相，在220nm处检测，天芥菜碱的线性范围为52～1040mg／L，相关系数（r）为0.9999，检出限为0.0402mg／L，其加标回收率为97.5％-103％，相对标准偏差为2.4％，方法简单、灵敏度高。 展开更多

关键词 聚焦微波辅助提取 倒提壶 天芥菜碱 高效液相色谱法

在线阅读 下载PDF 职称材料

液相色谱-串联质谱法测定农吉利中的黄酮类化合物 被引量：2

8

作者 樊轻亚 许卫军 王万好 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1023-1027,共5页

采用液相色谱-串联质谱法对农吉利中黄酮化合物进行定性和定量分析。农吉利干药材粉碎后,用甲醇提取,提取液经D101大孔吸附树脂净化后,以UltimateTMC18色谱柱为固定相,以甲醇-0.5%（φ）乙酸混合溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离... 采用液相色谱-串联质谱法对农吉利中黄酮化合物进行定性和定量分析。农吉利干药材粉碎后,用甲醇提取,提取液经D101大孔吸附树脂净化后,以UltimateTMC18色谱柱为固定相,以甲醇-0.5%（φ）乙酸混合溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源,分别在正离子和负离子扫描模式下对主要特征碎片离子进行解析。结果表明：提取液中含有牡荆苷、异牡荆苷、荭草苷、异荭草苷和金雀花苷等黄酮类化合物。荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷的质量浓度在一定范围内与其峰面积呈线性关系,检出限（3S/N）分别为50.2,40.5,52.1,42.1μg·L^-1。方法应用于农吉利药材的分析,加标回收率在96.0%-103%之间,测定值的相对标准偏差（n=5）小于3.0%。 展开更多

关键词 液相色谱-串联质谱法 农吉利 荭草苷 异荭草苷 牡荆苷 异牡荆苷

在线阅读 下载PDF 职称材料

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定飞燕草中7种生物碱 被引量：2

9

作者 樊轻亚 许卫军 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期426-432,共7页

建立了固相萃取技术(SPE)结合超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定飞燕草中7种生物碱的方法。采用单因素实验考察了固相萃取中各因素对飞燕草中7种生物碱萃取率的影响。最佳萃取条件为:乙醇作为提取溶剂,稀HCl调节pH值为6.0,... 建立了固相萃取技术(SPE)结合超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定飞燕草中7种生物碱的方法。采用单因素实验考察了固相萃取中各因素对飞燕草中7种生物碱萃取率的影响。最佳萃取条件为:乙醇作为提取溶剂,稀HCl调节pH值为6.0,PCX固相萃取柱净化,3%氨水甲醇溶剂洗脱。洗脱液采用ACQUITY UPLC BHEC_(18)柱(50 mm×2.1 mm×1.7μm),以乙腈-0.2%NH_(4)Ac为流动相进行UPLC-MS/MS分析,7种生物碱在1~100 mg/L范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.982,检出限为0.02~0.45 mg/L,定量限在0.08~1.23 mg/L之间。样品中3个添加浓度水平(1、5、10 mg/L)回收率为95.9%~98.1%,相对标准偏差(RSD)不大于2.5%。采用该方法对6个产地的飞燕草进行了检测,样品中7种生物碱的含量在0.08~0.94 mg/g之间。结果表明,本文所建立方法准确性好,灵敏度高,操作简单快速,可满足飞燕草中生物碱检测的要求。 展开更多

关键词 飞燕草 生物碱 固相萃取 超高效液相色谱-串联质谱法

在线阅读 下载PDF 职称材料

聚焦微波辅助提取-酸性染料分光光度法测定农吉利中总生物碱 被引量：1

10

作者 樊轻亚 游国叶 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期289-292,共4页

采用聚焦微波辅助提取(FMAE)结合溴麝香草酚蓝分光光度法测定农吉利中总生物碱。粒径为0.180 mm的样品,以甲醇为溶剂,料液比为1比25,在微波功率中火条件下提取50min。在pH 7.2的磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液中,提取得到的生物碱与溴麝... 采用聚焦微波辅助提取(FMAE)结合溴麝香草酚蓝分光光度法测定农吉利中总生物碱。粒径为0.180 mm的样品,以甲醇为溶剂,料液比为1比25,在微波功率中火条件下提取50min。在pH 7.2的磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液中,提取得到的生物碱与溴麝香草酚蓝酸性染料形成缔合物,用三氯甲烷萃取后,在最大吸收波长417nm处测量其吸光度。总生物碱的质量浓度在0.25~250mg·L-1范围内呈线性,方法的检出限(3S/N)为1.5mg·L-1。应用该方法测定农吉利药材中总生物碱,加标回收率为105%,测定值的相对标准偏差(n=6)小于3.0%。 展开更多

关键词 分光光度法 酸性染料 聚焦微波辅助提取 农吉利 生物碱

在线阅读 下载PDF 职称材料

浊点萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定还亮草中五种生物碱

11

作者 樊轻亚 王万好 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期789-794,共6页

建立了浊点萃取技术结合超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),同时测定还亮草中5种生物碱含量的分析方法。采用单因素实验考察了浊点萃取中各影响因素对还亮草中5种生物碱萃取率的影响,确定最佳萃取条件为:4%的Trion X-114,NaCl的用... 建立了浊点萃取技术结合超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),同时测定还亮草中5种生物碱含量的分析方法。采用单因素实验考察了浊点萃取中各影响因素对还亮草中5种生物碱萃取率的影响,确定最佳萃取条件为:4%的Trion X-114,NaCl的用量为0.4 g,溶液pH值为8,平衡温度55℃,平衡时间25 min。以乙腈-0.1%三乙胺为流动相进行UPLC-MS/MS分析,5种生物碱之间具有良好的分离度,且各成分在一定质量浓度范围内具有良好的线性关系。方法的精密度(RSD)、重复性及加标回收率的RSD均小于3.0%。该方法简单快捷、灵敏准确,可满足还亮草中生物碱检测的要求。 展开更多

关键词 还亮草 生物碱 浊点萃取 超高效液相色谱-串联质谱法

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于NOS通路探讨DAHP对脑外伤大鼠的神经保护作用

12

作者 倪礼礼 姚佳 +1 位作者 汪学猛 杜煜 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第12期35-42,共8页

目的探究2,4-二胺-6-羟基嘧啶(DAHP)对脑外伤大鼠的神经保护作用,初步探究其可能的作用机制。方法采用Feeney法制备脑外伤大鼠模型,将造模成功的SD大鼠随机分为模型组、DAHP组、NOS激活剂组(四氢生物蝶呤(BH4)组))、DAHP+BH4组,每组12只... 目的探究2,4-二胺-6-羟基嘧啶(DAHP)对脑外伤大鼠的神经保护作用,初步探究其可能的作用机制。方法采用Feeney法制备脑外伤大鼠模型,将造模成功的SD大鼠随机分为模型组、DAHP组、NOS激活剂组(四氢生物蝶呤(BH4)组))、DAHP+BH4组,每组12只,另选取12只大鼠仅打开骨窗不采取打击器打击作为假手术组。造模后2 h, DAHP组尾静脉注射0.5 g/kg的DAHP,BH4组尾静脉注射0.3 mg/kg的BH4,DAHP+BH4组尾静脉注射0.5 g/kg的DAHP与0.3 mg/kg的BH4,假手术组、模型组均注射等量生理盐水,注射体积均为10 mL/kg,每天给药1次,连续处理1周。末次处理后,采用定位航行、空间探索实验评估大鼠行为学;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织形态学变化;Tunel染色观察脑组织细胞凋亡;Griess法检测脑组织一氧化氮(NO)水平;免疫印迹法检测大鼠脑组织中神经型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧化酶-2(COX-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达情况。结果假手术组脑组织神经细胞形态正常,细胞核着色均匀;模型组神经细胞发生肿胀、变形、细胞核固缩,伴有炎性细胞浸润;与模型组相比,DAHP组神经细胞组织形态得到一定缓解,炎性浸润程度减轻,BH4组坏死神经细胞数量增多,损伤程度加重,DAHP+BH4组细胞形态变化不显著。与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期延长,空间探索时间比例、脑组织Bcl-2蛋白降低,脑组织细胞凋亡率、nNOS、iNOS蛋白表达、NO水平、NF-κB、TNF-α、COX-2、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组相比,DAHP组大鼠逃避潜伏期缩短,空间探索时间比例、脑组织Bcl-2蛋白升高,脑组织细胞凋亡率、nNOS、iNOS蛋白表达、NO水平、NF-κB、TNF-α、COX-2、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组相比,BH4组大鼠逃避潜伏期延长,空间探索时间比例、脑组织Bcl-2蛋白降低,脑组织细胞凋亡率、nNOS、iNOS蛋白表达、NO水平、NF-κB、TNF-α、COX-2、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。DAHP+BH4组大鼠逃避潜伏期、脑组织细胞凋亡率、nNOS、iNOS蛋白表达、NO水平、NF-κB、TNF-α、COX-2、Caspase-3蛋白表达低于BH4组,空间探索时间比例、脑组织Bcl-2蛋白表达高于BH4组(P<0.05)。结论 DAHP可缓解脑外伤大鼠神经功能损伤,减轻脑组织神经细胞凋亡,其机制可能与抑制iNOS信号通路有关。 展开更多

关键词 脑外伤 神经损伤 2 4-二胺-6-羟基嘧啶 一氧化氮合酶 一氧化氮

在线阅读 下载PDF 职称材料