浅谈动物疫控中心的防控经验

1

作者 王云霄 孙泰然 《今日畜牧兽医》 2017年第4期44-45,共2页

保定市动物疫控中心多年来一直努力履职,在重大动物疫病防控工作中积极探索,为确保不发生区域性重大动物疫情作出了贡献。为了进一步做好全省重大动物疫病防控工作,现将我市的一些工作做法介绍给同行,仅供参考。

关键词 重大动物疫情 疫病防控 保定市 区域性

在线阅读 下载PDF 职称材料

如何提升养殖场动物疫病风险分析能力 被引量：3

2

作者 王振来 钟艳玲 +2 位作者 张永辉 沈桂英 侯英慧 《中国动物保健》 2013年第1期8-10,共3页

动物及动物产品进口风险分析,是对进口动物及动物产品时某种疫病传入的概率及其危害(风险)进行评估、管理、交流的方法和过程,以有效降低疫病传入的风险。近年来,一些地方或养殖场根据当地实际情况,借鉴进口风险分析的理念,对养殖场存... 动物及动物产品进口风险分析,是对进口动物及动物产品时某种疫病传入的概率及其危害(风险)进行评估、管理、交流的方法和过程,以有效降低疫病传入的风险。近年来,一些地方或养殖场根据当地实际情况,借鉴进口风险分析的理念,对养殖场存在的重大动物疫病风险进行科学评估,并取得了显著成效,确保了畜牧业持续健康发展。 展开更多

关键词 提升 养殖场 风险分析 能力

在线阅读 下载PDF 职称材料

保定市种植结构调整成效显著 整市推行“粮改饲”示范市试点工作 被引量：1

3

作者 贾亚池 李兰芳 《北方牧业》 2018年第24期8-8,共1页

为贯彻落实中央1号文件精神,推进农业供给侧结构性改革工作,聚焦“镰刀弯”地区,实行3年5000万亩“粮改饲”总目标,河北省保定市以全株玉米种植结构调整为抓手,推进粮食作物种植向饲草料作物种植的方向转变。2017年全国“粮改饲”试点... 为贯彻落实中央1号文件精神,推进农业供给侧结构性改革工作,聚焦“镰刀弯”地区,实行3年5000万亩“粮改饲”总目标,河北省保定市以全株玉米种植结构调整为抓手,推进粮食作物种植向饲草料作物种植的方向转变。2017年全国“粮改饲”试点项目保定市是河北省唯一示范市,2018年保定市再次是河北省“粮改饲”试点项目示范市。 展开更多

关键词 种植结构调整 保定市 作物种植 试点项目 河北省 全株玉米 镰刀弯 饲草料

在线阅读 下载PDF 职称材料

浅谈保定市奶业发展

4

作者 贾亚池 商荣芳 李兰芳 《今日畜牧兽医》 2017年第4期11-12,共2页

保定市是奶业大市,奶牛存栏和鲜奶产量在河北省排第四位。2000年前,奶业发展大体处于原始自然发展阶段。2000年后,奶业发展进入快速发展通道。2008年"三聚氰胺"事件的出现,对快速发展的奶业浇了一头冷水,但对奶牛入区入场起... 保定市是奶业大市,奶牛存栏和鲜奶产量在河北省排第四位。2000年前,奶业发展大体处于原始自然发展阶段。2000年后,奶业发展进入快速发展通道。2008年"三聚氰胺"事件的出现,对快速发展的奶业浇了一头冷水,但对奶牛入区入场起到了极大的促进作用,奶牛养殖从散养小规模逐步走向集约大规模,奶业监管程度也日益加强。2014年后,国际经济形势持续低迷,我国奶业发展受国际大环境影响,整体发展速度放缓。为了在国际竞争中占有一席之地,奶牛养殖规模化、标准化程度不断增强,单产水平不断提高,乳品加工质量检测越来越严格,乳制品品种推陈出新、日益丰富。奶业生产进入了调结构、转方式、提质量的深度调整期。 展开更多

关键词 奶业 发展 良种 养殖方式

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪源大肠杆菌耐药机制及流行特征的探讨 被引量：2

5

作者 高英 卢军霞 +5 位作者 韩昱 胡晓悦 杨威 孙泰然 胡连霞 张宁 《国外畜牧学(猪与禽)》 2025年第2期48-53,共6页

大肠杆菌是一种常见的条件致病菌,广泛存在于人和动物的肠道中。本文对猪源大肠杆菌耐药特点、流行特征及耐药机制等进行了综述,以期为猪源大肠杆菌耐药控制提供参考。

关键词 大肠杆菌 耐药基因 耐药机制 猪

在线阅读 下载PDF 职称材料

浅谈犬皮肤病

6

作者 孙雨韬 孙泰然 刘永超 《中国工作犬业》 2025年第6期57-58,共2页

皮肤作为犬机体最大的器官,承担着保护机体、排泄废物、调节体温以及感知外界刺激等重要生理机能。然而,当皮肤遭受物理化学刺激、病原体感染、内分泌代谢紊乱以及免疫异常因素等不良影响时,便可能引发皮肤病,致使皮肤出现瘙痒、疼痛、... 皮肤作为犬机体最大的器官,承担着保护机体、排泄废物、调节体温以及感知外界刺激等重要生理机能。然而,当皮肤遭受物理化学刺激、病原体感染、内分泌代谢紊乱以及免疫异常因素等不良影响时,便可能引发皮肤病,致使皮肤出现瘙痒、疼痛、麻木、变色、脱毛、丘疹、水疱、结节等一系列临床症状,严重干扰皮肤正常生理机能的运转。犬皮肤病是一类极为常见的疾病,在临床诊断方面存在诸多困难,治疗周期通常较长。若未能及时采取行之有效的应对措施,病情不仅难以得到有效控制,还可能诱发继发感染,对犬的身体健康构成严重威胁。 展开更多

关键词 脱毛 继发感染 丘疹 瘙痒 水疱 皮肤病 内分泌代谢紊乱 疼痛

在线阅读 下载PDF 职称材料

转基因动物及其产品检测技术研究进展 被引量：3

7

作者 张芳 《中国动物检疫》 CAS 2020年第12期73-80,共8页

为探索可靠、灵敏的转基因动物及其产品检测技术,从核酸检测和蛋白检测两个方面,综述了转基因动物及其产品不同检测技术的原理、特点及应用,提出了每种检测技术的不足及今后转基因检测技术的发展趋势和研究方向。目前,已经研发的核酸检... 为探索可靠、灵敏的转基因动物及其产品检测技术,从核酸检测和蛋白检测两个方面,综述了转基因动物及其产品不同检测技术的原理、特点及应用,提出了每种检测技术的不足及今后转基因检测技术的发展趋势和研究方向。目前,已经研发的核酸检测技术主要包括多种PCR方法、环介导等温扩增技术、Southern blot技术和染色体原位杂交技术等,蛋白检测方法主要包括酶联免疫吸附检测技术、免疫层析试纸条、Western blot技术、免疫组织化学和免疫荧光技术等。三代测序技术是近年来提出的一种新型基因检测技术,适用于对未知序列转基因动物的分析。随着转基因技术的发展,转基因动物及其产品越来越多,高通量、高灵敏度和低成本的检测技术将成为未来转基因动物及其产品检测的研究重点。 展开更多

关键词 转基因动物 动物产品 检测技术 核酸 蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

羊链球菌病的诊断与预防探讨 被引量：3

8

作者 张芳 《农业与技术》 2017年第9期132-133,共2页

随着养羊个体户的增多,养羊规模逐年扩大,羊的密度也随之增加,导致羊链球菌发病率逐年上升,给养殖户带来巨大的经济损失。羊链球菌病作为危害山羊、绵羊的一种急性、败血性传染病。从发病时间来看,分为慢性型、亚急性型、急性型3种,伴... 随着养羊个体户的增多,养羊规模逐年扩大,羊的密度也随之增加,导致羊链球菌发病率逐年上升,给养殖户带来巨大的经济损失。羊链球菌病作为危害山羊、绵羊的一种急性、败血性传染病。从发病时间来看,分为慢性型、亚急性型、急性型3种,伴随有食欲不振、呼吸困难、眼膜充血等症状。本文从以下几方面进行介绍,旨在早预防、早诊断、早治疗。 展开更多

关键词 羊链球菌病 诊断 预防

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛奶细菌污染的原因及防控措施 被引量：1

9

作者 崔晨光 段然 +1 位作者 张秀敏 李兰芳 《今日畜牧兽医》 2021年第4期106-106,110,共2页

文章通过对挤奶过程中牛奶被细菌污染的原因进行了分析,并有针对性地提出了相关的防控措施和方法。

关键词 牛奶 细菌污染 原因 防控措施

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪瘟的流行现状与防控措施 被引量：1

10

作者 汤洪远 张芳 周宏 《农业与技术》 2016年第22期95-95,共1页

猪瘟是由病毒传播的传染性疾病,一旦爆发会使养殖户遭受严重损失,甚至会为其带来毁灭性打击。猪瘟具有传播速度快、发病率高的特点,现阶段对于猪瘟的防治取得了一定的效果,但是了解猪瘟的流行现状并采取积极有效的防控措施,仍然是降低... 猪瘟是由病毒传播的传染性疾病,一旦爆发会使养殖户遭受严重损失,甚至会为其带来毁灭性打击。猪瘟具有传播速度快、发病率高的特点,现阶段对于猪瘟的防治取得了一定的效果,但是了解猪瘟的流行现状并采取积极有效的防控措施,仍然是降低猪瘟发病率、提高养殖户经济效益的重要措施。 展开更多

关键词 猪瘟 流行现状 防控

在线阅读 下载PDF 职称材料

M5(M5-90△26)株和S2株布氏杆菌疫苗对羊诱导的抗体消长动态规律及免疫效果研究 被引量：4

11

作者 韦景平 王宏宇 +6 位作者 张洪军 孙泰然 刘博 刘亚涛 袁芳 马宏伟 韩庆安 《北方牧业》 2024年第15期13-13,共1页

近年来,布氏杆菌病(以下简称布病)疫情在全国多地出现反弹,成为危害公共卫生安全较为严重的人畜共患病。20世纪90年代我国牛羊养殖和调运数量快速增长,但免疫接种、检疫和生物安全等防控措施并没有完全跟上,导致我国人畜间布病疫情出现... 近年来,布氏杆菌病(以下简称布病)疫情在全国多地出现反弹,成为危害公共卫生安全较为严重的人畜共患病。20世纪90年代我国牛羊养殖和调运数量快速增长,但免疫接种、检疫和生物安全等防控措施并没有完全跟上,导致我国人畜间布病疫情出现反弹并呈持续回升蔓延之势。自2011年以来,布病居牛羊病发病首位。为尽快遏制布病持续反弹的势头,保障人民群众身体健康和畜牧业持续发展,2012年开始,国家发布了《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020年)》《国家布鲁氏菌病防治计划(2016-2020年)》,要求布病流行地区实行以疫苗免疫为主的综合防控措施。2021年以来,国家陆续发布了《畜间布鲁氏菌病防控五年行动方案(2021-2025年)》《全国畜间人兽共患病防治规划(2022-2030年)》,河北省也出台了《河北省畜间布鲁氏菌病防控五年行动方案(2022-2026年)》《河北省畜间人兽共患病防治规划(2023-2030年)》,对布病防控工作提出了继续坚持免疫与净化相结合、严格落实各项综合防治措施、逐步降低畜间流行率的策略措施。 展开更多

关键词 布鲁氏菌病 人兽共患病 动物疫病防治 人畜共患病 动态规律 防控工作 布病 防治规划

在线阅读 下载PDF 职称材料

非洲猪瘟病毒CD2v蛋白胞内域与胞外域的原核表达及其抗原性分析 被引量：1

12

作者 李艳蕊 任静 +6 位作者 崔锦蔷 袁晨 王云霄 马亚娟 刘志昌 李永社 宋勤叶 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1660-1670,共11页

【目的】应用大肠杆菌表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)CD2v蛋白胞外域(N-端,CD2v-N)与胞内域(C-端,CD2v-C)并分析两者的抗原性,为ASFV检测方法的研发提供试验依据和指导。【方法】构建CD2v-N和CD2v-C的重组... 【目的】应用大肠杆菌表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)CD2v蛋白胞外域(N-端,CD2v-N)与胞内域(C-端,CD2v-C)并分析两者的抗原性,为ASFV检测方法的研发提供试验依据和指导。【方法】构建CD2v-N和CD2v-C的重组原核表达质粒,在体外表达并纯化CD2v-N和CD2v-C蛋白,通过Western blotting对表达蛋白进行鉴定;用表达的CD2v-N和CD2v-C蛋白分别肌内接种免疫新西兰大白兔,共免疫3次,每次间隔2周;每次免疫后14 d,应用ELISA方法测定CD2v-N或CD2v-C的特异性抗体水平;用纯化后的CD2V-N和CD2v-C蛋白作为包被抗原,通过ELISA方法检测95份ASFV感染猪的血清CD2v-N或CD2v-C特异性抗体,比较CD2v-N和CD2v-C在猪体内诱导的免疫反应水平。【结果】重组蛋白CD2v-N和CD2v-C分别以包涵体和可溶性形式表达,分子质量分别为22.9和34.0 ku,均能与猪抗ASFV血清特异性结合;用CD2v-N蛋白首免家兔后14 d,血清中未检测到特异性抗体,而在CD2v-C首免的家兔血清中检测到了高滴度的特异性抗体;三免后14 d,CD2v-N和CD2v-C蛋白免疫家兔的血清特异性抗体效价分别为1∶125000和1∶107;ELISA检测结果显示,ASFV感染猪的血清中CD2v-C特异性抗体水平显著高于CD2v-N(P<0.05)。【结论】本研究表达了ASFV CD2v蛋白胞内域和胞外域,前者的抗原性比后者高,CD2v胞内域作为ASFV免疫学检测技术研究与开发的靶标更具优势。该研究结果对ASFV检测方法的研究与开发具有重要指导意义。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) CD2v蛋白 胞外域 胞内域 蛋白表达 抗原性

在线阅读 下载PDF 职称材料

生猪基层防疫检疫工作存在的问题与解决对策 被引量：1

13

作者 王红纲 张芳 《吉林畜牧兽医》 2024年第5期178-180,共3页

随着社会经济的不断发展,人们生活水平逐渐提高,对食品安全的关注程度也在不断加深。生猪作为居民餐桌上的重要肉类食品来源之一,其基层防疫检疫工作显得尤为重要。然而,在当前生猪基层防疫检疫工作中,仍然存在着许多问题,这对食品安全... 随着社会经济的不断发展,人们生活水平逐渐提高,对食品安全的关注程度也在不断加深。生猪作为居民餐桌上的重要肉类食品来源之一,其基层防疫检疫工作显得尤为重要。然而,在当前生猪基层防疫检疫工作中,仍然存在着许多问题,这对食品安全构成了严重威胁。本文将针对生猪基层防疫检疫工作存在的问题进行探讨,并提出相应地解决对策,以期为保障食品安全提供有力支持。 展开更多

关键词 基层 生猪检疫 存在问题 完善策略

在线阅读 下载PDF 职称材料

做强科技平台 赋能现代农业产业发展 被引量：2

14

作者 杨铮 黄勇刚 +2 位作者 刘泽 周宏 张叶 《河北农业》 2024年第4期14-15,共2页

党的十八大以来,国家高度重视科技农业的发展,把科技农业放在突出位置,多次在中央一号文件中提出强化农业科技支撑,优化农业科技创新战略布局等战略部署安排。近年来,保定市以农业科技创新引领农业高质量发展,全力打造联动雄安的都市现... 党的十八大以来,国家高度重视科技农业的发展,把科技农业放在突出位置,多次在中央一号文件中提出强化农业科技支撑,优化农业科技创新战略布局等战略部署安排。近年来,保定市以农业科技创新引领农业高质量发展,全力打造联动雄安的都市现代农业强市,进一步加强与中国农业大学、西北农林科技大学、河北农业大学等农业顶尖高等院校的深层次合作,加强在科技创新领域建设,积极打造太行山农业创新驿站、博士农场、国家农业科技园区等农业科技平台,构建产学研用深度融合创新体系,赋能现代农业产业集群发展。 展开更多

关键词 都市现代农业 中央一号文件 创新领域 科技创新战略 创新体系 河北农业大学 创新驿站 中国农业大学

在线阅读 下载PDF 职称材料

截短猪流行性腹泻病毒N蛋白的可溶性表达及其抗原活性 被引量：6

15

作者 朱卫霞 袁万哲 +3 位作者 李丽敏 宋勤叶 孙泰然 李潭清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1561-1566,共6页

应用原核表达系统表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白,并探讨其抗原活性。通过RT-PCR扩增截短的PEDV N蛋白(truncated N protein,tN蛋白)基因;构建包含tN蛋白基因的原核表达质粒(pET32a-PEDV-tN),将质粒转化E.coli BL21感受态细胞,诱导表... 应用原核表达系统表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白,并探讨其抗原活性。通过RT-PCR扩增截短的PEDV N蛋白(truncated N protein,tN蛋白)基因;构建包含tN蛋白基因的原核表达质粒(pET32a-PEDV-tN),将质粒转化E.coli BL21感受态细胞,诱导表达目的蛋白;通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组tN蛋白的表达及其免疫反应原性;用提纯的tN蛋白皮下接种BLAB/c小鼠,通过ELISA和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)检测重组tN蛋白的免疫原性。结果应用RT-PCR扩增到了预期705bp的tN蛋白基因;在E.coli BL21内,携带tN蛋白基因的重组质粒能够以可溶性表达形式诱导表达重组tN蛋白;该蛋白在体外可以与猪抗PEDV抗体特异性结合,能够诱导小鼠产生特异性抗体。本研究应用原核表达系统实现了截短猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白的可溶性表达,该蛋白具有良好的完全抗原活性。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 可溶性原核表达 抗原活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪繁殖与呼吸综合征弱毒活疫苗免疫猪脾脏转移因子的制备及其活性分析 被引量：2

16

作者 郭海勇 袁洪兴 +4 位作者 孙泰然 曹静 宋勤叶 李潭清 逯纪成 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1467-1474,共8页

从猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒活疫苗免疫猪脾制备转移因子(TF),检测其免疫活性,为开发新型免疫增强剂和有效防制PRRS提供科学依据。用PRRSV弱毒活疫苗免疫健康育成猪,无菌采集脾,通过透析法从脾提取TF。应用磺基水杨酸法、茚三酮反... 从猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒活疫苗免疫猪脾制备转移因子(TF),检测其免疫活性,为开发新型免疫增强剂和有效防制PRRS提供科学依据。用PRRSV弱毒活疫苗免疫健康育成猪,无菌采集脾,通过透析法从脾提取TF。应用磺基水杨酸法、茚三酮反应和硝酸-钼酸铵试验等方法检测TF的主要成分,经高效液相色谱法测定TF中氨基酸种类及其含量;通过鸡红细胞吞噬试验和MTT法,检测TF对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和外周血淋巴细胞增殖活性的调节作用。进而将9头4周龄健康仔猪随机分为A、B和C组,每组3头。A组每头猪左、右侧耳后分别肌内注射1头份PRRSV疫苗和1mL TF;B组每头猪注射1头份PRRSV疫苗与1mL TF的混合液;C组每头猪注射1头份PRRSV疫苗与1mL生理盐水混合液。免疫后20d,通过MTT法检测每组猪外周血淋巴细胞(PBLC)的增殖活性。制备的TF内无蛋白质成分,含有核酸和18种氨基酸,每毫升TF含核酸21.5μg、总氨基酸3.479mg。TF能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬能力和PBLC增殖活性。当TF与PRRSV疫苗分开或混合注射给4周龄仔猪后,能够显著提高仔猪PBLC的增殖能力。从PRRS弱毒活疫苗免疫猪的脾制备了TF,其能显著提高巨噬细胞的吞噬功能和外周血淋巴细胞的增殖活性。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪 脾 转移因子 免疫活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组猪β-防御素1对大肠杆菌的抑制作用 被引量：2

17

作者 郭海勇 袁洪兴 +2 位作者 王云霄 徐瑞涛 宋勤叶 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1342-1348,共7页

旨在评价重组猪β-防御素1(porcineβ-defensin 1,pBD1)对大肠杆菌(E.coli)的体外抑制活性及其对大肠杆菌病鸡的治疗效果。应用琼脂板打孔扩散法和微量抑菌试验,分别测定重组pBD1对3株E.coli(O141、SJZ1和SJZ2株)的体外抑制效果,继而将4... 旨在评价重组猪β-防御素1(porcineβ-defensin 1,pBD1)对大肠杆菌(E.coli)的体外抑制活性及其对大肠杆菌病鸡的治疗效果。应用琼脂板打孔扩散法和微量抑菌试验,分别测定重组pBD1对3株E.coli(O141、SJZ1和SJZ2株)的体外抑制效果,继而将40只11d的雏鸡随机分为5组(n=8),即A(防御素)组、B(抗生素)组、C(防御素与抗生素联合治疗)组、D(感染非治疗)组和E(空白对照)组。A、B、C和D组:同时经颈部皮下和口服途径分别给每只鸡接种1mL E.coli O141株(1.25×109 cfu·mL^(-1));E组:以同样途径分别给每只鸡接种1mL肉汤。当感染鸡表现临床症状时,A、B、C和D组分别口服pBD1[50μg·(只·次)^(-1)]、头孢曲松钠(50mg·kg^(-1),按体重给药,下同)、pBD1和头孢曲松钠[分别为50μg·(只·次)-1和50mg·kg^(-1)]及等体积的无菌生理盐水,每天1次,连续治疗7d。结果表明,重组pBD1在体外对3株E.coli均具有明显的抑制活性,抑菌效果随浓度增加而增强。与非治疗组相比,三个治疗组的临床症状和病理变化明显减轻,发病率、死亡率降低,感染后期防御素治疗组、防御素与抗生素联合治疗组的体重极显著高于感染非治疗组(P<0.01)。以上结果显示,重组pBD1对E.coli生长具有明显抑制作用,对大肠杆菌病鸡具有良好的治疗效果;重组pBD1的治疗效果优于头孢曲松钠,有助于病鸡恢复;当pBD1与头孢曲松钠联合使用时,疗效更佳。该研究结果可以为大肠杆菌病的有效治疗提供科学依据,为新型抗菌制剂pBD1的研究与开发奠定重要基础。 展开更多

关键词 重组猪β-防御素1 大肠杆菌 雏鸡 抑制作用 治疗

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于非洲猪瘟病毒截短p72蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量：4

18

作者 张文燕 王亚文 +5 位作者 袁晨 冯亚文 滕召剑 商佳亮 逯纪成 宋勤叶 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第7期2688-2697,共10页

【目的】建立非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)ELISA抗体检测方法。【方法】以重组截短p72(p72s)蛋白作为检测抗原,通过方阵滴定法,确立ELISA的抗原、待检血清和酶标抗体的最佳工作浓度,优化抗原包被、酶标板封闭、血清/... 【目的】建立非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)ELISA抗体检测方法。【方法】以重组截短p72(p72s)蛋白作为检测抗原,通过方阵滴定法,确立ELISA的抗原、待检血清和酶标抗体的最佳工作浓度,优化抗原包被、酶标板封闭、血清/酶标抗体反应及底物显色等工作条件;应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线阈值评价标准,确定方法的阴阳性临界值;检测方法的特异性、敏感性、批内与批间重复性;最后分别用建立的ELISA方法和商品试剂盒检测124份血清,比较两者的阳性检出率,并通过Western blotting验证ELISA的检测结果。【结果】ELISA方法的抗原最佳包被浓度为0.5μg/mL,待检血清与酶标抗体的最适稀释度分别为1∶100和1∶5000;反应条件为:抗原于37℃孵育1 h后经4℃包被酶标板过夜、于37℃封闭1 h或室温封闭2 h、待检血清和酶标抗体分别于37℃反应60和45 min及加入底物后于室温避光显色20 min;阴阳性血清的判定标准为:当待检血清的D_(450 nm)值≥0.365时,判定为阳性;当D_(450 nm)值<0.365时,判定为阴性。该方法只与ASFV阳性血清发生特异性结合,与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等病毒抗血清均无交叉反应;能检测到ASFV抗血清中的总蛋白量为0.091~0.153 mg/mL,低于商品试剂盒的最低检测量(0.110~0.554 mg/mL);批内和批间重复性试验的平均变异系数分别为4.70%与5.125%。对临床血清样本检测时,建立方法和商品试剂盒的阳性检出率分别为75.81%(94/124)和32.26%(40/124)。进一步验证表明,Western blotting与ELISA的检测结果完全一致。【结论】建立了基于ASFV-p72s蛋白的ELISA抗体检测方法,该方法特异、敏感和重复性稳定,能够用于ASF临床诊断与流行病学调查,具有极大的开发应用潜力。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) 截短p72蛋白 原核表达 间接ELISA

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪圆环病毒2型Cap蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立与应用

19

作者 魏艳秋 李丽敏 +4 位作者 孙泰然 宋勤叶 逯继成 李潭清 张义明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第9期3-6,共4页

为了建立检测PCV-2抗体的间接ELISA方法,本研究以猪圆环病毒2型（PCV-2）重组Cap蛋白作为包被抗原,优化了反应条件及抗原、抗体工作浓度。结果显示,抗原最佳包被浓度为1μg/m L,待检血清的最佳稀释度为1∶80;最佳封闭液和抗体稀释液为... 为了建立检测PCV-2抗体的间接ELISA方法,本研究以猪圆环病毒2型（PCV-2）重组Cap蛋白作为包被抗原,优化了反应条件及抗原、抗体工作浓度。结果显示,抗原最佳包被浓度为1μg/m L,待检血清的最佳稀释度为1∶80;最佳封闭液和抗体稀释液为含1%明胶、0.05%Tween-20的0.01 mol/L p H值7.4 PBS;当被检血清的OD450nm值≥0.3时为阳性,当OD值〈0.3时为阴性。该方法与猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬病、猪流行性腹泻等病毒抗体无交叉反应,与免疫过氧化物酶单层试验的符合率为98.3%,批内与批间重复性试验的变异系数分别低于5%与8%。应用建立的方法检测了126份2013年采集的猪血清,PCV-2抗体阳性率为40%~100%,表明河北省的猪群中PCV-2感染率很高。 展开更多

关键词 PCV-2 重组CAP蛋白 间接ELISA 抗体 应用

在线阅读 下载PDF 职称材料

一种简易检测牛奶中青霉素残留的方法 被引量：1

20

作者 孙泰然 《湖北畜牧兽医》 2012年第6期11-12,共2页

采用微生物法建立了一种简易检测牛奶中青霉素残留的方法。结果显示该法对样品中青霉素残留的检测限为0.8IU/mL。该法可以检测出牛奶中的青霉素残留,对基层奶牛养殖场检测青霉素残留具有重要的意义。

关键词 青霉素 药物残留 检测 牛奶

在线阅读 下载PDF 职称材料