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EV71通过Caspase-1/IL-1β信号通路诱导BALB/c乳鼠骨骼肌损伤
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作者 牛弘璘 杨木 +6 位作者 曹琳 邹欣宏 陈雨菲 石国欣 刘蕾 王柏欣 崔国利 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第5期12-23,共12页
目的观察EV71型肠道病毒(Enterovirus 71,EV71)诱导骨骼肌损伤的影响,探讨caspase-1/IL-1β信号通路在EV71诱导的骨骼肌损伤中的作用机制。方法将1日龄BALB/c乳鼠随机分为3组,正常对照(normal control,NC)组60只、EV71感染组60只、caspa... 目的观察EV71型肠道病毒(Enterovirus 71,EV71)诱导骨骼肌损伤的影响,探讨caspase-1/IL-1β信号通路在EV71诱导的骨骼肌损伤中的作用机制。方法将1日龄BALB/c乳鼠随机分为3组,正常对照(normal control,NC)组60只、EV71感染组60只、caspase-1抑制剂(EV71+VX-765)组15只。正常对照组及EV71感染组各随机分为5 d、7 d、10 d、14 d 4个亚组,每亚组15只。将25 mL/kg的EV71病毒液,腹腔注射到1日龄BALB/c乳鼠体内,连续注射3 d,建立EV71感染组模型。在病毒接种后6 h腹腔注射caspase-1抑制剂VX-765(20 mg/kg),连续10 d接种,直至取材,建立caspase-1抑制剂组模型。同时,正常对照组等体积注射含有5%DMSO+10%PEG300的生理盐水,6 h后注射2%的细胞维持液。造模成功后,记录各组BALB/c乳鼠体质量和疾病评分,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察骨骼肌病理损伤,蛋白免疫印迹(Western blot)和免疫荧光(immunofluorescence,IF)检测肠道病毒71型病毒蛋白1(Enterovirus 71 viral protein 1,EV71 VP-1)、前体胱天蛋白酶-1(pro-cysteine-dependent aspartate-specific protease-1,pro-caspase-1)、切割型胱天蛋白酶-1(cleaved cysteine-dependent aspartate-specific protease-1,cleaved-caspase-1)、白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原蛋白(Collagen type I,Collagen I)蛋白的表达。结果与同时间点正常对照组相比,EV71感染组乳鼠体质量减轻,疾病评分升高;EV71感染组乳鼠骨骼肌组织HE染色可见炎性细胞大量浸润、肌束断裂溶解,肌肉组织横截面积减少;Western blot结果显示,与正常对照组相比,EV71感染组乳鼠5 d、7 d、10 d骨骼肌组织匀浆中EV71 VP-1、IL-1β、α-SMA和Collagen I水平均明显升高(P<0.001);与EV71感染组相比,EV71+VX-765组乳鼠体质量升高及临床疾病评分降低(P<0.01),Western blot与免疫荧光结果一致显示,caspase-1抑制剂可以显著降低EV71感染组乳鼠骨骼肌组织匀浆中EV71 VP-1蛋白表达(P<0.01),下调pro-caspase-1、cleaved-caspase-1、IL-1β和Collagen I蛋白水平(P<0.001),抑制caspase-1减弱了EV71病毒对BALB/c乳鼠骨骼肌损伤作用。结论EV71可能通过激活caspase-1/IL-1信号通路诱导骨骼肌损伤。 展开更多
关键词 EV71 BALB/c乳鼠 炎症 CASPASE-1 纤维化
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