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白菜型油菜BraSDG8基因的克隆与序列分析 被引量:6
1
作者 谢青轩 彭琦 +1 位作者 刘春林 阮颖 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期372-375,共4页
通过序列的同源性分析,在白菜型油菜中克隆得到拟南芥中的1个花期调控基因SDG8的全长cDNA,命名为BraSDG8。BraSDG8全长4 963 bp,编码1 654个氨基酸,其中第867位至第1 060位氨基酸连续构成AWS domain、SET domain、Post SET domain 3个... 通过序列的同源性分析,在白菜型油菜中克隆得到拟南芥中的1个花期调控基因SDG8的全长cDNA,命名为BraSDG8。BraSDG8全长4 963 bp,编码1 654个氨基酸,其中第867位至第1 060位氨基酸连续构成AWS domain、SET domain、Post SET domain 3个结构域,与拟南芥中的SDG8包含的功能活性位点相同,生物信息学分析表明,BraSDG8与SDG8同属于ASH1家族。 展开更多
关键词 白菜型油菜 BraSDG8基因 组蛋白甲基转移酶 序列分析
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酵母双杂交诱饵载体pGBKT7_MYC2构建及表达鉴定 被引量:1
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作者 刘武 肖牧 +1 位作者 阮颖 刘春林 《作物研究》 2012年第2期143-147,共5页
MYC2是一类含有helix-loop-helix(bHLH)结构域的转录因子。为进一步研究MYC2因子在植物防御抗性中的作用及其参与植物JA,SA等信号途径的作用机制,克隆了拟南芥的MYC2基因,以此构建了pG-BKT7_MYC2酵母双杂交载体,通过Western blotting验... MYC2是一类含有helix-loop-helix(bHLH)结构域的转录因子。为进一步研究MYC2因子在植物防御抗性中的作用及其参与植物JA,SA等信号途径的作用机制,克隆了拟南芥的MYC2基因,以此构建了pG-BKT7_MYC2酵母双杂交载体,通过Western blotting验证表明,该载体能在酵母细胞里正常表达。 展开更多
关键词 MYC2基因 pGBKT7_MYC2 诱饵载体 蛋白表达
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甘蓝型油菜种子不同发育时期SSH文库的构建 被引量:16
3
作者 彭琦 胡燕 +3 位作者 杜培粉 谢青轩 阮颖 刘春林 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1576-1583,共8页
利用抑制差减杂交技术构建了20d和35d甘蓝型油菜湘油15发育种子特异表达基因的SSH文库。随机挑取单菌落进行PCR表明,文库质量较好。在20d和35 d SSH文库中随机挑选489个阳性克隆进行测序,获得452条高质量的表达序列标签(EST)。对序列进... 利用抑制差减杂交技术构建了20d和35d甘蓝型油菜湘油15发育种子特异表达基因的SSH文库。随机挑取单菌落进行PCR表明,文库质量较好。在20d和35 d SSH文库中随机挑选489个阳性克隆进行测序,获得452条高质量的表达序列标签(EST)。对序列进行Blast比对及功能注释,比较20d和35 d SSH文库的基因表达谱,发现在20 d SSH库中参与糖代谢的基因出现频率较高,而在35 d SSH库中与脂肪酸储存有关的油体蛋白家族、与脂肪酸转运有关的柠檬酸合酶、与脂肪酸合成有关的酰基载体蛋白去饱和酶等,参与油脂代谢相关基因出现频率较高。该结果对进一步研究油菜脂肪酸代谢调控的分子机制打下了基础。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 种子发育 脂肪酸 抑制差减杂交:cDNA文库
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拟南芥组蛋白甲基化SDG26基因突变体抗旱生理生化研究 被引量:1
4
作者 马惠 刘博宇 +1 位作者 阮颖 刘春林 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期377-380,共4页
对拟南芥SDG26基因功能缺失突变体sdg26植株和对照野生型Col植株在干旱条件下的SOD活性和MDA、可溶性糖、脯氨酸含量进行测定。结果显示:随着干旱时间(5、8、11、14、17、20 d)持续,sdg26植株中的SOD活性和MDA、可溶性糖、脯氨酸含量都... 对拟南芥SDG26基因功能缺失突变体sdg26植株和对照野生型Col植株在干旱条件下的SOD活性和MDA、可溶性糖、脯氨酸含量进行测定。结果显示:随着干旱时间(5、8、11、14、17、20 d)持续,sdg26植株中的SOD活性和MDA、可溶性糖、脯氨酸含量都表现出明显提高的趋势,上升水平显著高于对照野生型Col植株;在持续干旱20 d条件下,Col植株的叶片逐渐失水干枯及至死亡,但sdg26植株能正常生长,表现出良好的生长势,推测SDG26基因功能的丧失可以增强拟南芥的抗旱能力,说明植物的抗旱能力与组蛋白的甲基化修饰密切相关。 展开更多
关键词 拟南芥 sdg26 干旱胁迫 生理生化指标
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酵母双杂交表达载体pGBKT7_NPR1与pGADT7_NPR1的构建及酵母菌的转化
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作者 肖牧 徐健 +2 位作者 何乐 刘春林 阮颖 《作物研究》 2013年第3期213-216,共4页
NPR1是水杨酸介导的系统获得性抗性(SAR)途径中不可或缺的一个转录辅助因子。在SA诱导下,NPR1被转运至细胞核内并与一些转录因子结合,以启动下游基因的表达。本研究通过PCR扩增获得拟南芥中NPR1基因CDS序列,经过限制性内切酶酶切后在T4... NPR1是水杨酸介导的系统获得性抗性(SAR)途径中不可或缺的一个转录辅助因子。在SA诱导下,NPR1被转运至细胞核内并与一些转录因子结合,以启动下游基因的表达。本研究通过PCR扩增获得拟南芥中NPR1基因CDS序列,经过限制性内切酶酶切后在T4连接酶作用下分别克隆至pGBKT7与pGADT7酵母表达载体上,并成功将其转化至Gold酵母菌株中。为利用酵母双杂交筛选NPR1参与形成的转录复合体中其它可能存在的蛋白质并阐明其在植物防御信号传导途径中的互作模式奠定了基础。 展开更多
关键词 NPR1 基因克隆 酵母双杂交载体 酵母转化
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