鹅源考诺尼亚菌的分离鉴定及其生物学特性检测

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作者 李仕楷 刘佳琪 +6 位作者 苏文楠 钟嘉诚 陈亦杏 张溢珊 朱婉君 张济培 陈济铛 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期43-51,共9页

考诺尼亚菌是水禽呼吸道感染的重要病原菌之一,其临床症状与鸭疫里默氏杆菌感染引起的渗出性败血症相似。但国内对该菌研究报道较少,对其培养特性、耐药性和致病特性等相关特性了解不深。本研究通过病理剖检、16S rRNA测定和遗传进化分... 考诺尼亚菌是水禽呼吸道感染的重要病原菌之一,其临床症状与鸭疫里默氏杆菌感染引起的渗出性败血症相似。但国内对该菌研究报道较少,对其培养特性、耐药性和致病特性等相关特性了解不深。本研究通过病理剖检、16S rRNA测定和遗传进化分析,从广东某鹅场鹅眶下窦肿胀病例中分离鉴定得1株鹅源考诺尼亚菌,通过菌株生长曲线测定、生化试验、药物敏感性试验了解分离菌生长培养特性及耐药情况,以鹅胚感染试验初步判断该菌株致病性。结果显示:该菌株在TSA培养基上培养48 h后可观察到微黄、露滴样、圆形、边缘整齐、表面光滑小菌落;基因序列分析表明,该分离株的16S rRNA与考诺尼亚属的代表株同源性为98.7%,属同一分支;生长曲线测定结果表明,分离株在TSB肉汤培养基生长速度较其他常见菌慢;生化试验结果显示,分离株不发酵糖、醇,尿素、硫化氢反应阴性,氧化酶、过氧化氢酶反应为阳性;药敏试验结果表明,该菌对多种抗生素敏感,仅对氨苄西林、卡那霉素、利福平耐药;鹅胚致病对照试验结果显示,感染后1~5 d鹅胚出现死亡,死亡胚体充血,从死亡鹅胚卵黄液中可重新分离得菌株,表明该分离株可感染致死鹅胚。本研究首次在国内成功分离并鉴定出鹅源考诺尼亚菌,其研究成果可为完善鹅群考诺尼亚菌的防控策略与诊疗措施提供重要的参考依据。 展开更多

关键词 鹅考诺尼亚菌 分离鉴定 致病性 耐药性

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鹅星状病毒Ⅰ型与Ⅱ型双重荧光定量PCR检测方法的建立与应用

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作者 姚展杏 王超 +6 位作者 林寅盛 赵丹 张嘉家 伍辉吉 朱婉君 张济培 陈济铛 《中国家禽》 北大核心 2025年第1期64-70,共7页

为建立一种快速检测鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)Ⅰ型(GAstV-1)与Ⅱ型(GAstV-2)的SYBR GreenⅠ双重实时荧光定量PCR检测方法,试验根据GAstV-1的ORF1a特异保守序列与GAstV-2的ORF2特异保守序列分别设计1对引物,将PCR扩增的两个片... 为建立一种快速检测鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)Ⅰ型(GAstV-1)与Ⅱ型(GAstV-2)的SYBR GreenⅠ双重实时荧光定量PCR检测方法,试验根据GAstV-1的ORF1a特异保守序列与GAstV-2的ORF2特异保守序列分别设计1对引物,将PCR扩增的两个片段分别克隆至pMD18-T载体,构建重组质粒作为阳性质粒标准品,建立检测并鉴别GAstV-1与GAstV-2的SYBR GreenⅠ双重实时荧光定量PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏性、重复性进行评估,并运用该方法对28份疑似痛风雏鹅临床样品进行检测。结果显示:建立的SYBR GreenⅠ双重实时荧光定量PCR方法检测GAstV-1、GAstV-2的标准曲线相关系数均在0.99以上,批间、批内重复变异系数均小于0.7%,最低检测限度均为10 copies/μL;该方法对鸭肝炎病毒、禽流感病毒、鹅细小病毒均无特异性扩增,同时检测GAstV-1与GAstV-2未出现交叉反应;该方法检测28份临床样品的GAstV阳性率为92.8%,其中GAstV-1和GAstV-2均为阳性的有6份,仅GAstV-2阳性的有18份,仅GAstV-1阳性的有2份。研究表明,建立的荧光定量PCR检测方法可用于GAstV-1与GAstV-2的鉴别检测,并且当前引发GAstV感染的主要病原依然是GAstV-2,GAstV-1和GAstV-2混合感染情况也同时存在。 展开更多

关键词 鹅星状病毒 GAstV-1 GAstV-2 双重荧光定量PCR 雏鹅 痛风

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鹅源A型产气荚膜梭菌对鹅的致病性试验

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作者 张美琳 杨智灿 +5 位作者 刘佳琪 苏文楠 李宛珈 朱婉君 陈济铛 张济培 《中国家禽》 北大核心 2025年第4期55-61,共7页

为了解鹅源A型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,Cp)对鹅的致病性,研究通过鸡胚致病性试验、不同感染途径攻毒试验筛选毒力较强的菌株及适合感染途径,对35日龄雏鹅进行人工致病试验,通过评估临床症状、体重变化、肠道表征评分、组... 为了解鹅源A型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,Cp)对鹅的致病性,研究通过鸡胚致病性试验、不同感染途径攻毒试验筛选毒力较强的菌株及适合感染途径,对35日龄雏鹅进行人工致病试验,通过评估临床症状、体重变化、肠道表征评分、组织病理学变化、肠道绒毛高度及隐窝深度等研究其对鹅的致病性。结果显示:Cp-07株对鸡胚的致病性较强,鸡胚半数致死量(ELD_(50))为10^(-8.75)/0.2 mL;灌服Cp-07株可对雏鹅致死,肠道能分离到Cp,而皮下注射和静脉注射仅在第6天肠道分离到Cp;感染组雏鹅表现出精神沉郁、拉血便等症状,从第3天开始感染组体重低于对照组,肠道出现明显的肠壁变薄、出血,肠黏膜脱落并出现坏死灶,肠道表征评分高达4分;感染组肠绒毛脱落、断裂,大量红细胞、炎性细胞浸润,十二指肠及回肠固有形态消失,小肠绒毛高度不同程度下降,隐窝深度增加。研究表明,试验筛选出1株高毒力Cp,适合接种途径为灌服,单独感染Cp可引起鹅肠道损伤。 展开更多

关键词 产气荚膜梭菌 坏死性肠炎 鹅源 肠道 致病性

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2013—2023年广东地区水禽源沙门菌血清分型及耐药性分析

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作者 李宛珈 林寅盛 +4 位作者 刘敏芳 薛文昌 朱婉君 陈济铛 张济培 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期297-303,共7页

目的 了解广东地区近十年水禽源沙门菌的流行情况及耐药现状,指导广东地区水禽源沙门病防控。方法 采用药敏纸片法对2013—2023年从广东水禽主要养殖区238个水禽养殖场分离到的314株水禽源沙门菌进行血清学鉴定和药物敏感性试验。结果 ... 目的 了解广东地区近十年水禽源沙门菌的流行情况及耐药现状,指导广东地区水禽源沙门病防控。方法 采用药敏纸片法对2013—2023年从广东水禽主要养殖区238个水禽养殖场分离到的314株水禽源沙门菌进行血清学鉴定和药物敏感性试验。结果 314株沙门菌分属B、D、C1、E1群9种血清型,其中优势血清型为鼠伤寒沙门菌;实验菌株对β内酰胺类的青霉素、阿莫西林、头孢拉定、头孢唑林,磺胺类磺胺二甲嘧啶和四环素类的四环素耐药率最高,耐药率为73.57%~89.49%;对氨基糖苷类的阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素及喹诺酮类的诺氟沙星最为敏感,敏感率均超50%,其中280株沙门菌对6类抗菌药物表现多重耐药,5重耐药以上高达60.83%,相关性分析结果显示氟苯尼考跟庆大霉素、阿莫西林跟青霉素的相关性最高(r均为0.650),其次是庆大霉素跟卡那霉素(r=0.620)。结论 广东地区水禽源沙门菌耐药普遍严重,应加强对水禽病原检测,合理使用抗生素以防耐药菌传播。 展开更多

关键词 沙门菌 血清分型 耐药表型 水禽 多重耐药

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一株鹅源细小病毒的分离鉴定与遗传进化分析

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作者 彭珊 王超 +2 位作者 朱婉君 张济培 陈济铛 《广东畜牧兽医科技》 2025年第4期94-104,共11页

小鹅瘟是由鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)引发的传染病,20日龄内雏鹅具有高致死性,而青年鹅常表现为隐性感染,易被忽视。2024年11月,广东揭阳某地养鹅场青年鹅群(56日龄)急性发病,为明确病因,针对送检的病死鹅进行剖检并无菌采集肝... 小鹅瘟是由鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)引发的传染病,20日龄内雏鹅具有高致死性,而青年鹅常表现为隐性感染,易被忽视。2024年11月,广东揭阳某地养鹅场青年鹅群(56日龄)急性发病,为明确病因,针对送检的病死鹅进行剖检并无菌采集肝、脾和肠组织样本,通过PCR/RT-PCR方法对常见鹅病毒性传染病病原核酸进行检测。将GPV阳性组织样本研磨处理后接种至鹅胚,随后对PCR阳性尿囊液样本进行全基因组克隆测序,并基于获得的序列数据开展系统发育与分子进化分析。结果显示,送检组织样品中鹅细小病毒核酸呈阳性,鹅圆环病毒(Goose circovirus,GoCV)、鹅星状病毒(Goose astrovirus,GoAstV)、新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)和坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)核酸均为阴性。阳性病料组织悬液接种鹅胚后,鹅胚死亡且胚体严重出血,鹅胚尿囊液PCR检测为GPV阳性。测序结果显示,毒株基因组全长为5028 bp,由ITR区域和NS、VP基因构成,将该毒株命名为GPV/GD/3121/2024株。相似性分析显示,该分离株与DY16株的NS1和VP1基因相似性最高,分别达到99.4%和95.9%。GPV/GD/3121/2024株与国内近年GPV分离株(DY16株、RC16株和HB-2019株)全基因序列相似性高达97.5%。基于全基因组序列、非结构蛋白NS1和结构蛋白VP1序列的遗传演化分析均显示,分离株与欧洲疫苗株(VG32/1)、中国大陆疫苗株(GDaGPV、SYG61v)和台湾疫苗株(82-0321V)均同属一个大分支,遗传关系较近。此外,与经典GPV毒株相比,GPV/GD/3121/2024株VP1基因含有3个特有的碱基突变位点,分别为A2496T、G2515C、A2772G,这些突变导致VP1结构蛋白发生V38L、S178T和Y491H氨基酸位点改变。该研究确定了该场青年鹅发病致死系感染GPV所致,并对毒株进行分离鉴定和遗传进化分析,同时简要比较了国内GPV的分子特征,为该病毒的生物学特性研究和科学防控提供了参考信息。 展开更多

关键词 鹅细小病毒 全基因 遗传进化分析 氨基酸序列比对

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鹅源鼠伤寒沙门菌crp、hfq基因缺失株的构建及生物学特性分析 被引量：5

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作者 李仕楷 刘佳琪 +6 位作者 李荣旭 苏文楠 陈亦杏 郑炜鸿 朱婉君 陈济铛 张济培 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期17-24,共8页

为构建鹅鼠伤寒沙门菌单基因缺失株并鉴定其生物学特性,本研究以广东地区鹅源鼠伤寒沙门菌流行株A29为研究对象,采用λ-Red同源重组技术,分别构建crp、hfq基因缺失株(A29Δcrp和A29Δhfq)及相应基因回补株,并分别采用相应引物经PCR鉴定... 为构建鹅鼠伤寒沙门菌单基因缺失株并鉴定其生物学特性,本研究以广东地区鹅源鼠伤寒沙门菌流行株A29为研究对象,采用λ-Red同源重组技术,分别构建crp、hfq基因缺失株(A29Δcrp和A29Δhfq)及相应基因回补株,并分别采用相应引物经PCR鉴定。通过细菌培养,对各菌株生物学特性进行比较;通过PCR鉴定各菌株的遗传稳定性;采用K-B纸片扩散法检测各菌株的药物敏感性;将各菌株纯培养物经腹腔注射4周龄小鼠,测定各菌株对小鼠的毒力,并观察感染后小鼠的临床症状及各组织剖检病变与组织病理变化。PCR和测序结果表明,正确构建各基因缺失株和相应回补株。生物学特性试验结果显示,与亲本株相比,A29Δcrp菌落直径极显著变小(P<0.001),不产酸、不产生H_(2)S,菌体极显著变短(P<0.001);A29Δhfq菌落边缘不整齐,不产生H_(2)S,菌体极显著变长(P<0.001),表明crp、hfq基因影响细菌的菌落形态、生化特性和形态特征。菌株遗传稳定试验结果显示,菌株传至60代时,基因缺失株仍能够稳定缺失。药敏试验结果显示,与亲本株比较,A29Δcrp对氨基糖苷类、碳青霉烯类、环丙沙星、甲氧苄啶、阿奇霉素等药物的敏感性降低,对四环素类药物的敏感性增强,A29Δhfq对除青霉素类、头孢唑啉以外的12种药物的敏感性增强。小鼠毒力试验结果显示,与亲本株的LD_(50)(2.479×10^(4)cfu)相比,A29Δcrp的LD_(50)(5.379×10^(5) cfu)和A29Δhfq的LD_(50)(5.012×106 cfu)均明显上升。各菌株感染小鼠后的临床症状及各组织剖检病变基本一致;组织病理变化观察显示,与亲本株相比,A29Δcrp组小鼠肝组织可见多量大小不一的坏死灶,脾组织红髓面积增大、白髓面积减小,A29Δhfq对小鼠脾脏、肝脏及脑组织损伤均较小。本研究为探究鼠伤寒沙门菌crp和hfq基因功能奠定了基础,同时也为进一步研发鹅沙门菌病疫苗提供了参考依据。 展开更多

关键词 鹅源鼠伤寒沙门菌 基因敲除 crp基因 hfq基因 生物学特性

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不同禽源副鸡禽杆菌的人工交叉致病试验

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作者 卢玉葵 刘佳琪 +5 位作者 苏文楠 钟嘉诚 陈济铛 朱婉君 张溢珊 张济培 《中国家禽》 北大核心 2024年第1期77-83,共7页

为探讨鸡源和鹅源副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)对鸡、鹅的跨禽种感染致病力情况,试验将3株鹅源Apg和4株鸡源Apg培养物经鼻窦腔接种60日龄鸡和鹅,观察接种禽的临床症状并进行表征评分。通过组织病理学检查、细菌分离培养... 为探讨鸡源和鹅源副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)对鸡、鹅的跨禽种感染致病力情况,试验将3株鹅源Apg和4株鸡源Apg培养物经鼻窦腔接种60日龄鸡和鹅,观察接种禽的临床症状并进行表征评分。通过组织病理学检查、细菌分离培养和Apg种特异性PCR鉴定,研究鸡源和鹅源Apg对不同宿主的致病性情况。结果显示:鸡源和鹅源Apg均可导致鸡、鹅出现典型症状与病变,且对原宿主禽种致病性高于非原宿主禽种;发病鸡、鹅的病理变化相似,以面部皮下和鼻窦黏膜水肿、充血出血、纤维素性渗出,鼻甲骨变形为特征;发病鹅和鸡组织病理变化相似,鼻窦黏膜与鼻甲黏膜出现大量炎性细胞浸润,黏膜上皮水肿、坏死、崩解脱落,固有层结构疏松,局部可见纤维结缔组织增生;3株鸡源Apg接种鸡试验组能从鼻窦部、肝脏和脾脏中重新分离到接种菌,而接种鹅试验组仅从鼻窦部分离接种菌,未能从其他组织中分离到。研究表明,鸡源和鹅源Apg均可感染鸡或鹅并引起发病,但在致病程度上以本禽源菌株强于非本禽源菌株。 展开更多

关键词 副鸡禽杆菌 鹅 鸡 交叉致病性 黏膜

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广东鹅源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定、耐药表型和耐药基因的检测及相关性分析 被引量：2

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作者 苏文楠 杨智灿 +5 位作者 张美琳 钟嘉诚 陈亦杏 陈济铛 张溢珊 张济培 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期121-127,共7页

为了解广东地区鹅源多杀性巴氏杆菌(Pm)的流行情况、药物敏感性、耐药基因的携带情况以及耐药表型与耐药基因的相关性,本实验对2019年~2022年从广东地区采集的193份疑似感染Pm病鹅的心脏血液和肝脏组织划线接种于不同的培养基分离细菌,... 为了解广东地区鹅源多杀性巴氏杆菌(Pm)的流行情况、药物敏感性、耐药基因的携带情况以及耐药表型与耐药基因的相关性,本实验对2019年~2022年从广东地区采集的193份疑似感染Pm病鹅的心脏血液和肝脏组织划线接种于不同的培养基分离细菌,对分离菌纯化后采用PCR扩增分离菌的KMT1基因并测序,采用多重PCR扩增分离菌的5个荚膜基因及8个脂多糖基因,分析分离菌的荚膜分型与脂多糖(LPS)分型。结果显示分离到83株鹅源Pm,其中82株为荚膜A型,1株无法通过荚膜定型;LPS分型为L1型。采用K-B纸片扩散法检测分离菌的药物敏感性;通过PCR检测分离菌7类药物的15种耐药基因,包括β-内酰胺类(bla_(CTX-M)、bla_(TEM)、bla_(OXA))、氨基糖苷类(aadA1、aph(3’)Ila)、喹诺酮类(qnrA、qnrB、qnrS)、酰胺醇类(floR)、四环素类(tetM、tetX)、大环内酯类(ermF、ereD)、磺胺类(sul1、sul3)耐药基因。采用统计学软件SPSS22中的完全随机设计两样本率的卡方检验分析分离菌的耐药表型和相应耐药基因的相关性。药敏试验结果显示,83株鹅源Pm对多种药物敏感性较高,其中对喹诺酮类的环丙沙星和氧氟沙星、氨基糖苷类的丁胺卡那和大观霉素、β-内酰胺类的头孢曲松、磺胺类的复方新诺明、大环内酯类的阿奇霉素敏感的菌株占比均在63%以上;对氨基糖苷类的链霉素和卡那霉素耐药的菌株占比高于50%,对氨基糖苷类的新霉素和四环素类的四环素耐药的菌株分别占49.40%(41/83)和46.99%(39/83)。耐药基因的检测结果显示,分离菌检出耐药基因qnrB、sul3、blaTEM、aadA1、aph(3’)Ila、ereD、ermF、tetM、floR,检出率分别为9.63%(8/94)、27.71%(23/83)、28.92%(24/83)、48.19%(40/83)、14.46%(12/83)、49.40%(41/83)、3.61%(3/83)、1.20%(1/83)、32.53%(27/83),未检出耐药基因qnrA、qnrS、sul1、tetX、bla_(CTX-M)、bla_(OXA)。相关性分析结果显示,aadA1基因与Pm对新霉素、链霉素、卡那霉素、大观霉素的耐药性具有极显著的相关性(P<0.001);bla_(CTX-M)基因、floR基因分别与Pm对头孢拉定、氟苯尼考的耐药性具有显著相关性(P<0.05)。上述结果表明,广东地区鹅源Pm主要为A∶L1基因型,对多种药物敏感,耐药基因携带率不高,部分药物的耐药表型与耐药基因具有相关性。本研究为广东地区鹅源Pm病的监测和防治提供参考依据,为Pm耐药机制的研究奠定基础。 展开更多

关键词 多杀性巴氏杆菌 药物敏感性试验 耐药基因

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鹅源副鸡禽杆菌全基因组重测序及比较基因组学分析

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作者 苏文楠 刘佳琪 +4 位作者 钟嘉诚 陈济铛 朱婉君 张溢珊 张济培 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1208-1216,共9页

为了分析鹅源副鸡禽杆菌(Apg)与鸡源菌株的基因组差异,对3株鹅源Apg和4株鸡源Apg进行全基因重测序及基因组分析。全基因重测序结果显示7株菌株基因组片段大小为2.567 832~2.607 127 Mb, GC含量介于40.80%~40.93%之间。SNPs同源性分析结... 为了分析鹅源副鸡禽杆菌(Apg)与鸡源菌株的基因组差异,对3株鹅源Apg和4株鸡源Apg进行全基因重测序及基因组分析。全基因重测序结果显示7株菌株基因组片段大小为2.567 832~2.607 127 Mb, GC含量介于40.80%~40.93%之间。SNPs同源性分析结果显示,3株鹅源菌株和鸡源C-AP3株聚集在p4chr1株的小分支上,另外3株鸡源菌株分布在其它国内菌株分支上。基因同源性分析结果显示鹅源菌株特有基因76个,鸡源菌株特有基因37个。对鹅适应性基因的筛查共聚类出79个基因,其中编码已知蛋白的基因有22个,其余编码假定蛋白;对鸡适应性基因的筛查聚类出39个基因,其中10个编码已知蛋白,29个编码假定基因。通过比较基因组学发现与Apg宿主适应性有关的基因为118个,为进一步阐释Apg跨物种感染的分子生物学机制奠定了基础。 展开更多

关键词 副鸡禽杆菌 比较基因组学 全基因重测序 跨物种传播

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18型鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及致病性研究 被引量：2

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作者 杨智灿 张美琳 +6 位作者 李仕楷 苏文楠 李宛珈 张溢珊 朱婉君 陈济铛 张济培 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期909-914,共6页

为确定广东梅州市某养殖场病死鹅的发病原因及病原特征,本研究采集其肝脏、心脏等组织样品,经TSA血清平板培养后观察菌落形态、生化试验、PCR鉴定、血清型鉴定,确定该分离菌为血清18型鸭疫里默氏杆菌(RA-18);对分离菌进行药敏试验、毒... 为确定广东梅州市某养殖场病死鹅的发病原因及病原特征,本研究采集其肝脏、心脏等组织样品,经TSA血清平板培养后观察菌落形态、生化试验、PCR鉴定、血清型鉴定,确定该分离菌为血清18型鸭疫里默氏杆菌(RA-18);对分离菌进行药敏试验、毒力基因检测及马岗鹅的致病性试验;结果显示,分离菌对阿莫西林、头孢拉定、头孢唑啉、头孢噻呋、头孢曲松、大观霉素、氟苯尼考、多西环素、氧氟沙星敏感;对青霉素、新霉素、丁胺卡那、卡那霉素、庆大霉素、阿奇霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、复方新诺明、多粘菌素B耐药;共检出6种毒力基因(Fur、lux E、tct R、luxr1、cwa H、lipid A);以实际接种量5×10^(5)cfu/m L的分离菌经肌肉注射感染马岗鹅,结果显示未引起马岗鹅的死亡;以实际接种量5×10^(8)cfu/m L的分离菌分别经肌肉、脚蹼注射和滴鼻感染白鸭和白鹅,在感染后7 d的观察期内观察动物的临床症状及剖检,无菌采集各组动物的脑组织、心脏、肝脏、脾脏,经相应处理后涂板,采用平板计数法测定各脏器的载菌量。结果显示,白鹅肌肉、白鹅脚蹼、白鸭肌肉接种感染可导致鹅、鸭的发病及死亡,滴鼻接种未能引起鹅、鸭死亡;对各组白鹅、白鸭的各脏器进行平板计数,结果显示各组的各种动物的心脏、肝脏、脑组织、脾脏均可测得一定的菌量。肌肉注射组动物的组织病理学观察结果显示,分离菌感染白鸭及白鹅的病理变化涉及脑组织、心脏、肝脏、脾脏等。结果表明,本研究首次在国内分离到RA-18菌株,该菌株对白鸭和白鹅具有一定的致病性,对广东地区鹅源鸭疫里默氏杆菌病(RAI)的诊断和防治有一定的参考意义。 展开更多

关键词 鸭疫里默氏杆菌 血清型 致病性

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抗水禽呼肠孤病毒σC蛋白抗体间接ELISA方法的建立及鹅群血清学调查

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作者 陈稼龙 何莉 +3 位作者 郑炜鸿 朱婉君 张济培 陈济铛 《广东畜牧兽医科技》 2024年第6期8-15,共8页

为提供水禽呼肠孤病毒病早期诊断的精准快速检测方法,该试验通过BL21(DE3)原核表达系统稳定表达水禽呼肠孤病毒σC蛋白,并将纯化的重组σC蛋白包被ELISA酶标板,经进一步反应条件优化。结果显示,该试验建立的ELISA检测方法最优反应条件是... 为提供水禽呼肠孤病毒病早期诊断的精准快速检测方法,该试验通过BL21(DE3)原核表达系统稳定表达水禽呼肠孤病毒σC蛋白,并将纯化的重组σC蛋白包被ELISA酶标板,经进一步反应条件优化。结果显示,该试验建立的ELISA检测方法最优反应条件是:抗原包被含量为1μg/孔,待检血清最佳稀释度为1∶50,孵育时间为45 min,酶标二抗最佳稀释度为1∶500,孵育时间为30 min,最佳底物显色时间为20 min,OD_(450)值≥0.3判定为阳性。该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,对水禽呼肠孤病毒基因Ⅰ型和基因Ⅱ型血清具有一定的交叉反应。对105份临床健康鹅群血清样品进行检测,阳性率高达77.33%。该研究提供了一种敏感高效的快速检测水禽呼肠孤病毒中和抗体的方法,为鹅群临床血清大规模检测提供方法,为研发商品化的ELISA检测试剂盒提供基础。 展开更多

关键词 水禽呼肠孤病毒 σC蛋白 间接ELISA方法 血清学调查

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鹅源副鸡禽杆菌的分离鉴定及致病性研究 被引量：2

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作者 卢玉葵 刘佳琪 +4 位作者 钟嘉诚 陈济铛 朱婉君 张溢珊 张济培 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2562-2572,共11页

【目的】了解广东地区鹅源副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)的生物学特性及其与国内外Apg菌株的差异。【方法】于2019年12月―2022年1月从广东地区采集疑似鹅传染性鼻炎病例,通过特异性PCR扩增、细菌分离纯化及16S rRNA基... 【目的】了解广东地区鹅源副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)的生物学特性及其与国内外Apg菌株的差异。【方法】于2019年12月―2022年1月从广东地区采集疑似鹅传染性鼻炎病例,通过特异性PCR扩增、细菌分离纯化及16S rRNA基因测序鉴定后进行比对并构建系统进化树,确定分离菌株种类并对其进行药敏试验和动物回归试验。【结果】本试验共分离鉴定获得3株鹅源Apg,分别命名为G-AP1、G-AP2、G-AP3,均属于NAD依赖型菌株。分离菌株发酵葡萄糖、蔗糖产酸不产气,氧化酶试验阳性。系统进化树结果显示,3株分离菌株血清型均为A型且亲缘关系较近,与国内大部分分离株亲缘关系较近,与国外分离株亲缘关系较远。分离菌株接种试验鹅,24 h后鹅出现面部肿胀与流鼻液,48 h后挤压肿胀部位可见乳白色絮状的黏稠鼻液流出,剖检病鹅可见肿胀部皮下和鼻窦、鼻甲黏膜水肿、出血、纤维性渗出,鼻窦腔蓄积干酪样渗出物。药敏试验结果表明,头孢噻呋、头孢噻诺、阿米卡星、喹诺酮类药物、氟苯尼考和克林霉素对3株分离菌株具有较强的体外生长抑制作用。【结论】本试验成功分离3株鹅源Apg菌株,可引起鹅群感染发病且具有传染性,研究结果为广东地区防治鹅传染性鼻炎提供了参考依据。 展开更多

关键词 鹅 副鸡禽杆菌(Apg) 分离鉴定 回归试验 药敏试验

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三株鹅源坦布苏病毒的分离鉴定及遗传进化分析 被引量：5

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作者 童佳欣 王杰煌 +3 位作者 朱婉君 涂军 张济培 陈济铛 《中国家禽》 北大核心 2023年第5期48-56,共9页

为了解广东地区鹅源坦布苏病毒流行情况,研究对自2020年6月至2021年6月从广东地区疑似坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)感染鹅的组织病料进行TMUV分离鉴定。结果显示:共分离出3株鹅源TMUV,可感染BHK-21细胞并导致细胞病变;3株分离株核苷... 为了解广东地区鹅源坦布苏病毒流行情况,研究对自2020年6月至2021年6月从广东地区疑似坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)感染鹅的组织病料进行TMUV分离鉴定。结果显示:共分离出3株鹅源TMUV,可感染BHK-21细胞并导致细胞病变;3株分离株核苷酸相似性为99.2%~99.7%,与Cluster2.1参考株基因同源性最高,为95.9%~99.3%,与Cluster2.2参考毒株同源性相对较低,为95.0%~96.4%;全基因组遗传进化分析和E蛋白氨基酸序列分析结果表明,3株鹅源分离株均位于Cluster2.1,其中Goose/GD/939/2021和Goose/GD/1025/2021 E蛋白氨基酸序列与其他毒株E蛋白相比多个位点存在差异。研究表明,从广东地区分离的3株鹅源TMUV均位于Cluster2.1,为进一步研究广东地区鹅源TMUV流行、进化及相关疾病的防控奠定基础。 展开更多

关键词 坦布苏病毒 鹅 BHK-21细胞 E基因 遗传进化

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三株新型鸭呼肠孤病毒分离鉴定及致病性试验

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作者 何莉 郑炜鸿 +3 位作者 胡楚坪 邓玉妹 张济培 陈济铛 《中国家禽》 2025年第10期88-96,共9页

为了解鸭新型呼肠孤病毒(NDRV)在鸭群中的流行情况及其致病性,研究采集疑似感染NDRV的病鸭肝脏和脾脏,经RT-PCR鉴定为阳性的组织样品经处理后接种鸭胚尿囊腔进行病原分离,对分离的病原作全基因序列测定和遗传进化分析,并验证其对雏番鸭... 为了解鸭新型呼肠孤病毒(NDRV)在鸭群中的流行情况及其致病性,研究采集疑似感染NDRV的病鸭肝脏和脾脏,经RT-PCR鉴定为阳性的组织样品经处理后接种鸭胚尿囊腔进行病原分离,对分离的病原作全基因序列测定和遗传进化分析,并验证其对雏番鸭及雏鹅致病性。结果显示:成功分离3株NDRV,接种樱桃谷鸭胚的死亡时间为72~120h;3个分离株与已知NDRV核苷酸序列相似性为86.1%~99.7%,与番鸭呼肠孤病毒(MDRV)相似性为41.5%~95.7%;3个分离株对雏番鸭及雏鹅均有致病性,主要表现为肝脏和脾脏出现红色坏死灶。研究表明,从广东地区分离的3株鸭源NDRV对雏鹅和雏番鸭均具有一定的致病性,为进一步研究广东地区NDRV的流行、遗传进化以及致病特性研究提供参考依据。 展开更多

关键词 新型鸭呼肠孤病毒 全基因测序 致病性试验 红色坏死灶

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