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肌纤维内源特异性TGF-β信号通过LRP1减轻小鼠急性骨骼肌炎
1
作者
蔡祺晖
蓝海强
+7 位作者
冼柏俊
王楠
黄晓蕾
牛晓璐
胡欣雨
李辰
谢俊毅
廖钊宏
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025年第7期1365-1374,共10页
目的:探究骨骼肌纤维内源特异性转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号对心脏毒素(cardiotoxin,CTX)诱导的小鼠急性骨骼肌炎后肌再生修复的影响。方法:选择186只野生C57BL/6小鼠和138只肌纤维TGF-β受体2(TGF-βrec...
目的:探究骨骼肌纤维内源特异性转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号对心脏毒素(cardiotoxin,CTX)诱导的小鼠急性骨骼肌炎后肌再生修复的影响。方法:选择186只野生C57BL/6小鼠和138只肌纤维TGF-β受体2(TGF-βreceptor 2,TGF-βr2)条件性敲除(SM TGF-βr2^(-/-))小鼠。胫骨前肌注射CTX诱导小鼠急性骨骼肌损伤,对部分SM TGF-βr2^(-/-)小鼠给予Smad信号激动剂SRI-011381(SRI)肌注,主要分为对照(control)组、SM TGF-βr2^(-/-)组和SM TGF-βr2^(-/-)+SRI组,每组24只。采用RT-qPCR和免疫荧光法检测各组损伤肌内炎症因子、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low-density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1)的mRNA和蛋白表达。Western blot和免疫荧光法检测各组损伤肌内肌纤维肌球蛋白重链3(myosin heavy chain 3,MHY3)和胚胎肌球蛋白重链(embryonic myosin heavy chain,eMHC)蛋白的表达。提取乳鼠四肢肌肉组织,体外分化培养肌源性前体细胞(myogenic precursor cells,MPCs),加入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)培养,且给予SRI和重组小鼠细胞外基质蛋白1(recombinant mouse extracellular matrix protein 1,rmECM1)等试剂单独或联用处理,主要分为以下7组(每组6只):control-MPCs组、control-MPCs+LPS组、TGF-βr2^(-/-)-MPCs组、TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS组、TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS+SRI组、TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS+rmECM1组及TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS+SRI+rmECM1组。RT-qPCR和Western blot检测各组肌管的主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(major histocompatibility complex class I molecules,MHC-I/H-2Kb)、主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(major histocompatibility complex class II molecules,MHC-II/H2-Eα)、Τοll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)和LRP1的mRNA和蛋白表达。免疫荧光法检测各组肌管内生肌决定因子(myogenic determining factor,MoyD)和肌细胞生成素(myogenin)分子的蛋白表达。结果:在体内,较之于control组,SM TGF-βr2^(-/-)组损伤肌内促炎因子显著上调(P<0.05)、抗炎因子与LRP1、MHY3和eMHC等显著下调(P<0.05),肌纤维再生修复延迟。体外炎症环境中,较之于control-MPCs+LPS组,TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS组中LRP1、MoyD和myogenin等显著下调(P<0.05),给予SRI处理后,下调趋势得以逆转(P<0.05)。此外,与TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS组比较,联用rmECM1与SRI能显著上调MyoD和myogenin的蛋白表达(P<0.05)。结论:在小鼠急性骨骼肌炎中,肌纤维内源特异性TGF-β信号通过Smad2/3信号调控损伤肌局部免疫特性,促进LRP1分子的表达,后者能与ECM1充分结合后促进肌再生修复,从而改善急性骨骼肌炎预后。
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关键词
转化生长因子β
急性骨骼肌炎
低密度脂蛋白受体相关蛋白1
再生
修复
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职称材料
题名
肌纤维内源特异性TGF-β信号通过LRP1减轻小鼠急性骨骼肌炎
1
作者
蔡祺晖
蓝海强
冼柏俊
王楠
黄晓蕾
牛晓璐
胡欣雨
李辰
谢俊毅
廖钊宏
机构
佛山大学医学部医学技术教研室
南方医科
大学
基础
医学
院解剖
教研室
出处
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025年第7期1365-1374,共10页
基金
佛山科学技术学院高层次人才及岭南学者科研启动项目(No.BKS209127)。
文摘
目的:探究骨骼肌纤维内源特异性转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号对心脏毒素(cardiotoxin,CTX)诱导的小鼠急性骨骼肌炎后肌再生修复的影响。方法:选择186只野生C57BL/6小鼠和138只肌纤维TGF-β受体2(TGF-βreceptor 2,TGF-βr2)条件性敲除(SM TGF-βr2^(-/-))小鼠。胫骨前肌注射CTX诱导小鼠急性骨骼肌损伤,对部分SM TGF-βr2^(-/-)小鼠给予Smad信号激动剂SRI-011381(SRI)肌注,主要分为对照(control)组、SM TGF-βr2^(-/-)组和SM TGF-βr2^(-/-)+SRI组,每组24只。采用RT-qPCR和免疫荧光法检测各组损伤肌内炎症因子、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low-density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1)的mRNA和蛋白表达。Western blot和免疫荧光法检测各组损伤肌内肌纤维肌球蛋白重链3(myosin heavy chain 3,MHY3)和胚胎肌球蛋白重链(embryonic myosin heavy chain,eMHC)蛋白的表达。提取乳鼠四肢肌肉组织,体外分化培养肌源性前体细胞(myogenic precursor cells,MPCs),加入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)培养,且给予SRI和重组小鼠细胞外基质蛋白1(recombinant mouse extracellular matrix protein 1,rmECM1)等试剂单独或联用处理,主要分为以下7组(每组6只):control-MPCs组、control-MPCs+LPS组、TGF-βr2^(-/-)-MPCs组、TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS组、TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS+SRI组、TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS+rmECM1组及TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS+SRI+rmECM1组。RT-qPCR和Western blot检测各组肌管的主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(major histocompatibility complex class I molecules,MHC-I/H-2Kb)、主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(major histocompatibility complex class II molecules,MHC-II/H2-Eα)、Τοll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)和LRP1的mRNA和蛋白表达。免疫荧光法检测各组肌管内生肌决定因子(myogenic determining factor,MoyD)和肌细胞生成素(myogenin)分子的蛋白表达。结果:在体内,较之于control组,SM TGF-βr2^(-/-)组损伤肌内促炎因子显著上调(P<0.05)、抗炎因子与LRP1、MHY3和eMHC等显著下调(P<0.05),肌纤维再生修复延迟。体外炎症环境中,较之于control-MPCs+LPS组,TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS组中LRP1、MoyD和myogenin等显著下调(P<0.05),给予SRI处理后,下调趋势得以逆转(P<0.05)。此外,与TGF-βr2^(-/-)-MPCs+LPS组比较,联用rmECM1与SRI能显著上调MyoD和myogenin的蛋白表达(P<0.05)。结论:在小鼠急性骨骼肌炎中,肌纤维内源特异性TGF-β信号通过Smad2/3信号调控损伤肌局部免疫特性,促进LRP1分子的表达,后者能与ECM1充分结合后促进肌再生修复,从而改善急性骨骼肌炎预后。
关键词
转化生长因子β
急性骨骼肌炎
低密度脂蛋白受体相关蛋白1
再生
修复
Keywords
transforming growth factor-β
acute skeletal myositis
low-density lipoprotein receptor-related protein 1
regeneration
repair
分类号
R363.2 [医药卫生—病理学]
R685.2 [医药卫生—骨科学]
Q785 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肌纤维内源特异性TGF-β信号通过LRP1减轻小鼠急性骨骼肌炎
蔡祺晖
蓝海强
冼柏俊
王楠
黄晓蕾
牛晓璐
胡欣雨
李辰
谢俊毅
廖钊宏
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025
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