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布鲁氏菌的胞内生存机制研究进展 被引量:8
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作者 马忠臣 胡瑞瑞 +4 位作者 李芮芮 王震 努尔赛力克·努素甫 王勇 陈创夫 《动物医学进展》 北大核心 2021年第6期71-78,共8页
布鲁氏菌的感染周期和致病能力主要取决于其在吞噬细胞内的生存能力。布鲁氏菌入侵宿主细胞后,会经历多阶段复杂的细胞内循环过程。它们通过Ⅳ型分泌系统(T4SS)的介导依次通过内吞层,分泌层和自噬区,并发挥其功能。T4SS启动子调节一系... 布鲁氏菌的感染周期和致病能力主要取决于其在吞噬细胞内的生存能力。布鲁氏菌入侵宿主细胞后,会经历多阶段复杂的细胞内循环过程。它们通过Ⅳ型分泌系统(T4SS)的介导依次通过内吞层,分泌层和自噬区,并发挥其功能。T4SS启动子调节一系列宿主功能和机制,首先促进最初的内体样布氏小体(eBCV)转化为融合宿主内质网的复制细胞器(rBCV),然后转化为自噬相关囊泡(aBCV)完成布鲁氏菌释放。论文详细介绍和讨论了目前对布鲁氏菌细胞内循环过程和相关分子机制研究进展,论述了T4SS功能的表达在内体阶段的作用,自噬在rBCV生成和aBCV形成中的作用以及T4SS介导的rBCV生成和布鲁氏菌调节宿主分泌转运机制的重要性。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 胞内生存 布氏小体 Ⅳ型分泌系统
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布鲁氏菌分泌蛋白BspD多克隆抗体制备及其生物信息学分析 被引量:2
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作者 李芮芮 马忠臣 +4 位作者 张弘扬 王震 努尔赛力克·努素甫 王勇 陈创夫 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第2期676-684,共9页
本研究旨在获得布鲁氏菌BspD蛋白,制备其多克隆抗体,并分析其潜在生物学功能。根据流产布鲁氏菌(Brucella abortus)2308的BspD基因序列(GenBank登录号:NC_007618.1)获得BspD基因序列,对布鲁氏菌BspD氨基酸序列进行生物信息学分析,然后... 本研究旨在获得布鲁氏菌BspD蛋白,制备其多克隆抗体,并分析其潜在生物学功能。根据流产布鲁氏菌(Brucella abortus)2308的BspD基因序列(GenBank登录号:NC_007618.1)获得BspD基因序列,对布鲁氏菌BspD氨基酸序列进行生物信息学分析,然后将目的基因嵌入pMD19-T载体,使用限制性内切酶切下目的基因重组入pET-28a(+)载体,构建pET28a-BspD重组载体,经过双酶切、测序验证后,IPTG诱导表达菌株,SDS-PAGE法鉴定BspD的表达,His标签蛋白纯化柱纯化BspD蛋白,BCA试剂盒检测蛋白浓度。用纯化BspD蛋白免疫新西兰大白兔,Western blotting鉴定多克隆抗体的特异性,间接ELISA法检测抗体的效价及反应原性。结果表明,成功表达出37 ku BspD蛋白,BCA方法测得纯化BspD浓度为2000μg/mL;Western blotting结果显示制备的抗体具有良好的特异性,间接ELISA检测出BspD多克隆抗体的效价为1∶12800,成功制备出BspD多克隆抗体,但其反应原性较低。生物学信息分析得出BspD蛋白具有亲水性,存在跨膜区,无信号肽,有17个磷酸化位点和11个抗原决定簇,BspD蛋白二级结构以α-螺旋为主,达到86.80%,还存在少量延伸链、无规则卷曲、β-折叠等;在线软件Phyre 2构建BspD三级结构证实其多为α-螺旋。以上结果可为进一步研究布鲁氏菌分泌蛋白BspD的功能及分子机制提供参考。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 BspD分泌蛋白 生物信息学分析 多克隆抗体
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基层农机安全监理的问题与工作措施
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作者 刘慧娟 《农业工程技术》 2020年第14期54-54,共1页
近年来全国的农业机械保有量逐年上升,农机的类型、种类不断创新,必须要加强基层农机安全监理工作力度,促进农机事业不断发展,提高农业生产水平。当前基层农机安全监理存在操作员安全意识薄弱、机械安全管理存在缺位、高素质监理人才紧... 近年来全国的农业机械保有量逐年上升,农机的类型、种类不断创新,必须要加强基层农机安全监理工作力度,促进农机事业不断发展,提高农业生产水平。当前基层农机安全监理存在操作员安全意识薄弱、机械安全管理存在缺位、高素质监理人才紧缺等问题,要加强农户安全意识教育,加大农机安全监督管理力度和引导示范作用,加快高素质监理人才队伍建设,进一步提高农民农机使用效率,减少农机安全事故发生。 展开更多
关键词 农机 监理 安全意识 安全管理 人员素质
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