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广东地方品种鸡ALV-K分子流行病学及gag基因12 bp缺失对病毒体外复制能力影响的研究 被引量:5
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作者 郭妍妍 梁灿新 +3 位作者 李锦群 董欣怡 廖明 曹伟胜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期3956-3966,共11页
为了解目前广东地方品种鸡K亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV-K)的分子特征,于2020-2021年,从广东7家(A~G)正在进行外源性ALV净化的、外观健康的规模化种禽场核心群采集抗凝血样品共8042份。通过血浆接种DF-1细胞、ELISA检测... 为了解目前广东地方品种鸡K亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV-K)的分子特征,于2020-2021年,从广东7家(A~G)正在进行外源性ALV净化的、外观健康的规模化种禽场核心群采集抗凝血样品共8042份。通过血浆接种DF-1细胞、ELISA检测p27抗原,共检出357份阳性,并对ELISA结果S/P值0.2~0.6的150份阳性样品进行PCR鉴定和env基因测序,共分离到32株ALV-K,进一步选取16株进行全基因组扩增及测序分析。结果显示,这16株ALV-K全长为7481~7496 bp,基因组符合5′-LTR-UTR-gag-pol-env-UTR-LTR-3′典型的反转录病毒结构,不含已知致癌基因;其gp85基因与ALV-K参考株位于同一进化分支上且相似性最高(>94.0%);其pol、gp37基因均比较保守,与ALV各亚群相似性均较高(>94.0%);其LTR与内源性ALV及大多数ALV-K参考株相似性最高(91.4%~99.5%),且LTR U3区与内源性ALV LTR有相同的转录调控元件;此外,观察到31.3%(5/16)的分离株在gag基因373-384位核苷酸存在12 bp的缺失,进一步以缺失株GD20 JM10为亲本,通过PCR分段扩增和同源重组的方法分别构建了缺失株(rGD20 JM10)和回补株(rGD20 JM10 A12)的cDNA克隆,将其转染DF-1细胞,ELISA和IFA结果表明,病毒拯救成功;体外复制动力学结果显示,两者差异不显著(P>0.05)。本研究所调查的广东7个种禽场的ALV-K流行株均携带内源性LTR,且分子特征较为稳定,故采用更敏感的检测技术在开展ALV净化时尤为重要,此外,gag基因373—384位核苷酸的规律性缺失对病毒的体外复制能力无显著影响。 展开更多
关键词 K亚群禽白血病病毒 地方品种鸡 分子流行病学 GAG基因 感染性克隆
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H6N6亚型禽流感病毒广东分离株分子遗传演化分析 被引量:5
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作者 张烁 林宏文 +9 位作者 袁润余 宋亚芬 崔进 龚浪 瞿孝云 韩翡 吴晓薇 徐成刚 廖明 焦培荣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期989-996,共8页
2010年至2011年在中国广东地区活禽交易市场进行流行病学调查时,在鸭咽和泄殖腔拭子中分离到2株H6N6亚型禽流感病毒,分别命名为A/Duck/Guangdong/C45/2010(H6N6)、A/Duck/Guangdong/C120/2011(H6N6)。应用RT-PCR分别对2株毒株的8个基因... 2010年至2011年在中国广东地区活禽交易市场进行流行病学调查时,在鸭咽和泄殖腔拭子中分离到2株H6N6亚型禽流感病毒,分别命名为A/Duck/Guangdong/C45/2010(H6N6)、A/Duck/Guangdong/C120/2011(H6N6)。应用RT-PCR分别对2株毒株的8个基因片段进行了克隆、测序与分析,结果表明:2毒株的HA裂解位点附近的氨基酸序列为P-Q-I-E-T-R-G,只有1个碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒HA裂解位点附近的氨基酸序列特征;与2毒株HA基因相似性最高的毒株为A/Duck/Guangxi/GXd-5/2010(H6N1),与NA基因相似性最高的毒株分别为A/Duck/Fujian/3242/2007(H6N6)和A/Duck/Fujian/6159/2007(H6N6)。全基因组分子遗传演化分析表明,2毒株的8个基因片段均属于欧亚谱系的禽源演化分支;但HA基因属于ST2853-like分支,NP基因属于HN573-like分支,PB2、PB1、PA、M和NS基因属于ST339-like分支,说明本研究中的2株病毒为不同基因群间基因交换的重组病毒。因此,有必要加强H6亚型禽流感病毒流行病学调查以便及时关注其遗传变异与致病性进化,为中国禽流感的预防与控制提供数据支持和理论指导。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H6N6 分子遗传演化分析
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当前我国H5亚型高致病性禽流感流行情况分析 被引量:17
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作者 王念晨 曲楠楠 +7 位作者 欧阳国文 赵冰兵 陈祖贤 张友 王文清 吴斯宇 廖明 焦培荣 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2016年第4期77-81,共5页
近年来,高致病性禽流感对我国养禽业造成了巨大损失,同时也严重威胁人类健康。本文根据2015年我国已经公开的H5亚型高致病性禽流感疫情及流行监测状况,分析了当前我国H5亚型高致病性禽流感流行特点,并提出流行病学监测、家禽养殖管理、... 近年来,高致病性禽流感对我国养禽业造成了巨大损失,同时也严重威胁人类健康。本文根据2015年我国已经公开的H5亚型高致病性禽流感疫情及流行监测状况,分析了当前我国H5亚型高致病性禽流感流行特点,并提出流行病学监测、家禽养殖管理、诊断方案及宣传舆论教育等防控策略,旨在为H5亚型高致病性禽流感的预防与控制工作提供参考。 展开更多
关键词 H5亚型高致病性禽流感 流行疫情 防控策略
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当前我国H5亚型禽流感的流行情况及防控对策 被引量:15
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作者 李伟强 何婉婷 +8 位作者 王霞 刘智婷 张友 王文清 赵冰兵 陈祖贤 廖明 瞿孝云 焦培荣 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第2期114-116,共3页
禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的一种主要感染禽类的人兽共患传染病。禽流感病毒的自然宿主是水禽,但它也可以感染多种家禽和人等哺乳动物,因此禽流感是威胁养禽业和人类健康的主要传染病之一。禽流感病毒在进化过... 禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的一种主要感染禽类的人兽共患传染病。禽流感病毒的自然宿主是水禽,但它也可以感染多种家禽和人等哺乳动物,因此禽流感是威胁养禽业和人类健康的主要传染病之一。禽流感病毒在进化过程中易通过基因重排或基因突变而发生变异,导致新的毒株不断出现。另外,我国幅员辽阔、家禽品种繁多、养殖方式多样化,这增加了防控禽流感的难度。 展开更多
关键词 H5亚型禽流感 防控对策 流行情况 人兽共患传染病 禽流感病毒 A型流感病毒 家禽品种 自然宿主
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当前非洲猪瘟流行状况、诊断及防控措施 被引量:2
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作者 黎金荣 关蕴 +7 位作者 武文博 张俊生 薛倩 刘静 王霞 何婉婷 孙海亮 焦培荣 《广东畜牧兽医科技》 2019年第4期1-5,17,51,52,共8页
非洲猪瘟由非洲猪瘟病毒感染引起的一种烈性、广泛出血性传染病,其发病率和死亡率可达100%,是我国法定的一类动物疫病。2018年8月我国首次报道了非洲猪瘟疫情,截至2019年4月12日已有30个省份共121起疫情,对养猪业造成了严重的损失。为... 非洲猪瘟由非洲猪瘟病毒感染引起的一种烈性、广泛出血性传染病,其发病率和死亡率可达100%,是我国法定的一类动物疫病。2018年8月我国首次报道了非洲猪瘟疫情,截至2019年4月12日已有30个省份共121起疫情,对养猪业造成了严重的损失。为了提高从业人员对非洲猪瘟的认识,增强预防和防控能力,本文从非洲猪瘟的病原学、流行病学、诊断方法和防控措施与挑战四个方面进行了概述。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 流行状况 诊断 防控措施
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鸡干扰素调节因子7的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:3
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作者 崔鹏飞 邓国华 +2 位作者 韦良孟 焦培荣 廖明 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第4期1-4,共4页
为表达鸡干扰素调节因子7蛋白并制备其多克隆抗体,通过RT-PCR技术扩增chIRF7基因的编码序列,构建重组质粒PET30a-chIRF7。将重组质粒转化至大肠埃希菌(E.coil)BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白rchIRF7分子量约为60ku。... 为表达鸡干扰素调节因子7蛋白并制备其多克隆抗体,通过RT-PCR技术扩增chIRF7基因的编码序列,构建重组质粒PET30a-chIRF7。将重组质粒转化至大肠埃希菌(E.coil)BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白rchIRF7分子量约为60ku。将纯化的重组蛋白免疫接种小鼠制备多克隆抗体,间接ELISA测定血清抗体滴度在1∶51 200以上,IFA检测结果显示制备的鼠抗chIRF7蛋白多抗能够与AIV刺激的CEF细胞内的chIRF7蛋白发生特异性反应,表明通过原核表达系统表达的重组蛋白rchIRF7具有很好的免疫原性,以其制备的鼠抗chIRF7蛋白多克隆抗体滴度高、特异性好。 展开更多
关键词 鸡干扰素调节因子7 原核表达 多克隆抗体
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鸡α干扰素的原核表达及纯化 被引量:4
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作者 吴斯宇 孙超 +6 位作者 崔进 冯赛祥 黄健妮 王念晨 曲楠楠 廖明 焦培荣 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期29-31,共3页
根据大肠杆菌密码子的偏好性对Gen Bank中发表的鸡α干扰素基因序列进行了密码子优化,全基因合成了鸡α干扰素基因片段486 bp。构建原核表达质粒p ET-23b-Ch IFN-α。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,表达产物主要... 根据大肠杆菌密码子的偏好性对Gen Bank中发表的鸡α干扰素基因序列进行了密码子优化,全基因合成了鸡α干扰素基因片段486 bp。构建原核表达质粒p ET-23b-Ch IFN-α。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,表达产物主要以包涵体形式存在,包涵体进行变性、复性和镍柱亲和纯化。表达产物经SDS-PAGE、WesternBlot分析表明,Ch IFN-α蛋白得到了高效表达,其蛋白分子质量约19 k D,经镍柱亲和纯化后获得了高纯度的重组鸡α干扰素蛋白,其含量为0.82 mg/m L。本研究为鸡α干扰素的生物学活性分析和临床产品研发奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡α干扰素 原核表达 蛋白纯化
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当前全球禽流感流行状况与流行特点分析 被引量:14
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作者 刘智婷 李伟强 +7 位作者 王霞 何婉婷 张友 王文清 陈祖贤 赵冰兵 廖明 焦培荣 《中国家禽》 北大核心 2017年第24期1-4,共4页
2016年至今,H5N1、H5N2、H5N5、H5N6、H5N8、H5N9、H7N1、H7N3、H7N7、H7N8、H7N9亚型禽流感病毒引起了欧、亚、非、美四大洲的60多个国家和地区暴发了约3 700起疫情,或在部分地区的野禽中临床分离到。H5N1、H5N6亚型禽流感疫情主要威... 2016年至今,H5N1、H5N2、H5N5、H5N6、H5N8、H5N9、H7N1、H7N3、H7N7、H7N8、H7N9亚型禽流感病毒引起了欧、亚、非、美四大洲的60多个国家和地区暴发了约3 700起疫情,或在部分地区的野禽中临床分离到。H5N1、H5N6亚型禽流感疫情主要威胁着亚洲部分国家和地区,H5N8亚型禽流感疫情主要威胁着欧洲部分国家,H5N1、H5N8亚型禽流感疫情在非洲均有发生。H7亚型禽流感病毒仍然威胁着欧、亚、非、美四大洲,其中H7N9亚型主要在中国和美国流行,特别在2016年年底由低致病性变为高致病性且暴发了多起疫情。由此可见,H5、H7禽流感疫情继续威胁着全球的动物健康和公共卫生安全,并造成巨大经济损失。本文介绍了2016年至今全球禽流感的流行状况,分析了其流行特点,以期对国内禽流感的防控有所借鉴。 展开更多
关键词 全球 禽流感 流行情况 流行特点
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