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水稻OsCKX2基因表达实时荧光定量PCR检测技术的建立
被引量：
1
1
作者
高东
魏富刚
+3 位作者
何霞红
孟国成
刀丽云
朱有勇
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期351-357,共7页
从水稻花序分生组织总RNA中逆转录扩增总cDNA,PCR扩增OsCKX2基因中设计的目的片段,将纯化的目的片段克隆到pMD19-TSimple载体中,PCR鉴定并测序分析,制备成荧光定量PCR梯度浓度质粒标准品。对重组质粒进行实时荧光定量PCR实验。标准曲线...
从水稻花序分生组织总RNA中逆转录扩增总cDNA,PCR扩增OsCKX2基因中设计的目的片段,将纯化的目的片段克隆到pMD19-TSimple载体中,PCR鉴定并测序分析,制备成荧光定量PCR梯度浓度质粒标准品。对重组质粒进行实时荧光定量PCR实验。标准曲线结果表明,建立的OsCKX2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,特异性好,灵敏度高,可达102拷贝;线性范围广,可达1.0×102~1.0×107拷贝;扩增效率高（E=95.9%）;稳定性、重复性好,可靠性高,批内和批间变异系数（CV）仅为：0.14%~0.29%和0.16%~0.35%;循环阈值与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系（r=1.000）,可对OsCKX2基因表达进行准确实时定量。一个基于TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术,定量分析控制水稻谷粒数关键基因之一OsCKX2转录水平的技术体系被成功建立。该技术体系重组质粒标准品的制备方法具有很强的实用性;对基因OsCKX2的表达实时定量准确、可靠、便捷。
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关键词
水稻
基因表达
实时定量RT-PCR
TAQMAN探针
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职称材料
题名
水稻OsCKX2基因表达实时荧光定量PCR检测技术的建立
被引量：
1
1
作者
高东
魏富刚
何霞红
孟国成
刀丽云
朱有勇
机构
云南
农业
大学
云南省红河州新街镇农业综合服务中心
出处
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期351-357,共7页
基金
国家“973”计划资助项目(2006CB100200)
文摘
从水稻花序分生组织总RNA中逆转录扩增总cDNA,PCR扩增OsCKX2基因中设计的目的片段,将纯化的目的片段克隆到pMD19-TSimple载体中,PCR鉴定并测序分析,制备成荧光定量PCR梯度浓度质粒标准品。对重组质粒进行实时荧光定量PCR实验。标准曲线结果表明,建立的OsCKX2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,特异性好,灵敏度高,可达102拷贝;线性范围广,可达1.0×102~1.0×107拷贝;扩增效率高（E=95.9%）;稳定性、重复性好,可靠性高,批内和批间变异系数（CV）仅为：0.14%~0.29%和0.16%~0.35%;循环阈值与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系（r=1.000）,可对OsCKX2基因表达进行准确实时定量。一个基于TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术,定量分析控制水稻谷粒数关键基因之一OsCKX2转录水平的技术体系被成功建立。该技术体系重组质粒标准品的制备方法具有很强的实用性;对基因OsCKX2的表达实时定量准确、可靠、便捷。
关键词
水稻
基因表达
实时定量RT-PCR
TAQMAN探针
Keywords
rice
gene expression
real-time RT-PCR
TaqMan probe
分类号
S511.032 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水稻OsCKX2基因表达实时荧光定量PCR检测技术的建立
高东
魏富刚
何霞红
孟国成
刀丽云
朱有勇
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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