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Mcl-1基因与血液系统肿瘤关系的研究进展 被引量：4
1
作者 李智慧 李惠民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期509-512,共4页
髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukelia-1,MCL-1)基因属于Bcl-2家族成员,是高度可调节的分化早期活化基因,在细胞的凋亡调节和肿瘤的发生发展过程中起重要作用。本文就mcl-1基因及产物的特点,基因的表达的调控机制以及它与不同血液肿... 髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukelia-1,MCL-1)基因属于Bcl-2家族成员,是高度可调节的分化早期活化基因,在细胞的凋亡调节和肿瘤的发生发展过程中起重要作用。本文就mcl-1基因及产物的特点,基因的表达的调控机制以及它与不同血液肿瘤的关系的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 MCL-1基因 细胞凋亡 淋巴瘤 骨髓瘤 白血病
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实时定量RT-PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML-RARa融合基因 被引量：7
2
作者 郎丽 李惠民 +2 位作者 刘华 王义民 张学美 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期714-719,共6页
本研究旨在建立用实时定量RT-PCR检测急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARa mRNA的方法,探讨APLPML-RARa融合基因表达水平与疗效的关系。用RT-PCR扩增培养的NB4细胞的PML-RARa融合基因,取1μgNB4细胞的总cDNA进行10倍的梯度稀释,作为标准... 本研究旨在建立用实时定量RT-PCR检测急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARa mRNA的方法,探讨APLPML-RARa融合基因表达水平与疗效的关系。用RT-PCR扩增培养的NB4细胞的PML-RARa融合基因,取1μgNB4细胞的总cDNA进行10倍的梯度稀释,作为标准品,建立荧光定量RT-PCR方法,对方法的灵敏性、稳定性、重复性进行了测定。定量检测4例急性早幼粒细胞白血病(APL)患者治疗前后骨髓内PML-RARa融合基因转录本水平,并对1例经治疗完全缓解后又复发的患者PML-RARa转录本水平(拷贝数)进行动态监测。结果表明:用本研究建立的实时定量RT-PCR方法可检测出10-5μgNB4细胞cDNA中的PML-RARa融合基因,其重复性的CT值,管间、批间变异系数(CV)分别为2.1%、3.8%。4例患者初治骨髓PML-RARa基因转录本水平的分别为1884、5533、1803、4677拷贝,平均为3475拷贝。经ATRA+化疗治疗后其PML-RARa基因转录水平下降至40、135、79、229拷贝,平均为121拷贝。还有1例患者治疗前PML-RARa基因转录本水平为8600拷贝,经过4个月治疗,虽然此时患者处于完全缓解期,但其转录水平拷贝数仍有730。3个月后患者出现复发,转录本水平升至为11000拷贝。经过ATRA+化疗治疗后转录本水平又逐渐下降至1200拷贝。结论;建立的实时定量RT-PCR灵敏、重复性好。治疗后APL患者的PML-RARa融合基因转录本水平明显下降,复发时基因转录本水平又升高。融合基因表达水平的改变与临床疾病进展关系一致,这有助于监测白血病微小残留病,评价疗效及判断预后。 展开更多
关键词 实时定量RT-PCR 急性早幼粒细胞白血病 PML/RARa融合基因 微小残留病灶
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As_2O_3抑制人淋巴瘤Raji细胞增殖及VEGF表达 被引量：6
3
作者 喻镁佳 段勇 +2 位作者 刘华 张学美 李惠民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期704-707,共4页
本研究探讨在As2O3作用下人淋巴瘤Raji细胞的增殖及VEGFmRNA表达的变化。采用改良MTT方法观察As2O3对Raji细胞的增殖抑制效应;采用半定量RT-PCR方法检测As2O3对Raji细胞VEGF121和VEGF165mRNA表达的影响。结果表明As2O3对Raji细胞的作用... 本研究探讨在As2O3作用下人淋巴瘤Raji细胞的增殖及VEGFmRNA表达的变化。采用改良MTT方法观察As2O3对Raji细胞的增殖抑制效应;采用半定量RT-PCR方法检测As2O3对Raji细胞VEGF121和VEGF165mRNA表达的影响。结果表明As2O3对Raji细胞的作用表现时间、剂量依赖性的增殖抑制效应,建立回归方程为IR=0.531dose+0.481time(P<0.05)。半定量RT-PCR方法检测显示,Raji细胞同时表达VEGF121和VEGF165两种剪切变异体,二者的表达水平相当(VEGF1211.17±0.14;VEGF1651.31±0.19,P>0.05)。VEGF121和VEGF165mRNA表达量与As2O3作用时间呈负相关关系(rsv121=-0.547,P<0.05;rsv165=-0.632,P<0.05),且VEGF的各异构体对药物的反应具有差异性,VEGF165mRNA表达下调早且有持续性。但在所选浓度组中未发现类似的相关关系(P>0.05)。结论As2O3既可抑制Raji细胞生长增殖,亦可通过下调VEGFmRNA表达而产生抗血管新生效应,且小剂量、长时程给药时结果亦然。 展开更多
关键词 三氧化二砷 淋巴瘤 血管内皮生长因子 血管新生
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实时定量PCR法检测淋巴瘤患者Bcl-2／IgH融合基因及其临床意义 被引量：4
4
作者 张学美 徐明 +3 位作者 刘华 李惠民 李云涛 何争春 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期368-372,共5页
本研究目的是检测滤泡性淋巴瘤和弥漫大B细胞淋巴瘤患者bcl-2/IgH融合基因的表达水平,以探讨其临床意义。以SYBRGreenⅠ荧光染料实时定量PCR方法检测20例患者外周血和(或)骨髓bcl-2/IgH融合基因的表达水平,并对其中4例患者bcl-2/IgH融... 本研究目的是检测滤泡性淋巴瘤和弥漫大B细胞淋巴瘤患者bcl-2/IgH融合基因的表达水平,以探讨其临床意义。以SYBRGreenⅠ荧光染料实时定量PCR方法检测20例患者外周血和(或)骨髓bcl-2/IgH融合基因的表达水平,并对其中4例患者bcl-2/IgH融合基因的表达水平进行动态监测。结果表明,在bcl-2/IgH融合基因阳性表达的病例中,骨髓和外周血bcl-2/IgH融合基因的相对拷贝数分别为4.23和2.73,统计学分析差异无显著性(p=0.107),而治疗前后融合基因的相对拷贝数均数分别为3.61和2.69,统计学分析差异有显著性(p=0.000),初诊及复发组的bcl-2/IgH融合基因表达水平明显高于缓解组(p=0.008),在4例患者的外周血bcl-2/IgH融合基因动态监测结果中,1例患者在临床复发前3个月bcl-2/IgH融合基因表达水平明显上升。结论:bcl-2/IgH融合基因表达水平与患者的疾病状态有一定的相关性,初诊及复发患者融合基因的表达水平高,而缓解患者融合基因的表达水平低,治疗后融合基因表达水平较治疗前明显下降,bcl/IgH融合基因表达水平的变化可能与临床疾病进程有关,检测外周血是比较可行的。 展开更多
关键词 Bcl-2/IgH融合基因 淋巴瘤 实时定量PCR
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破骨细胞活化因子与骨髓瘤骨病的关系 被引量：4
5
作者 高维 李晓进 +3 位作者 张学美 谭琳 聂波 李惠民 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第23期3947-3950,共4页
目的:探讨破骨细胞活化因子与骨髓瘤骨病的关系,研究其与骨损程度的关系。方法:采用实时荧光定量RT-PCR检测多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓及骨髓瘤细胞株U266中细胞核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)、护骨蛋白(OPG)、神经元特异性烯醇化酶(... 目的:探讨破骨细胞活化因子与骨髓瘤骨病的关系,研究其与骨损程度的关系。方法:采用实时荧光定量RT-PCR检测多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓及骨髓瘤细胞株U266中细胞核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)、护骨蛋白(OPG)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)的mRNA转录情况,进而探讨其在MM骨病中的作用。结果:U266及MBD患者中,RANKL、MIP-1α及大部分NSEmRNA的转录水平显著高于对照组,且与骨损害程度基本呈正相关,MM中OPG的分泌较对照组明显减少。结论:骨髓瘤骨病是一个多因子、多系统参与的复杂的、综合作用导致的结果。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤骨病 神经元特异性烯醇化酶 细胞核因子κB受体激活蛋白配体 护骨蛋白 巨噬细胞炎性蛋白-1Α
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实时定量荧光PCR检测白血病融合基因 被引量：2
6
作者 李晓进 喻镁佳 +5 位作者 梁洋 何迪 李斌 胡杰 陈琪 李惠民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期969-973,共5页
本研究旨在建立实时定量荧光PCR的方法并检测CML、ALL、APL患者中融合基因的拷贝数,观察患者体内融合基因转录水平的变化。构建质粒标准品,制作标准曲线。检测49例患者的骨髓及外周血标本130份,对个别患者连续监测融合基因转录表达水平... 本研究旨在建立实时定量荧光PCR的方法并检测CML、ALL、APL患者中融合基因的拷贝数,观察患者体内融合基因转录水平的变化。构建质粒标准品,制作标准曲线。检测49例患者的骨髓及外周血标本130份,对个别患者连续监测融合基因转录表达水平。结果表明:在82.4%(28/34)的CML患者中检测到BCR-ABLP210阳性(BCR-ABLP210/ABL比值为0.01～3.19),其中在1例CML急淋变患者检测到BCR-ABLP210和BCR-ABLP190双阳性;在66.7%(4/6)的ALL患者中检测到BCR-ABL阳性,其中2例BCR-ABLP210阳性,2例BCR-ABLP190阳性;在77.8%(7/9)的APL患者中检测到PML-RARa融合基因阳性(PML-RARa/ABL比值为0.0014～3.199),其中3例为长型,3例为短型,1例为变异型,检测结果为阴性的患者处于缓解期;连续监测患者融合基因转录表达水平与临床缓解和复发的变化情况相吻合。结论:实时定量荧光PCR技术成熟、操作简便,检测白血病融合基因结果准确稳定,对于临床明确诊断、具体分型、动态观测肿瘤负荷、选择治疗方案、评估治疗效果和预后都有较大价值,值得推广应用。 展开更多
关键词 白血病:融合基因 实时定量RT—PCR
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抗人肺鳞癌单克隆抗体的制备及其特性鉴定
7
作者 贾建桃 倪亚萍 +4 位作者 马海智 李小进 栗昭辉 马丽菊 王秦秦 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期282-284,共3页
目的:制备和鉴定抗人肺鳞癌单克隆抗体(mAb),为肺癌的早期诊断和靶向治疗提供候选抗体药物及为肺癌抗原的筛选提供工具。方法:用肺癌细胞株YTMLC-90做抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,间接ELISA和有限稀释法筛... 目的:制备和鉴定抗人肺鳞癌单克隆抗体(mAb),为肺癌的早期诊断和靶向治疗提供候选抗体药物及为肺癌抗原的筛选提供工具。方法:用肺癌细胞株YTMLC-90做抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,间接ELISA和有限稀释法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞获得mAb。染色体计数法鉴定杂交瘤细胞,并进行mAb同种型鉴定;对细胞培养上清液和腹水中的mAb采用间接ELISA法进行初步特异性检测及效价测定;采用Western blot法鉴定其与不同组织抗原结合活性;采用免疫组化染色法鉴定其在肺癌组织中的分布。结果:筛选出5株可稳定分泌抗肺鳞癌mAb的杂交瘤细胞株E2、F9、E11、D5和C6,分泌的抗体均为IgG1亚类,κ亚型。C6染色体数目为89～112条,细胞培养上清和腹水效价分别为1∶1 004和1∶104,ELSA和Western blot结果显示其能特异性与肺癌细胞结合,未见与其他高发癌组织和正常组织结合。结论:成功地制备了能够特异识别肺癌组织的mAb。 展开更多
关键词 肺癌 单克隆抗体 杂交瘤细胞
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三氧化二砷对淋巴瘤细胞株Raji细胞凋亡的影响及其与Mcl-1基因表达关系的研究 被引量：1
8
作者 李智慧 李惠民 +1 位作者 李斌 李晓进 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期597-601,共5页
本研究探讨不同浓度的三氧化二砷(As2O3)对人淋巴瘤细胞株Raji细胞凋亡诱导的作用特点及其机制,并探讨其与mcl-1基因表达的关系。应用琼脂糖凝胶电泳检测不同浓度As2O3作用于Raji细胞后的典型DNA-Ladder凋亡条带,激光共聚胶显微镜检测R... 本研究探讨不同浓度的三氧化二砷(As2O3)对人淋巴瘤细胞株Raji细胞凋亡诱导的作用特点及其机制,并探讨其与mcl-1基因表达的关系。应用琼脂糖凝胶电泳检测不同浓度As2O3作用于Raji细胞后的典型DNA-Ladder凋亡条带,激光共聚胶显微镜检测Raji细胞线粒体膜电位的变化,实时荧光定量PCR技术检测As2O3对mcl-1基因表达的影响。结果表明:1μmol/LAs2O3作用于Raji细胞时其凋亡不明显,2-8μmol/LAs2O3可以诱导Raji细胞凋亡。随着药物浓度的增加,Raji细胞线粒体的呼吸功能和跨膜电位明显减低,同时mcl-1基因表达量明显下调。结论:As2O3降低Raji细胞线粒体的呼吸功能和跨膜电位、下调mcl-1基因表达,而这些可能是导致细胞凋亡的机制。 展开更多
关键词 三氧化二砷 Raft细胞 凋亡 MCL-1基因
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三氧化二砷应用于淋巴瘤的基础及临床研究进展 被引量：2
9
作者 李凌浩 李惠民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期1335-1339,共5页
三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病取得成功后又被实验性用于淋巴瘤的治疗,近年来国内外学者在此方面做了大量研究工作,发现三氧化二砷通过多种途径发挥抗淋巴瘤效应,且很多物质能够增强或减弱这种效应,三氧化二砷治疗对其他化疗药物... 三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病取得成功后又被实验性用于淋巴瘤的治疗,近年来国内外学者在此方面做了大量研究工作,发现三氧化二砷通过多种途径发挥抗淋巴瘤效应,且很多物质能够增强或减弱这种效应,三氧化二砷治疗对其他化疗药物不敏感的复发及难治性淋巴瘤仍有一定效果且毒副作用小,提示三氧化二砷是一种极具潜力的治疗淋巴瘤的新型药物,现就相关基础及临床研究成果进行综述。 展开更多
关键词 淋巴瘤 三氧化二砷 基础研究 临床研究
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