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云南省G10P[11]基因型牛轮状病毒的分离鉴定及其遗传特征研究
1
作者
黄洁
朱沛
+7 位作者
李占鸿
王金萍
何于雯
喻建荣
徐心明
沙丽东
陈培富
姚俊
《中国畜牧兽医》
北大核心
2025年第10期4930-4940,共11页
【目的】A型牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)是引起新生犊牛严重肠炎的重要病原,试验旨在了解云南省规模化牛场BRV流行毒株的基因型及分子特征,为牛场病毒性腹泻防控提供理论依据。【方法】采用RT-PCR方法对云南某规模肉牛场7份西门...
【目的】A型牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)是引起新生犊牛严重肠炎的重要病原,试验旨在了解云南省规模化牛场BRV流行毒株的基因型及分子特征,为牛场病毒性腹泻防控提供理论依据。【方法】采用RT-PCR方法对云南某规模肉牛场7份西门塔尔犊牛腹泻粪便样品进行病原检测,取BRV核酸呈阳性的样品通过MA-104细胞系对病毒进行连续传代分离;利用间接免疫荧光试验(IFA)检测病毒增殖情况,绘制病毒生长曲线;进一步对分离毒株全基因组进行测序,利用在线比对软件进行基因组分型,利用Mega 7.0软件分别绘制VP4、VP7基因遗传进化树,使用GeneDoc软件分析氨基酸突变情况。【结果】7份腹泻样品检测均为BRV阳性,分离获得1株BRV毒株,命名为YNLL-2023,其基因型为G10-P[11]-I2-R2-C2-M2-A3-N2-T6-E2-H2。分离毒株感染MA-104细胞12 h出现明显的细胞病变效应(CPE)。RT-PCR扩增获得分离毒株VP 6基因约300 bp的特征性片段;IFA显示分离毒株感染MA-104细胞后胞浆内出现特异性绿色荧光,生长曲线显示病毒滴度从接毒后6~54 h持续上升,达到峰值10^(5.57) TCID_(50)/100μL。遗传进化分析表明,分离毒株VP4基因核苷酸序列与RVA/Yak-tc/CHN/HB-3/2021/G10P[11]株(登录号:ON711387.1)处于同一分支,VP7基因核苷酸序列与RVA/Bovine-wt/CHN/JS31/2020/G10株(登录号:PQ332932.1)和RVA/Bovine-wt/CHN/SD1/2023/G10株(登录号:PQ332943.1)处于同一分支。氨基酸序列分析显示,分离株VP4氨基酸序列与P[11]型羊源疫苗株在中和表位区域存在7个氨基酸位点突变,VP7氨基酸序列与G10型人-牛重组疫苗株在中和表位区域存在2个氨基酸位点突变。【结论】本试验通过MA-104细胞成功分离获得1株G10P[11]型BRV,该毒株与中国牛源多个毒株相似性较高,但与同基因型疫苗株的中和表位存在差异。
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关键词
牛轮状病毒(BRV)
基因型
生物学特性
遗传特征
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职称材料
2株云南源BVDV-1b亚型毒株的分离和鉴定
被引量：
1
2
作者
崔垚鑫
李聃
+6 位作者
谢佳芮
朱沛
徐心明
岩锐
陈其云
李文贵
姚俊
《中国兽医杂志》
北大核心
2025年第2期40-46,共7页
为探明云南省牛病毒性腹泻黏膜病(BVD-MD)的发生、流行态势及其流行毒株的生物学特征,本试验于2022年12月—2023年11月从云南省10个州市规模化养牛场随机采集667份牛粪便样品,进行牛病毒性腹泻病毒(BVDV)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检...
为探明云南省牛病毒性腹泻黏膜病(BVD-MD)的发生、流行态势及其流行毒株的生物学特征,本试验于2022年12月—2023年11月从云南省10个州市规模化养牛场随机采集667份牛粪便样品,进行牛病毒性腹泻病毒(BVDV)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测,针对阳性样品选用牛肾细胞(MDBK)进行毒株的分离和鉴定,结合间接免疫荧光试验(IFA)观察病毒增殖情况,并使用Reed-Muench法计算病毒滴度;阳性样品经全基因组测序后,分别对全基因组和5′非翻译区(5′-UTR)序列进行系统发育分析。结果显示,经RT-PCR和MDBK细胞分离鉴定获得2株BVDV,分别命名为BVDV YN.1(GenBank登录号:PP488512.1)和BVDV YN.2(GenBank登录号:PP770551.1),病毒滴度分别为105.81和104.93 TCID50/mL。系统发育分析结果显示,2株BVDV分离株与美国分离的BVDV-1b亚型参考毒株HP-KY-RK13(GenBank登录号:KT355592.1)的核苷酸相似度分别为99.6%和99.5%,与日本分离的BVDV-1b亚型参考毒株END(GenBank登录号:JX419397.1)的核苷酸相似度均为99.7%,且处于同一进化分支(BVDV-1b亚型)。本试验可为云南省BVDV流行病学调查及对其防控提供理论参考依据。
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关键词
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)
BVDV-1b亚型
云南
分离和鉴定
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职称材料
题名
云南省G10P[11]基因型牛轮状病毒的分离鉴定及其遗传特征研究
1
作者
黄洁
朱沛
李占鸿
王金萍
何于雯
喻建荣
徐心明
沙丽东
陈培富
姚俊
机构
云南
农业大学
动物
医学院
云南省
畜牧兽医科学院
云南省
农业职业技术学院
云南省楚雄州禄丰市动物疫病预防控制中心
昆明
市
富民县
动物
疫病
预防控制中心
出处
《中国畜牧兽医》
北大核心
2025年第10期4930-4940,共11页
基金
云南省科技厅乡村振兴科技专项(202304BI090003)
云南省科技厅重点研发计划(202303AK140031)
+1 种基金
云南益民养殖示范基地有限公司姚俊专家基层科研工作站
澜沧重牧农业科技有限公司姚俊专家基层科研工作站。
文摘
【目的】A型牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)是引起新生犊牛严重肠炎的重要病原,试验旨在了解云南省规模化牛场BRV流行毒株的基因型及分子特征,为牛场病毒性腹泻防控提供理论依据。【方法】采用RT-PCR方法对云南某规模肉牛场7份西门塔尔犊牛腹泻粪便样品进行病原检测,取BRV核酸呈阳性的样品通过MA-104细胞系对病毒进行连续传代分离;利用间接免疫荧光试验(IFA)检测病毒增殖情况,绘制病毒生长曲线;进一步对分离毒株全基因组进行测序,利用在线比对软件进行基因组分型,利用Mega 7.0软件分别绘制VP4、VP7基因遗传进化树,使用GeneDoc软件分析氨基酸突变情况。【结果】7份腹泻样品检测均为BRV阳性,分离获得1株BRV毒株,命名为YNLL-2023,其基因型为G10-P[11]-I2-R2-C2-M2-A3-N2-T6-E2-H2。分离毒株感染MA-104细胞12 h出现明显的细胞病变效应(CPE)。RT-PCR扩增获得分离毒株VP 6基因约300 bp的特征性片段;IFA显示分离毒株感染MA-104细胞后胞浆内出现特异性绿色荧光,生长曲线显示病毒滴度从接毒后6~54 h持续上升,达到峰值10^(5.57) TCID_(50)/100μL。遗传进化分析表明,分离毒株VP4基因核苷酸序列与RVA/Yak-tc/CHN/HB-3/2021/G10P[11]株(登录号:ON711387.1)处于同一分支,VP7基因核苷酸序列与RVA/Bovine-wt/CHN/JS31/2020/G10株(登录号:PQ332932.1)和RVA/Bovine-wt/CHN/SD1/2023/G10株(登录号:PQ332943.1)处于同一分支。氨基酸序列分析显示,分离株VP4氨基酸序列与P[11]型羊源疫苗株在中和表位区域存在7个氨基酸位点突变,VP7氨基酸序列与G10型人-牛重组疫苗株在中和表位区域存在2个氨基酸位点突变。【结论】本试验通过MA-104细胞成功分离获得1株G10P[11]型BRV,该毒株与中国牛源多个毒株相似性较高,但与同基因型疫苗株的中和表位存在差异。
关键词
牛轮状病毒(BRV)
基因型
生物学特性
遗传特征
Keywords
Bovine rotavirus(BRV)
genotype G10P[11]
biological properties
genetic characteristics
分类号
S852.653 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
2株云南源BVDV-1b亚型毒株的分离和鉴定
被引量：
1
2
作者
崔垚鑫
李聃
谢佳芮
朱沛
徐心明
岩锐
陈其云
李文贵
姚俊
机构
云南
农业大学
动物
医学院
云南省
畜牧兽医科学院
云南省
热带亚热带
动物
病毒病重点实验室
云南省
大理
市
大理镇农业综合服务
中心
云南省楚雄州禄丰市动物疫病预防控制中心
云南省
普洱
市
孟连县
动物
疫病
预防控制中心
玉溪农业职业技术学院
动物
科技学院
出处
《中国兽医杂志》
北大核心
2025年第2期40-46,共7页
基金
云南省科技厅乡村振兴科技专项-科技特派团(202304BI090003)
云南省科技厅重点研发计划(202303AK140031)
+1 种基金
云南益民养殖示范基地有限公司姚俊专家基层科研工作站
澜沧重牧农业科技有限公司姚俊专家基层科研工作站。
文摘
为探明云南省牛病毒性腹泻黏膜病(BVD-MD)的发生、流行态势及其流行毒株的生物学特征,本试验于2022年12月—2023年11月从云南省10个州市规模化养牛场随机采集667份牛粪便样品,进行牛病毒性腹泻病毒(BVDV)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测,针对阳性样品选用牛肾细胞(MDBK)进行毒株的分离和鉴定,结合间接免疫荧光试验(IFA)观察病毒增殖情况,并使用Reed-Muench法计算病毒滴度;阳性样品经全基因组测序后,分别对全基因组和5′非翻译区(5′-UTR)序列进行系统发育分析。结果显示,经RT-PCR和MDBK细胞分离鉴定获得2株BVDV,分别命名为BVDV YN.1(GenBank登录号:PP488512.1)和BVDV YN.2(GenBank登录号:PP770551.1),病毒滴度分别为105.81和104.93 TCID50/mL。系统发育分析结果显示,2株BVDV分离株与美国分离的BVDV-1b亚型参考毒株HP-KY-RK13(GenBank登录号:KT355592.1)的核苷酸相似度分别为99.6%和99.5%,与日本分离的BVDV-1b亚型参考毒株END(GenBank登录号:JX419397.1)的核苷酸相似度均为99.7%,且处于同一进化分支(BVDV-1b亚型)。本试验可为云南省BVDV流行病学调查及对其防控提供理论参考依据。
关键词
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)
BVDV-1b亚型
云南
分离和鉴定
Keywords
bovine viral diarrhea virus(BVDV)
BVDV-1b subtype
Yunnan Province
isolation and identification
分类号
S885.3 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
云南省G10P[11]基因型牛轮状病毒的分离鉴定及其遗传特征研究
黄洁
朱沛
李占鸿
王金萍
何于雯
喻建荣
徐心明
沙丽东
陈培富
姚俊
《中国畜牧兽医》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
2株云南源BVDV-1b亚型毒株的分离和鉴定
崔垚鑫
李聃
谢佳芮
朱沛
徐心明
岩锐
陈其云
李文贵
姚俊
《中国兽医杂志》
北大核心
2025
1
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