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马铃薯病毒PVY,PVS和PLRV多重RT-PCR检测
被引量：
7
1
作者
黄丹
余琨
+2 位作者
陈建斌
蔡红
朱有勇
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期535-540,共6页
病毒是马铃薯生产过程中危害较大的一类病原,为快速检测出云南省马铃薯主要病毒种类,依据病毒外壳蛋白基因序列设计合成了马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)的特异性引物,从退火温度、最低检测浓度、热反应循...
病毒是马铃薯生产过程中危害较大的一类病原,为快速检测出云南省马铃薯主要病毒种类,依据病毒外壳蛋白基因序列设计合成了马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)的特异性引物,从退火温度、最低检测浓度、热反应循环条件、病毒间的模板及引物间的最佳组合浓度进行优化,建立了三重RT-PCR反应体系。结果表明:该优化体系可同步扩增出上述3种病毒,分别得到480 bp(PVY)、187 bp(PVS)、336 bp(PLRV)大小的扩增片段。优化的三重RT-PCR反应体系可快速、灵敏、简便的检测到单一或复合侵染的马铃薯病毒,有利于马铃薯病毒病的早期检测和防治,将为云南省马铃薯种苗脱毒、继代、田间植株的高产栽培等有重要实践作用。
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关键词
马铃薯
病毒
多重RT-PCR检测
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职称材料
莴苣丛枝植原体胶体金免疫层析试纸条的初步研制
2
作者
薛正
姚琪
+4 位作者
曾丛芳
施美辰
文建斌
蔡红
陈海如
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期671-675,共5页
采用柠檬酸三钠还原法制备25 nm粒径胶体金颗粒,在pH 8.5的条件下与21μg/m L兔抗莴苣丛枝植原体(Le WB)免疫膜蛋白(Imp)多克隆抗体形成稳定的胶体金蛋白复合物,将兔抗莴苣丛枝植原体免疫膜蛋白IgG与羊抗兔IgG分别点在硝酸纤维素膜上作...
采用柠檬酸三钠还原法制备25 nm粒径胶体金颗粒,在pH 8.5的条件下与21μg/m L兔抗莴苣丛枝植原体(Le WB)免疫膜蛋白(Imp)多克隆抗体形成稳定的胶体金蛋白复合物,将兔抗莴苣丛枝植原体免疫膜蛋白IgG与羊抗兔IgG分别点在硝酸纤维素膜上作为检测线(T)和质控线(C),组装成胶体金免疫层析试纸条。结果表明:该试纸条除可以检测莴苣丛枝植原体外,还能检测与其具有相同免疫膜蛋白特性且隶属16SrⅡ-A亚组的其他植原体株系,如菊苣丛枝植原体(Ch WB)、扁豆花变绿植原体(Le VP)、蕹菜丛枝植原体(WSWB)、银胶菊花变绿植原体(Pa VP)等。试纸条可特异检测16SrⅡ-A亚组植原体株系,对莴苣丛枝植原体阳性材料的检测灵敏度为稀释100倍。
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关键词
植原体
胶体金免疫层析
检测试纸条
16SrⅡ-A亚组
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职称材料
题名
马铃薯病毒PVY,PVS和PLRV多重RT-PCR检测
被引量：
7
1
作者
黄丹
余琨
陈建斌
蔡红
朱有勇
机构
云南
农业
大学植物病理重点实验室
云南省建水县农业技术推广所
出处
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期535-540,共6页
基金
云南省农业产业化专项项目(云财农[2013]364号)
文摘
病毒是马铃薯生产过程中危害较大的一类病原,为快速检测出云南省马铃薯主要病毒种类,依据病毒外壳蛋白基因序列设计合成了马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)的特异性引物,从退火温度、最低检测浓度、热反应循环条件、病毒间的模板及引物间的最佳组合浓度进行优化,建立了三重RT-PCR反应体系。结果表明:该优化体系可同步扩增出上述3种病毒,分别得到480 bp(PVY)、187 bp(PVS)、336 bp(PLRV)大小的扩增片段。优化的三重RT-PCR反应体系可快速、灵敏、简便的检测到单一或复合侵染的马铃薯病毒,有利于马铃薯病毒病的早期检测和防治,将为云南省马铃薯种苗脱毒、继代、田间植株的高产栽培等有重要实践作用。
关键词
马铃薯
病毒
多重RT-PCR检测
Keywords
potato
virus
multiplex RT-PCR detection
分类号
S435.32 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
莴苣丛枝植原体胶体金免疫层析试纸条的初步研制
2
作者
薛正
姚琪
曾丛芳
施美辰
文建斌
蔡红
陈海如
机构
云南
农业
大学植物病理重点实验室
云南省建水县农业技术推广所
出处
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期671-675,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31060239)
云南省科技创新人才计划项目(2011HB026)
云南省农业产业化专项项目(云财农[2013]364号)
文摘
采用柠檬酸三钠还原法制备25 nm粒径胶体金颗粒,在pH 8.5的条件下与21μg/m L兔抗莴苣丛枝植原体(Le WB)免疫膜蛋白(Imp)多克隆抗体形成稳定的胶体金蛋白复合物,将兔抗莴苣丛枝植原体免疫膜蛋白IgG与羊抗兔IgG分别点在硝酸纤维素膜上作为检测线(T)和质控线(C),组装成胶体金免疫层析试纸条。结果表明:该试纸条除可以检测莴苣丛枝植原体外,还能检测与其具有相同免疫膜蛋白特性且隶属16SrⅡ-A亚组的其他植原体株系,如菊苣丛枝植原体(Ch WB)、扁豆花变绿植原体(Le VP)、蕹菜丛枝植原体(WSWB)、银胶菊花变绿植原体(Pa VP)等。试纸条可特异检测16SrⅡ-A亚组植原体株系,对莴苣丛枝植原体阳性材料的检测灵敏度为稀释100倍。
关键词
植原体
胶体金免疫层析
检测试纸条
16SrⅡ-A亚组
Keywords
phytoplasma
gold immunochromatography
immunostrip
16SrⅡ-A
分类号
S436.36 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马铃薯病毒PVY,PVS和PLRV多重RT-PCR检测
黄丹
余琨
陈建斌
蔡红
朱有勇
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
莴苣丛枝植原体胶体金免疫层析试纸条的初步研制
薛正
姚琪
曾丛芳
施美辰
文建斌
蔡红
陈海如
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
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职称材料
已选择
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引证文献
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