德宏奶水牛FASN基因乳腺组织表达及生物信息学分析 被引量：1

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作者 庞双龙 徐维维 +5 位作者 徐正尧 王梦迪 赵洪晓 徐思慧 杨忠 李卫真 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2023年第5期779-785,共7页

【目的】研究德宏奶水牛乳腺组织FASN基因表达水平及水牛FASN蛋白的生物学特性。【方法】用乳成分分析仪测定乳脂率,并按照乳脂率将德宏奶水牛分为高(H)、中(M)、低(L)组;运用qPCR法测定乳腺组织FASN基因的表达水平,分析其与乳脂率的相... 【目的】研究德宏奶水牛乳腺组织FASN基因表达水平及水牛FASN蛋白的生物学特性。【方法】用乳成分分析仪测定乳脂率,并按照乳脂率将德宏奶水牛分为高(H)、中(M)、低(L)组;运用qPCR法测定乳腺组织FASN基因的表达水平,分析其与乳脂率的相关性;运用生物信息学方法分析水牛FASN蛋白的理化性质及结构特征。【结果】H组德宏奶水牛乳腺组织的FASN基因表达水平极显著高于L组和M组(P<0.01),M组极显著高于L组(P<0.01),其mRNA表达水平与乳脂率呈极显著正相关(P<0.01)。水牛FASN蛋白的分子式为C_(12188)H_(19327)N_(3363)O_(3631)S_(109),分子质量为274.56 ku,蛋白不稳定;在细胞内主要分布于细胞核;具有2个结构域,均与脂类合成代谢有关;二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主;进化树及同源性分析显示:水牛FASN蛋白与牦牛和家牛的亲缘关系较近,序列同源性较高;FASN主要与ACACB、ACACA和ACLY互作较为紧密。【结论】德宏奶水牛乳腺组织中FASN基因表达可能促进乳脂率提高。 展开更多

关键词 德宏奶水牛 FASN基因 乳脂率 基因表达量 生物信息学

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水牛乳和荷斯坦牛乳中五种常量元素含量的测定 被引量：17

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作者 张永云 杨忠 +6 位作者 李卫真 苗永旺 汤守锟 田建云 仇松寅 王强 朱仁英 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第6期72-76,共5页

对摩本杂水牛（摩拉水牛×德宏水牛）乳和荷斯坦牛乳中的5种常量元素进行测定。采用火焰光度法测定钾、钠含量,火焰原子吸收分光光度法（FAAS）测定钙、镁含量,磷钼酸比色法测定磷含量。结果表明,水牛乳中钾、钠含量极显著低于荷斯... 对摩本杂水牛（摩拉水牛×德宏水牛）乳和荷斯坦牛乳中的5种常量元素进行测定。采用火焰光度法测定钾、钠含量,火焰原子吸收分光光度法（FAAS）测定钙、镁含量,磷钼酸比色法测定磷含量。结果表明,水牛乳中钾、钠含量极显著低于荷斯坦牛乳（P〈0.01）,钙、磷含量极显著高于荷斯坦牛乳（P〈0.01）,两种牛乳中镁含量差异不显著（P〉0.05）。元素测定相对标准偏差（RSD）低于5%,平均加标回收率在95.05%～105.18%之间。 展开更多

关键词 水牛 荷斯坦奶牛 乳 矿物质

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水牛初乳和常乳主要组分的动态变化 被引量：5

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作者 李卫真 杨忠 +5 位作者 张永云 苗永旺 王绍卿 汤守锟 田建云 李洁玉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第8期209-212,共4页

试验旨在研究水牛初乳和常乳主要组分的动态变化规律。采用乳品分析仪对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中乳脂、乳糖、乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)等含量进行测定,用SDS-PAGE对乳蛋白各组分进行分离,并利用... 试验旨在研究水牛初乳和常乳主要组分的动态变化规律。采用乳品分析仪对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中乳脂、乳糖、乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)等含量进行测定,用SDS-PAGE对乳蛋白各组分进行分离,并利用凝胶成像系统进行扫描定量。结果表明,初乳中乳糖含量随泌乳天数的增加逐渐升高;乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)含量呈下降趋势;初乳中乳脂含量变化不规则,出现小幅波动;蛋白质各组分中乳铁蛋白(LF)、血清白蛋白(SA)、免疫球蛋白(Igs)含量第1天最高,以后开始下降;酪蛋白(CN)在乳蛋白百分比含量中占优势,随着泌乳天数的增加逐渐升高;β-乳球蛋白(β-LG)第1天含量低,第5和7天达到最高值;α-乳白蛋白(α-LA)第1天最低,第2天急剧上升,以后变化平稳。常乳中大部分组分含量比较稳定,有时有波动,但各天数之间差异不显著。研究结果显示,水牛乳中大部分组分的含量在初乳中变化较大,初乳的营养价值高于常乳。 展开更多

关键词 水牛 初乳 常乳 组分

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水牛初乳和常乳中五种酶活性的动态变化 被引量：1

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作者 李卫真 张永云 +10 位作者 苗永旺 杨忠 汤守锟 田建云 王强 赵爽 范路军 张颖 王兴茂 徐绍宏 牛自兵 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第6期48-50,共3页

对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中AMS、γ-GT、NAGase、ALP以及LP的活性进行测定。结果表明,初乳中5种酶的活性大多显著或极显著高于常乳(P<0.05或P<0.01),而常乳之间差异均不显著(P>0.05)。初乳中AMS活性第1... 对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中AMS、γ-GT、NAGase、ALP以及LP的活性进行测定。结果表明,初乳中5种酶的活性大多显著或极显著高于常乳(P<0.05或P<0.01),而常乳之间差异均不显著(P>0.05)。初乳中AMS活性第1、2、3天差异不显著(P>0.05),第1、2天极显著高于第5、7天(P<0.01)。γ-GT活性第1天显著高于第7天(P<0.05),但与第2、3、5天相比差异不显著(P>0.05)。NAGase活性第1、2天极显著高于第3、5、7天(P<0.01)。ALP活性第1、2、3、5天之间差异不显著(P>0.05),但第1天极显著高于第7天(P<0.01)。LP活性第1、2天之间差异显著(P<0.05),且均极显著高于第3、5、7天(P<0.01)。 展开更多

关键词 水牛 初乳 常乳 酶活性

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德宏水牛乳和荷斯坦牛乳中上皮粘蛋白的遗传多态性

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作者 李卫真 张永云 +10 位作者 杨忠 汤守锟 田建云 王兴茂 徐绍宏 牛自兵 王强 李乖 李洁玉 朱仁英 苗永旺 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期730-733,共4页

本文采用SDS-PAGE对56头云南德宏水牛和47头中国荷斯坦牛的乳上皮粘蛋白MUC1进行了基因分型。结果表明:德宏水牛乳和荷斯坦牛乳中的MUC1均呈现多态性。德宏水牛乳中共发现3种分子量分别为208,185,168 kD的电泳谱带,命名为A,B和C等位基因... 本文采用SDS-PAGE对56头云南德宏水牛和47头中国荷斯坦牛的乳上皮粘蛋白MUC1进行了基因分型。结果表明:德宏水牛乳和荷斯坦牛乳中的MUC1均呈现多态性。德宏水牛乳中共发现3种分子量分别为208,185,168 kD的电泳谱带,命名为A,B和C等位基因;荷斯坦牛乳中共发现5种分子量分别为196,191,188,176,159 kD的电泳谱带,命名为D,E,F,G和H等位基因。德宏水牛乳MUC1基因座A,B,C3个等位基因频率分别为0.223 2,0.330 4和0.446 4,群体期望杂合度为0.647 5;荷斯坦牛乳MUC1基因座D,E,F,G,H 5个等位基因频率分别为0.468 1,0.010 6,0.212 8,0.255 3和0.053 2,群体期望杂合度为0.674 7。结果揭示德宏水牛乳MUC1蛋白与荷斯坦牛乳MUC1蛋白遗传组成存在显著差异,该座位遗传多态性较丰富。 展开更多

关键词 水牛 荷斯坦牛 乳 上皮粘蛋白

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一步法RT-PCR同时检测CSFV和PRRSV方法的建立及应用 被引量：1

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作者 李圣 郑欢莉 +5 位作者 李红炳 孔令富 张晓敏 钏有科 孙永科 杨玉艾 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第6期40-44,共5页

猪瘟(CSF)和猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害云南养猪业的传染病,为了建立一种能快速诊断猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征混合感染的方法,根据NCBI上已发表的猪瘟病毒(CSFV)保守基因Erns和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)保守基因M基因的... 猪瘟(CSF)和猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害云南养猪业的传染病,为了建立一种能快速诊断猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征混合感染的方法,根据NCBI上已发表的猪瘟病毒(CSFV)保守基因Erns和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)保守基因M基因的核苷酸序列,利用Oligo 6.0设计了2对特异性引物,经过PCR反应条件优化后,建立了CSFV和PRRSV一步法RT-PCR的检测方法。对云南部分地区猪高热病病料检测的结果表明,本方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,为云南猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的快速检测提供了重要的技术支持。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 一步法RT-PCR

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德宏奶水牛乳腺组织CD36基因的表达研究 被引量：2

7

作者 王梦迪 唐娜 +3 位作者 俞大阔 张永云 杨忠 李卫真 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期264-268,共5页

【目的】研究不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织CD36基因的表达差异。【方法】选取同一养殖小区中饲养条件相同的健康德宏奶水牛216头,采集乳样,用乳成分分析仪测定乳脂率;以乳脂率(7.5±0.5)%为基准,将德宏奶水牛分为高、中、低乳脂率... 【目的】研究不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织CD36基因的表达差异。【方法】选取同一养殖小区中饲养条件相同的健康德宏奶水牛216头,采集乳样,用乳成分分析仪测定乳脂率;以乳脂率(7.5±0.5)%为基准,将德宏奶水牛分为高、中、低乳脂率组(分别为H、M、L组),每组选取胎次相同、年龄相近、处于泌乳中期的德宏奶水牛各3头,屠宰后采集乳腺组织,提取总RNA,利用实时荧光定量PCR技术检测CD36基因mRNA表达水平,并与乳脂率进行相关性分析。【结果】H组的CD36基因m RNA表达水平极显著高于M组和L组(P<0.01),M组极显著高于L组(P<0.01)。相关性分析表明:CD36基因表达量与乳脂率呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】CD36基因表达对德宏奶水牛乳质量可能具有促进作用。 展开更多

关键词 德宏奶水牛 乳腺组织 乳脂率 CD36基因

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不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织脂滴形成相关基因的表达研究 被引量：1

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作者 唐娜 江俊才 +4 位作者 王梦迪 茶学典 张永云 杨忠 李卫真 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第12期4545-4553,共9页

本研究旨在探索脂滴形成相关基因嗜乳脂蛋白(BTN1A1)、黄嘌呤脱氢酶(XDH)、围脂滴蛋白1(PLIN1)和PLIN2在不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织中的表达差异。试验选取同一养殖小区的健康德宏奶水牛216头,采集乳样,用乳品分析仪测定乳脂率。根... 本研究旨在探索脂滴形成相关基因嗜乳脂蛋白(BTN1A1)、黄嘌呤脱氢酶(XDH)、围脂滴蛋白1(PLIN1)和PLIN2在不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织中的表达差异。试验选取同一养殖小区的健康德宏奶水牛216头,采集乳样,用乳品分析仪测定乳脂率。根据乳脂率测定结果,分为低乳脂率组(L组,<7.0%)、中乳脂率组(M组,7.5%±0.5%)和高乳脂率组(H组,>8.0%),每组选取第2胎、年龄相近、处于泌乳中期的德宏奶水牛各3头,采集乳样,进行乳脂率测定;屠宰后采集乳腺组织,提取总RNA,利用实时荧光定量PCR技术检测脂滴形成相关基因的mRNA表达水平,并与乳脂率及脂肪酸含量进行相关性分析。试验结果显示,BTN1A1、XDH、PLIN1和PLIN2基因具有相同的表达趋势:H组>M组>L组;其中H组德宏奶水牛乳腺组织BTN1A1、XDH、PLIN1和PLIN2基因mRNA表达水平均极显著高于M组和L组(P<0.01);M组BTN1A1基因表达水平与L组差异不显著(P>0.05),但XDH、PLIN1和PLIN2基因mRNA表达水平均极显著高于L组(P<0.01)。相关性分析表明,BTN1A1、XDH、PLIN1和PLIN2基因表达水平均与乳脂率、总脂肪酸、长链脂肪酸及不饱和脂肪酸含量呈极显著正相关(P<0.01)。本研究结果表明,BTN1A1、XDH、PLIN1和PLIN2基因在乳腺组织的表达可能对德宏奶水牛的乳脂合成及分泌有显著促进作用,可为深入解析脂滴形成相关基因在泌乳过程中的调控机制提供参考。 展开更多

关键词 德宏奶水牛 乳腺组织 脂滴形成相关基因 基因表达

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猪精子发生候选基因PYGO2的分离、表达和亚细胞定位研究

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作者 赵筱 张霞 +5 位作者 范俐 杨忠 霍金龙 曾日彬 刘丽仙 霍海龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2491-2499,共9页

旨在分离猪PYGO2编码区序列,获悉该基因mRNA组织表达模式、蛋白质结构特征、细胞中的分布和定位,并构建蛋白相互作用网络。本研究首先利用RT-PCR从成年版纳微型猪近交系(BMI)睾丸组织中克隆PYGO2编码区序列;利用生物信息学解析其基因结... 旨在分离猪PYGO2编码区序列,获悉该基因mRNA组织表达模式、蛋白质结构特征、细胞中的分布和定位,并构建蛋白相互作用网络。本研究首先利用RT-PCR从成年版纳微型猪近交系(BMI)睾丸组织中克隆PYGO2编码区序列;利用生物信息学解析其基因结构并对蛋白质进行多种功能分析,比较多个哺乳动物PYGO2的氨基酸序列同源性,构建系统进化树和蛋白质相互作用网络;然后利用qPCR技术检测PYGO2在15个组织中的mRNA表达情况;最后通过构建pEGFP-C1-PYGO2融合表达载体,转染猪睾丸细胞(ST),确定PYGO2的亚细胞定位。结果表明,PYGO2基因CDS长1221 bp,编码406个氨基酸(基因和氨基酸号分别为KY644518和AVB77243.1),定位在猪4号染色体;PYGO2蛋白二级结构以无规则卷曲为主,N端和C端均疏水;氨基酸序列同源比对分析表明,猪PYGO2与其他哺乳动物的相似度均大于97%,在进化上高度保守;蛋白互作网络分析显示,猪PYGO2与9个蛋白可能存在相互作用,其中与BCL9蛋白作用最为紧密;qPCR表达分析表明,猪PYGO2在被检的15个组织中均有不同程度表达,在生殖腺中表达相对较高;ST细胞中的亚细胞定位结果表明,PYGO2 mRNA主要分布在细胞核。本研究获得了PYGO2基因的编码序列,蛋白质结构和定位,蛋白质相互作用网络,mRNA多组织表达特征,可为进一步解析该基因在猪精子生成中的分子机制提供参考。 展开更多

关键词 猪 PYGO2 生物信息学分析 蛋白互作网络 表达分析 亚细胞定位

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猪瘟和伪狂犬活疫苗几种免疫方式的免疫效果评价 被引量：11

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作者 林德锐 皇培刚 +1 位作者 罗文琼 常晗蕾 《中国动物保健》 2014年第5期22-25,共4页

为了评价猪瘟和伪狂犬活疫苗的免疫效果，采用猪瘟活疫苗（传代细胞源）和伪狂犬活疫苗（Bartha—K61株）对35—40日龄猪瘟和伪狂犬母源抗体阴性的健康仔猪分为4组，分别进行单独注射、分点同时注射与混合注射，观察各组注射后的副反应... 为了评价猪瘟和伪狂犬活疫苗的免疫效果，采用猪瘟活疫苗（传代细胞源）和伪狂犬活疫苗（Bartha—K61株）对35—40日龄猪瘟和伪狂犬母源抗体阴性的健康仔猪分为4组，分别进行单独注射、分点同时注射与混合注射，观察各组注射后的副反应，并对不同时期的抗体用ELISA试验检测血清抗体效价来评价其免疫效果。试验结果表明，两种疫苗同时分点注射和混合注射，相互间的干扰很小，两种疫苗同时注射不影响各自免疫抗体的产生，原因可能是两疫苗共同刺激动物的免疫器官后有提高动物产生免疫抗体的作用． 展开更多

关键词 猪瘟 伪狂犬 注射 免疫效果 疫苗

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猪肺炎支原体自家油乳苗免疫效果评价

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作者 张雄伟 杨贵树 +3 位作者 杨忠 赵灿奇 侬科智 高利波 《现代农业科技》 2011年第9期356-358,共3页

试验采用已经分离得到的猪肺炎支原体,经扩大繁殖后制成油乳剂灭活疫苗,并采用ELISA抗体检测方法进行疫苗免疫学效果评价。结果表明:自制疫苗2次采血抗体合格率100%(滴度达1∶16以上);进口疫苗2次采血抗体合格率为100%;而国产疫苗在抗... 试验采用已经分离得到的猪肺炎支原体,经扩大繁殖后制成油乳剂灭活疫苗,并采用ELISA抗体检测方法进行疫苗免疫学效果评价。结果表明:自制疫苗2次采血抗体合格率100%(滴度达1∶16以上);进口疫苗2次采血抗体合格率为100%;而国产疫苗在抗体滴度和维持时间上比较进口疫苗和自家苗差,第2次采血抗体合格率仅为20%。自制疫苗的免疫接种效果明显优于国产疫苗,与进口疫苗相当。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 疫苗 制备 免疫效果 评价

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分段补料法生产猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗(EO630株)的试验研究

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作者 肖华春 王成业 +5 位作者 陆有飞 张晓明 钟志敏 冯育宁 陈丽丽 李媛媚 《中国兽药杂志》 北大核心 2017年第7期10-14,共5页

为改进猪多杀性巴氏杆菌病(亦称猪肺疫)活疫苗抗原制备工艺,提高生产效率和产品质量,采用分段补料发酵工艺制备猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗(EO630株)抗原,培养12~13 h,EO630株的活菌数达到高峰期,最高活菌数可达1.31×1010CFU/m L。... 为改进猪多杀性巴氏杆菌病(亦称猪肺疫)活疫苗抗原制备工艺,提高生产效率和产品质量,采用分段补料发酵工艺制备猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗(EO630株)抗原,培养12~13 h,EO630株的活菌数达到高峰期,最高活菌数可达1.31×1010CFU/m L。按分段补料法共生产抗原5批,培养12 h后收获抗原,平均活菌数为1.17×1010CFU/m L,进行配苗和冻干疫苗5批,冻干后的平均存活率为69%。安全和效力检验均合格,达到预期效果。与传统方法相比,该方法培养的活菌数有大幅度的增长,优势明显。 展开更多

关键词 猪多杀性巴氏杆菌EO630株 传统发酵工艺 分段补料发酵工艺 活菌数 生长曲线 冻干存活率

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