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普洱茶多糖不同纯化组分的理化性质与体外抗氧化、抗肿瘤活性关系分析 被引量:1
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作者 吴以龙 税再坤 +3 位作者 王燕 刘振浩 王宣军 字成庭 《食品工业科技》 北大核心 2025年第12期20-29,共10页
为了探究普洱茶多糖(Pu-erh tea polysaccharides,PTPS)不同纯化组分的理化性质对体外抗氧化、抗肿瘤活性的影响,本研究以普洱生茶为原料,对PTPS进行分离和纯化,分析PTPS不同组分理化性质的变化规律,研究各组分的体外抗氧化活性和抗肿... 为了探究普洱茶多糖(Pu-erh tea polysaccharides,PTPS)不同纯化组分的理化性质对体外抗氧化、抗肿瘤活性的影响,本研究以普洱生茶为原料,对PTPS进行分离和纯化,分析PTPS不同组分理化性质的变化规律,研究各组分的体外抗氧化活性和抗肿瘤活性,并进一步通过相关性分析探究不同纯化组分理化性质变化与抗氧化、抗肿瘤活性变化的相关性。结果表明,纯化后得到的5个组分(PTPS 1~5)理化性质差异明显,随着洗脱液NaCl浓度的升高,PTPS 1~5的均一度和总糖含量表现出先升高后降低的规律性,而粒径和多分散性指数呈现出相反的规律,表现为先降低后升高;蛋白含量、糖醛酸含量和酯化程度表现出总体升高的趋势;平均分子量和Zeta电位无明显规律性。理化性质不同导致PTPS的体外抗氧化和抗肿瘤活性存在差异,Pearson相关性分析结果表明不同纯化组分的抗氧化活性与均一度、平均分子量、总糖含量、糖醛酸含量、酯化程度和多分散性指数值密切相关,而抗肿瘤活性主要与总糖含量、糖醛酸含量和酯化程度存在相关性。本研究结果可为PTPS在生物活性多糖和功能食品领域的应用提供理论支持。 展开更多
关键词 普洱茶多糖 纯化 理化性质 抗氧化 抗肿瘤
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芦笋皂苷合成相关糖基转移酶基因克隆及原核表达分析 被引量:2
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作者 钟匀 林春 +3 位作者 刘正杰 董陈文华 毛自朝 李兴玉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期255-263,共9页
【目的】克隆芦笋(Asparagus officinalis)甾醇糖基转移酶基因AoSGT1,分析其潜在催化活性,为解析芦笋皂苷合成途径及代谢调控机制提供科学依据。【方法】基于芦笋转录组数据设计特异性引物,扩增AoSGT1基因的完整开放阅读框(open reading... 【目的】克隆芦笋(Asparagus officinalis)甾醇糖基转移酶基因AoSGT1,分析其潜在催化活性,为解析芦笋皂苷合成途径及代谢调控机制提供科学依据。【方法】基于芦笋转录组数据设计特异性引物,扩增AoSGT1基因的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),经测序验证获得目标基因序列并进行生物信息学分析;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RTqPCR)测定各组织基因表达量;构建pGEX-4T-3-AoSGT1原核表达载体,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(De3),随后诱导实现重组蛋白表达。【结果】AoSGT1长1800 bp,编码599个氨基酸,其相对分子质量为66.72 kD,属于亲水性蛋白,无跨膜域和信号肽。系统发育结果表明,AoSGT1与盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis)Dz3GT_(2)有较高同源性,同属UGT80B1亚家族。多序列比对揭示了该蛋白序列包含甾醇糖基转移酶保守结构域PSBD Box和PSPG Box,预示其具有对甾体化合物3β-OH位点潜在糖基化活性。RT-qPCR结果显示,AoSGT1在芦笋根中高表达,而在茎和花中低表达。此外,SDS-PAGE结果表明,目标蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达,其大小与预测值相符。【结论】成功克隆AoSGT1基因,并确认其在芦笋中呈现组织特异性表达,推测其可能参与芦笋甾体皂苷生物合成。同时,成功在大肠杆菌中实现了目标蛋白的异源表达。 展开更多
关键词 芦笋 甾体皂苷 甾醇糖基转移酶 基因克隆 生物信息学分析 RT-QPCR 原核表达 转录组
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