期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
1
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
乳腺癌耐药蛋白(BCRP)高表达耐药细胞系的建立及其耐药机制的初步研究
被引量：
1
1
作者
张会来
孙燕
+2 位作者
宋拯
刘贤明
王华庆
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第13期768-771,776,共5页
目的:建立稳定表达乳腺癌耐药蛋白(Breast cancer resistance protein,BCRP)的小鼠成纤维细胞系PA317/BCRP,初步探讨其耐药机制。方法:从乳腺癌耐药细胞系MCF-7/ADR中克隆BCRP基因。将编码序列克隆导入真核表达载体pcDNA3.1,转化感受态E...
目的:建立稳定表达乳腺癌耐药蛋白(Breast cancer resistance protein,BCRP)的小鼠成纤维细胞系PA317/BCRP,初步探讨其耐药机制。方法:从乳腺癌耐药细胞系MCF-7/ADR中克隆BCRP基因。将编码序列克隆导入真核表达载体pcDNA3.1,转化感受态E.Coli DH5α,获得重组质粒pcDNA3.1/BCRP,酶切并测序鉴定。用电穿孔法将质粒转染PA317细胞,同时转染pcDNA3.1/EGFP。G418筛选阳性克隆。阳性转染细胞提取细胞总RNA,RT-PCR检测BCRP的mRNA表达,Western blot检测BCRP蛋白表达。MTT法检测耐药克隆PA317/BCRP细胞对米托蒽醌(Mitoxantrone,MTZ)耐药性,罗丹明123外排实验验证转染后细胞外排罗丹明123功能。Western blot检测PI3K-AKT信号转导通路下游靶点AKT表达变化。结果:构建质粒pcDNA3.1/BCRP,转染PA317细胞,G418筛选。RT-PCR和Western blot,均检测到细胞中BCRP基因转录及蛋白表达。与空质粒转染细胞、未转染细胞对照组相比,PA317/BCRP细胞对MTZ耐药性增强,且外排罗丹明123能力增强。检测PI3K-AKT途径下游靶点AKT蛋白磷酸化水平在PA317/BCRP细胞内明显增高。结论:1、成功获得稳定表达BCRP的PA317细胞系—PA317/BCRP,经MTF和罗丹明123外排实验证实,其耐药和外排功能增强。2、检测PA317/BCRP细胞PI3K-AKT途径下游靶点AKT的表达,观察到耐药细胞的AKT表达含量明显高于转染空质粒和未转染的PA317细胞。推测BCRP可能通过影响AKT表达上调发挥其耐药作用。
展开更多
关键词
乳腺癌耐药蛋白
转染
PA317细胞
耐药
信号转导
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
乳腺癌耐药蛋白(BCRP)高表达耐药细胞系的建立及其耐药机制的初步研究
被引量：
1
1
作者
张会来
孙燕
宋拯
刘贤明
王华庆
机构
乳腺癌防治教育部重点实验室天津市肿瘤防治重点实验室天津医科大学附属肿瘤医院淋巴瘤科
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第13期768-771,776,共5页
基金
国家自然科学基金资助(编号:30670802)~~
文摘
目的:建立稳定表达乳腺癌耐药蛋白(Breast cancer resistance protein,BCRP)的小鼠成纤维细胞系PA317/BCRP,初步探讨其耐药机制。方法:从乳腺癌耐药细胞系MCF-7/ADR中克隆BCRP基因。将编码序列克隆导入真核表达载体pcDNA3.1,转化感受态E.Coli DH5α,获得重组质粒pcDNA3.1/BCRP,酶切并测序鉴定。用电穿孔法将质粒转染PA317细胞,同时转染pcDNA3.1/EGFP。G418筛选阳性克隆。阳性转染细胞提取细胞总RNA,RT-PCR检测BCRP的mRNA表达,Western blot检测BCRP蛋白表达。MTT法检测耐药克隆PA317/BCRP细胞对米托蒽醌(Mitoxantrone,MTZ)耐药性,罗丹明123外排实验验证转染后细胞外排罗丹明123功能。Western blot检测PI3K-AKT信号转导通路下游靶点AKT表达变化。结果:构建质粒pcDNA3.1/BCRP,转染PA317细胞,G418筛选。RT-PCR和Western blot,均检测到细胞中BCRP基因转录及蛋白表达。与空质粒转染细胞、未转染细胞对照组相比,PA317/BCRP细胞对MTZ耐药性增强,且外排罗丹明123能力增强。检测PI3K-AKT途径下游靶点AKT蛋白磷酸化水平在PA317/BCRP细胞内明显增高。结论:1、成功获得稳定表达BCRP的PA317细胞系—PA317/BCRP,经MTF和罗丹明123外排实验证实,其耐药和外排功能增强。2、检测PA317/BCRP细胞PI3K-AKT途径下游靶点AKT的表达,观察到耐药细胞的AKT表达含量明显高于转染空质粒和未转染的PA317细胞。推测BCRP可能通过影响AKT表达上调发挥其耐药作用。
关键词
乳腺癌耐药蛋白
转染
PA317细胞
耐药
信号转导
Keywords
BCRP
Transfection
PA317 cell
Drug resistance
signal transduction
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
乳腺癌耐药蛋白(BCRP)高表达耐药细胞系的建立及其耐药机制的初步研究
张会来
孙燕
宋拯
刘贤明
王华庆
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
