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外源性1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA合成的影响
被引量：
2
1
作者
于欢
熊建军
+2 位作者
陈培良
周师洁
李卫东
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期423-427,共5页
目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3 H-TdR渗入法检测S1P进入...
目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3 H-TdR渗入法检测S1P进入细胞内和在细胞外对骨骼肌成肌细胞DNA的合成;进一步使用磷酸神经鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)活性抑制剂N,N-二甲基鞘氨醇(N,N-dimethyl sphingosine,DMS)和HACPT[2-(p-hydroxyanilino)-4-(p-chlorophenyl)thiazole],观察其对S1P促进DNA合成作用的影响。结果 S1P脂质体转入可明显促进骨骼肌成肌细胞DNA合成。100～1 000nmol/L剂量范围内S1P脂质体使细胞胸腺嘧啶核苷(3 H-TdR)的摄入量较对照组增加12.3%～50.7%(P<0.01),并与剂量呈正相关。该促进作用不会被SphK活性抑制剂DMS和HACPT所阻断。S1P直接加入培养液同样能促进细胞DNA合成(P<0.01),500和1 000nmol/L剂量组3 H-TdR的摄入量较对照组分别增加18.8%(P<0.05)和26.5%(P<0.05),增幅低于同剂量的S1P脂质体。该促进作用可被DMS和HACPT所阻断。结论外源性S1P可促进体外培养的大鼠骨骼肌成肌细胞增殖,其作用可能与细胞内SphK活性增加引起细胞内S1P生成增多。
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关键词
1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)
磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK)
骨骼肌成肌细胞
DNA合成
大鼠
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职称材料
地衣芽孢杆菌总蛋白双向电泳方法的建立和优化
被引量：
1
2
作者
江慎华
陈惠
+3 位作者
陈静
汪涛
姚中平
周英棠
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第15期170-173,179,共5页
探索建立有效的地衣芽孢杆菌蛋白质组双向电泳体系,为进一步揭示地衣芽孢杆菌促进氧化葡萄糖酸杆菌产酸的作用机制奠定基础。以地衣芽孢杆菌为材料,比较蛋白质制备超声破壁时间、新型细胞裂解液、pH梯度和不同上样量对地衣芽孢杆菌蛋白...
探索建立有效的地衣芽孢杆菌蛋白质组双向电泳体系,为进一步揭示地衣芽孢杆菌促进氧化葡萄糖酸杆菌产酸的作用机制奠定基础。以地衣芽孢杆菌为材料,比较蛋白质制备超声破壁时间、新型细胞裂解液、pH梯度和不同上样量对地衣芽孢杆菌蛋白双向电泳结果的影响。结果显示:采用15min超声破壁提取地衣芽孢杆菌总蛋白,选用新型蛋白质裂解,用长24cm、pH4～7的IPG胶条,在上样量为80μg进行等电聚焦,于60V15min、120V6h条件下进行SDS-PAGE垂直电泳,可以获得背景清晰、重复性好的双向电泳图谱。在探索出一种新型可行的新型细胞裂解液的同时,建立一套用于地衣芽孢杆菌蛋白质组分析的双向电泳方法。
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关键词
地衣芽孢杆菌
蛋白质组
双向电泳
新型细胞裂解液
条件优化
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职称材料
1-磷酸神经鞘氨醇对大鼠骨骼肌成肌细胞分化的影响
3
作者
于欢
郑美蓉
+2 位作者
余敬谋
陈培良
李卫东
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期6-10,共5页
【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化、形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。【方法】分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度S1P的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜...
【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化、形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。【方法】分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度S1P的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜和共焦显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法分别检测成肌细胞分化的早期特异性标志—肌球蛋白和生肌素表达的改变。使用磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK)活性抑制剂DMS和HACPT后观察S1P对骨骼肌成肌细胞的生肌素表达的作用。【结果】S1P能明显促进骨骼肌成肌细胞细胞形成肌小管,诱导2～3 d开始有肌管形成,之后肌管越来越多,到6～7 d达高峰;同对照组相比随S1P浓度增高,细胞核生肌素阳性率逐渐增高(P<0.01);SphK活性抑制剂抑制S1P促进骨骼肌成肌细胞生肌素阳性率的增高(P<0.01)。【结论】体外S1P可能通过提高SphK活性调节成肌细胞向成熟肌细胞分化。
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关键词
1-磷酸神经鞘氨醇
磷酸神经鞘氨醇激酶
骨骼肌成肌细胞
分化
肌管
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职称材料
题名
外源性1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA合成的影响
被引量：
2
1
作者
于欢
熊建军
陈培良
周师洁
李卫东
机构
九江学院江西省系统生物重点实验室
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期423-427,共5页
基金
国家青年科学基金项目(81000075)
江西省教育厅重点科研项目(GJJ11694)~~
文摘
目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3 H-TdR渗入法检测S1P进入细胞内和在细胞外对骨骼肌成肌细胞DNA的合成;进一步使用磷酸神经鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)活性抑制剂N,N-二甲基鞘氨醇(N,N-dimethyl sphingosine,DMS)和HACPT[2-(p-hydroxyanilino)-4-(p-chlorophenyl)thiazole],观察其对S1P促进DNA合成作用的影响。结果 S1P脂质体转入可明显促进骨骼肌成肌细胞DNA合成。100～1 000nmol/L剂量范围内S1P脂质体使细胞胸腺嘧啶核苷(3 H-TdR)的摄入量较对照组增加12.3%～50.7%(P<0.01),并与剂量呈正相关。该促进作用不会被SphK活性抑制剂DMS和HACPT所阻断。S1P直接加入培养液同样能促进细胞DNA合成(P<0.01),500和1 000nmol/L剂量组3 H-TdR的摄入量较对照组分别增加18.8%(P<0.05)和26.5%(P<0.05),增幅低于同剂量的S1P脂质体。该促进作用可被DMS和HACPT所阻断。结论外源性S1P可促进体外培养的大鼠骨骼肌成肌细胞增殖,其作用可能与细胞内SphK活性增加引起细胞内S1P生成增多。
关键词
1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)
磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK)
骨骼肌成肌细胞
DNA合成
大鼠
Keywords
sphingosine 1-phosphate （SIP）
SphK
skeletal myoblast cells
DNA synthesis
rat
分类号
Q253 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
地衣芽孢杆菌总蛋白双向电泳方法的建立和优化
被引量：
1
2
作者
江慎华
陈惠
陈静
汪涛
姚中平
周英棠
机构
九江
学院
生命科学
学院
九江学院江西省系统生物重点实验室
杭州益善
生物
技术有限公司
出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第15期170-173,179,共5页
基金
九江学院博士启动基金(8871009)
文摘
探索建立有效的地衣芽孢杆菌蛋白质组双向电泳体系,为进一步揭示地衣芽孢杆菌促进氧化葡萄糖酸杆菌产酸的作用机制奠定基础。以地衣芽孢杆菌为材料,比较蛋白质制备超声破壁时间、新型细胞裂解液、pH梯度和不同上样量对地衣芽孢杆菌蛋白双向电泳结果的影响。结果显示:采用15min超声破壁提取地衣芽孢杆菌总蛋白,选用新型蛋白质裂解,用长24cm、pH4～7的IPG胶条,在上样量为80μg进行等电聚焦,于60V15min、120V6h条件下进行SDS-PAGE垂直电泳,可以获得背景清晰、重复性好的双向电泳图谱。在探索出一种新型可行的新型细胞裂解液的同时,建立一套用于地衣芽孢杆菌蛋白质组分析的双向电泳方法。
关键词
地衣芽孢杆菌
蛋白质组
双向电泳
新型细胞裂解液
条件优化
Keywords
Bacillus lincheniformis
proteome
2,- DE
new lysis
optimization
分类号
TS262.4 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
1-磷酸神经鞘氨醇对大鼠骨骼肌成肌细胞分化的影响
3
作者
于欢
郑美蓉
余敬谋
陈培良
李卫东
机构
九江学院江西省系统生物重点实验室
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期6-10,共5页
基金
国家青年科学基金(81000075)
江西省教育厅重点科研项目GJJ11694)
文摘
【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化、形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。【方法】分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度S1P的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜和共焦显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法分别检测成肌细胞分化的早期特异性标志—肌球蛋白和生肌素表达的改变。使用磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK)活性抑制剂DMS和HACPT后观察S1P对骨骼肌成肌细胞的生肌素表达的作用。【结果】S1P能明显促进骨骼肌成肌细胞细胞形成肌小管,诱导2～3 d开始有肌管形成,之后肌管越来越多,到6～7 d达高峰;同对照组相比随S1P浓度增高,细胞核生肌素阳性率逐渐增高(P<0.01);SphK活性抑制剂抑制S1P促进骨骼肌成肌细胞生肌素阳性率的增高(P<0.01)。【结论】体外S1P可能通过提高SphK活性调节成肌细胞向成熟肌细胞分化。
关键词
1-磷酸神经鞘氨醇
磷酸神经鞘氨醇激酶
骨骼肌成肌细胞
分化
肌管
Keywords
S1P
SphK
skeletal myoblast cells
differentiation
myotube
分类号
Q254 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
外源性1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA合成的影响
于欢
熊建军
陈培良
周师洁
李卫东
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
地衣芽孢杆菌总蛋白双向电泳方法的建立和优化
江慎华
陈惠
陈静
汪涛
姚中平
周英棠
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
1-磷酸神经鞘氨醇对大鼠骨骼肌成肌细胞分化的影响
于欢
郑美蓉
余敬谋
陈培良
李卫东
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013
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