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转录因子RUNX2对IPO8基因启动子的调节作用
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作者 熊建军 龚帧 +3 位作者 周小鸥 王庭 刘建云 李卫东 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期585-588,共4页
目的研究转录因子RUNX2对IPO8基因启动子的调控作用。方法基于PCR技术,分别突变和剔除IPO8基因启动子片段P-732/+134上RUNX2结合位点(-497^-502 bp),改造后的启动子片段定向插入荧光素酶表达载体PGL-3 Basic。重组质粒分别转染Saos-2与H... 目的研究转录因子RUNX2对IPO8基因启动子的调控作用。方法基于PCR技术,分别突变和剔除IPO8基因启动子片段P-732/+134上RUNX2结合位点(-497^-502 bp),改造后的启动子片段定向插入荧光素酶表达载体PGL-3 Basic。重组质粒分别转染Saos-2与He La细胞,检测报告基因荧光素酶活性。应用染色质免疫共沉淀(Ch IP)证实RUNX2与IPO8启动子在Saos-2细胞内结合。慢病毒介导RUNX2在Saos-2细胞的靶向沉默,定量PCR检测相应组别中IPO8 m RNA的表达。结果成功突变和剔除IPO8启动子上RUNX2结合位点,破坏RUNX2结合位点导致IPO8启动子活性在Saos-2细胞中显著下降(P<0.05)。转录因子RUNX2在Saos-2细胞与IPO8启动子有效结合,下调RUNX2的表达导致IPO8转录水平下降(P<0.05)。结论转录因子RUNX2正性调控IPO8基因的转录。 展开更多
关键词 IPO8 RUNX2 启动子 荧光素酶
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