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血管黏附蛋白1在H22肿瘤荷瘤小鼠的表达与活性 被引量:3
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作者 李兴暖 汪涛 +3 位作者 何巍 周裔春 汪鑫 李卫东 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期805-807,共3页
血管黏附蛋白1(vasctllar adhesion protein-1,VAP-1)是一个相对分子质量(Mr)为170000~180000的二聚体糖蛋白,是一种新的内皮黏附分子,能够参与淋巴细胞黏附。同时,VAP-1还具有氨基脲敏感性胺氧化酶(semicarbazide-sensitive ... 血管黏附蛋白1(vasctllar adhesion protein-1,VAP-1)是一个相对分子质量(Mr)为170000~180000的二聚体糖蛋白,是一种新的内皮黏附分子,能够参与淋巴细胞黏附。同时,VAP-1还具有氨基脲敏感性胺氧化酶(semicarbazide-sensitive amine oxidase,SSAO)活性,能够催化多种内源性和外源性的伯胺类化合物氧化脱胺生成相应的醛类化合物、过氧化氢和氨。研究证实,VAP-1的酶活性对白细胞黏附功能起重要作用。VAP-1在肿瘤发生发展过程中的作用仍不是很清楚,部分研究表明VAP-1能够参与机体对肿瘤组织的免疫反应,与淋巴细胞的黏附和肿瘤组织淋巴细胞的浸润密切相关。 展开更多
关键词 血管黏附蛋白1 H22细胞 氨基脲敏感性胺氧化酶
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舒林酸对丙戊酸孤独症动物模型大鼠氧化应激变化的影响 被引量:1
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作者 张应花 杨彩玲 +3 位作者 崔卫刚 王中平 文小军 李瑞锡 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2161-2165,共5页
目的:探讨舒林酸对孤独症发生过程中氧化应激变化的影响。方法:利用丙戊酸(VPA)孤独症动物模型,检测经典Wnt信号通路特异性抑制剂舒林酸处理后经典Wnt信号通路及氧化应激标志物在孤独症模型大鼠前额叶皮质及海马脑区的表达变化。Western... 目的:探讨舒林酸对孤独症发生过程中氧化应激变化的影响。方法:利用丙戊酸(VPA)孤独症动物模型,检测经典Wnt信号通路特异性抑制剂舒林酸处理后经典Wnt信号通路及氧化应激标志物在孤独症模型大鼠前额叶皮质及海马脑区的表达变化。Western blotting法检测糖原合成激酶3β(GSK-3β)、β-catenin和4-羟基壬烯醛(4-HNE)表达,半定量RT-PCR法检测硫氧还蛋白(Trx)1和Trx2 mRNA表达。结果:与对照组相比,在前额叶皮质及海马脑区VPA组GSK-3β蛋白表达减少,Trx1和Trx mRNA表达减少,β-catenin与4-HNE的表达增加;而与VPA组相比,VPA与舒林酸同时处理组GSK-3β的表达显著增加,β-catenin和4-HNE的表达显著减少。结论:舒林酸减少了孤独症发生过程中氧化应激的产生,提示经典Wnt信号通路上调导致氧化应激产生,进而导致孤独症易感性增加。 展开更多
关键词 孤独症 WNT/Β-CATENIN通路 丙戊酸 舒林酸 氧化应激
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丙戊酸孤独症大鼠脑中经典Wnt信号通路的变化 被引量:1
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作者 张应花 邓晓慧 +3 位作者 王中平 崔卫刚 文小军 李瑞锡 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1394-1399,共6页
目的:探讨经典Wnt信号通路在孤独症发病中的作用。方法:利用丙戊酸孤独症大鼠模型,检测经典Wnt信号通路信号分子在孤独症大鼠前额叶皮质及海马脑区的表达。Western blotting法检测糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3... 目的:探讨经典Wnt信号通路在孤独症发病中的作用。方法:利用丙戊酸孤独症大鼠模型,检测经典Wnt信号通路信号分子在孤独症大鼠前额叶皮质及海马脑区的表达。Western blotting法检测糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)、磷酸化GSK-3β、β-catenin和磷酸化β-catenin表达,半定量RT-PCR法检测GSK-3β、β-catenin、c-Myc和cyclin D1 mRNA表达。结果:与对照组相比,在丙戊酸孤独症大鼠前额叶皮质及海马脑区,失活的GSK-3β磷酸化表达显著增加,抑制性的β-catenin磷酸化表达显著减少;GSK-3βmRNA表达减少,β-catenin mRNA表达增加,下游c-Myc和cyclin D1 mRNA表达增加。结论:前额叶皮质及海马中经典Wnt信号通路活性增加可能促进了机体对孤独症的易感性。 展开更多
关键词 孤独症 WNT信号通路 丙戊酸
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HLA-DR1二聚体的构建及其在昆虫细胞中的表达和纯化
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作者 宋银宏 刘燕 +4 位作者 牛力 翁秀芳 孙伟 于倩 吴雄文 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期305-310,共6页
目的构建HLA-DR1(由DRA和DRB1*01基因编码)杆状病毒表达载体,并使其在昆虫细胞内得到表达。方法采用RT-PCR方法从721.221细胞中扩增DRα和DRβ的信号肽及胞外序列,运用重叠PCR将DRα和DRβ片段分别与Fos和Jun的亮氨酸拉链序列相连,成为D... 目的构建HLA-DR1(由DRA和DRB1*01基因编码)杆状病毒表达载体,并使其在昆虫细胞内得到表达。方法采用RT-PCR方法从721.221细胞中扩增DRα和DRβ的信号肽及胞外序列,运用重叠PCR将DRα和DRβ片段分别与Fos和Jun的亮氨酸拉链序列相连,成为DRα-Fos和DRβ-Jun,DRα和DRβ可凭借Fos和Jun的亮氨酸拉链结合形成DR1分子,再通过EcoRⅠ酶切位点将DRα-Fos和人IgG1的Fc段相连,形成DRα-Fos-Fc重组序列,2个同源的DR1分子可通过IgG1的Fc段的二硫键结合形成二聚体。分别将DRα-Fos-Fc及DRβ-Jun插入杆状病毒表达载体pFastBacTMDual的2个多克隆位点处,构建出重组载体pFastBacTMDual+[DR1/Fc]。对构建的载体进行PCR及限制性内切酶酶切鉴定和测序。采用脂质体转染方法将表达载体转入昆虫细胞系Sf9中,通过双抗夹心ELISA及Westernblot检测HLA-DR1的表达。结果 PCR及酶切鉴定和测序证实目的基因插入正确且序列与GenBank一致。ELISA和Westernblot检测表明DR1杆状病毒感染的Sf9细胞培养上清HLA-DR1表达呈阳性,且表达的HLA-DR1分子具有正确的构象。结论成功构建出杆状病毒表达载体pFastBacTMDual+[DR1/Fc],并在Sf9细胞中得到表达,为研究HLA-DR1限制性的T细胞应答奠定了基础。 展开更多
关键词 HLA-DR1 二聚体 杆状病毒载体 昆虫细胞 基因表达
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