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利用在线加压溶剂提取-超高效液相色谱-离子肼-飞行时间-质谱法直接分析中药草苁蓉的化学成分组 被引量:7
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作者 李婷 许霞 +4 位作者 常安琪 刘文静 宋青青 宋月林 屠鹏飞 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期554-563,共10页
构建了在线加压溶剂提取-超高效液相色谱-离子肼-飞行时间质谱(online PLE-UHPLC-IT-TOF-MS)系统,并将其应用于草苁蓉化学组的快速、直接分析。将微量草苁蓉粉末(0.5 mg)置于空预柱芯中,空隙用正相硅胶填充,作为提取池;提取池置于预柱套... 构建了在线加压溶剂提取-超高效液相色谱-离子肼-飞行时间质谱(online PLE-UHPLC-IT-TOF-MS)系统,并将其应用于草苁蓉化学组的快速、直接分析。将微量草苁蓉粉末(0.5 mg)置于空预柱芯中,空隙用正相硅胶填充,作为提取池;提取池置于预柱套内,将其放入柱温箱(70℃),预柱套通过金属管线连接至UHPLC-IT-TOF-MS系统。通过引入一个二位六通阀将整个分析过程分为提取和洗脱两个阶段。以0.1%(v/v)甲酸水为溶剂,提取3 min。在洗脱阶段,以0.1%(v/v)甲酸水-0.1%(v/v)甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱,将色谱柱前端所富集的提取物洗脱至IT-TOF-MS中进行检测。从草苁蓉中检测到48个化合物,结合对照品、文献、数据库以及质谱裂解规律,初步鉴定了其中的45个,包括10个苯乙醇苷类、14个环烯醚萜苷类以及21个苯丙醇苷类化合物。该研究为草苁蓉化学成分组成的阐明以及质量评价提供了可靠信息。同时,构建的online PLE-UHPLC-IT-TOF-MS系统为中药化学成分的快速、直接表征提供了有效方案。 展开更多
关键词 在线加压溶剂提取 草苁蓉 化学成分组 质谱裂解规律 苯丙醇苷
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芫花水提取物对斑马鱼成鱼及SD大鼠肝毒性的相似性评价及作用机制初探 被引量:10
2
作者 韩沁 邹迪新 +4 位作者 李二文 李芝奇 徐玥 赵崇军 林瑞超 《世界中医药》 CAS 2020年第13期1872-1878,共7页
目的:比较芫花水提取物对斑马鱼成鱼及SD大鼠肝毒性作用的相似性,并初步探讨芫花肝毒性作用机制。方法:选取斑马鱼成鱼320条,分为32组,每组10条(雌:雄=1:1),设置高、中、低剂量组和空白对照组,暴露处理96 h。SD大鼠24只,分为4组,每组6只... 目的:比较芫花水提取物对斑马鱼成鱼及SD大鼠肝毒性作用的相似性,并初步探讨芫花肝毒性作用机制。方法:选取斑马鱼成鱼320条,分为32组,每组10条(雌:雄=1:1),设置高、中、低剂量组和空白对照组,暴露处理96 h。SD大鼠24只,分为4组,每组6只,设置高、中、低剂量组和空白对照组,按照2.5 mL/200 g体质量每日灌胃给药1次,连续7 d。在实验终点,将斑马鱼成鱼和大鼠处死并获取肝脏组织。通过病理组织切片观察其肝脏形态,以SOD、SDH、MDA、NOX、TG、ALT和AST等生化指标为毒性评价指标。在此基础上通过实时荧光定量PCR测定斑马鱼成鱼肝脏相关基因的表达情况。结果:病理组织切片显示,芫花处理能够引起斑马鱼成鱼肝脏细胞变形、空泡,甚至凋亡,同时,芫花能够引起大鼠肝脏细胞排列松散、空泡、形态皱缩、界限不清晰,细胞核形态成不规则状并伴有出血现象.生化测定结果表明,芫花处理组斑马鱼成鱼肝脏中SOD、SDH及NADH的酶活力均显著降低(P<0.05),而MDA含量上升(P<0.01);给药组大鼠肝脏中SOD、SDH的活力均显著下降(P<0.05),而MDA、TG含量升高(P<0.01),此外,低剂量给药组大鼠ALT活力显著性升高(P<0.05),所有给药组中AST活力均有所升高(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,斑马鱼肝脏组织中线粒体功能相关基因mtatp6,mtco1,mtnd1,pklr表达水平下调(P<0.01),氧化应激相关基因gstp2,nqo1,sod1的mRNA表达水平下调(P<0.01),内质网应激相关基因包括atf4a,ern1,hsp90b1的mRNA表达水平上调(P<0.01),自噬相关基因beclin-1和ATG3表达水平下调(P<0.01)。结论:芫花水提取物对斑马鱼成鱼及SD大鼠肝脏均产生毒性作用,其作用机制可能为芫花能够诱导斑马鱼肝脏组织中出现氧化应激损伤、线粒体功能障碍、内质网应激和细胞自噬,进而诱导肝脏细胞凋亡实现的。 展开更多
关键词 芫花 水提取物 斑马鱼 大鼠 肝毒性 基因表达
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玄参净制去芦的必要性研究
3
作者 程水清 叶先文 +8 位作者 徐新房 文佳 潘美芳 高欣宇 王旭星 任洪民 李千 张海霞 李向日 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第14期2055-2061,2071,共8页
目的:探究去除玄参芦头对净制玄参药材是否具有必要性。方法:通过对比不同批次玄参药材根和芦头净制后得率、含水量以及浸出物,采用高效液相色谱法比较哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、麦角甾苷、肉桂酸5个主要活性成分含量,并采用苯酚-... 目的:探究去除玄参芦头对净制玄参药材是否具有必要性。方法:通过对比不同批次玄参药材根和芦头净制后得率、含水量以及浸出物,采用高效液相色谱法比较哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、麦角甾苷、肉桂酸5个主要活性成分含量,并采用苯酚-硫酸法测定玄参多糖,且对上述成分进行主成分分析(PCA),采用脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞(BV-2细胞)建立炎症模型,通过测定细胞上清液中一氧化氮(NO)的释放量,考察玄参根和芦头的抗炎活性,综合评价去除芦头的必要性。结果:玄参中芦头占药材重量的10%~20%,玄参根中浸出物高于芦头;PCA结果显示将玄参根和芦头区分为2大类,哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸以及多糖类活性成分以玄参根中含量高,但芦头中也有较大的贡献,而玄参芦头以安格洛苷C、麦角甾苷含量较多;玄参根和芦头的抗炎活性比较,差异无统计学意义。结论:按照传统习惯,玄参净制去芦具有一定的科学道理,但玄参芦头具有一定的药用价值,在提取物制备等方面进一步挖掘利用。 展开更多
关键词 玄参 玄参芦头 净制 多组分同时测定 多糖 主成分分析 BV-2细胞 抗炎活性
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基于斑马鱼模型探究多花黄精多糖的免疫调节作用 被引量:9
4
作者 张雪 赵苑伶 +5 位作者 陈林珍 刘妍 刘静 赵崇军 刘永刚 马志强 《世界中医药》 CAS 2023年第6期761-765,772,共6页
目的:探讨多花黄精多糖(Polygonatum Cyrtonema Hua Polysaccharides,PCP)及PCP-1对氯霉素所致免疫损伤的保护作用。方法:采用水提醇沉法得到黄精粗多糖,除蛋白脱色素后,得到PCP。利用DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱和HW-55F凝胶柱先后... 目的:探讨多花黄精多糖(Polygonatum Cyrtonema Hua Polysaccharides,PCP)及PCP-1对氯霉素所致免疫损伤的保护作用。方法:采用水提醇沉法得到黄精粗多糖,除蛋白脱色素后,得到PCP。利用DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱和HW-55F凝胶柱先后对PCP进行洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,冷冻干燥后得到纯化的PCP-1。以受精后2 d(2 dpf)的转基因斑马鱼为实验动物,采用不同浓度的氯霉素处理,通过比较斑马鱼尾部中性粒细胞的数目,确定氯霉素的最优造模剂量,建立斑马鱼免疫抑制模型。分别加入不同浓度的PCP和PCP-1孵育24 h后,拍照统计斑马鱼泄殖腔至尾部中性粒细胞数目,观察PCP和PCP-1的免疫调节作用。结果:PCP-1为均一多糖,分子量为3 350 Da。与溶剂对照组比较,氯霉素组的中性粒细胞数目显著减少(P<0.01);与氯霉素组比较,在实验剂量范围内,PCP和PCP-1均可以增加斑马鱼体内中性粒细胞的数目(P<0.01),且量效关系明显。结论:PCP和PCP-1均具有一定的增强免疫活性及改善免疫损伤的作用。 展开更多
关键词 多花黄精 多糖 分离纯化 斑马鱼 免疫调节 中性粒细胞
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马钱子对斑马鱼胚胎发育的影响 被引量:3
5
作者 赵崇军 田敬欢 +7 位作者 倪媛媛 冯娅茹 代一航 王金凤 樊娇娇 杨冉 马志强 林瑞超 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第11期2773-2775,I0011,共4页
目的:探讨马钱子水提液对斑马鱼胚胎发育的影响,建立马钱子对斑马鱼胚胎的浓度-效应曲线,确认其LC50。方法:参照OECD推荐的方法,将受精后6 h(6 hpf)胚胎暴露在含有不同浓度马钱子的养殖水中,分别在24 hpf、48 hpf和72 hpf(96 hpf)阶段... 目的:探讨马钱子水提液对斑马鱼胚胎发育的影响,建立马钱子对斑马鱼胚胎的浓度-效应曲线,确认其LC50。方法:参照OECD推荐的方法,将受精后6 h(6 hpf)胚胎暴露在含有不同浓度马钱子的养殖水中,分别在24 hpf、48 hpf和72 hpf(96 hpf)阶段测定自主抽动次数,心率、孵化率、死亡率、畸变率等指标。结果:各暴露组24 hpf自主抽动次数、48 hpf心率以及孵化率与正常对照组都具有显著性统计学差异;48 hpf后出现脊柱弯曲、心包水肿、卵黄囊水肿,游泳异常的毒性症状;各给药组的畸形率都可达到100%;在72 hpf之后,随着浓度的升高胚胎的死亡率升高。结论:马钱子对斑马鱼胚胎发育有毒性作用。 展开更多
关键词 斑马鱼 马钱子 发育毒性
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基于斑马鱼模型探讨马钱子的抗血管生成活性 被引量:5
6
作者 倪媛媛 赵崇军 +6 位作者 冯娅茹 田敬欢 张文婷 夏青 樊娇娇 马志强 林瑞超 《世界科学技术-中医药现代化》 2016年第9期1534-1538,共5页
目的:以斑马鱼为模型,探讨马钱子的抗血管生成活性。方法:以Tg(kdrl:mCherry)斑马鱼和野生斑马鱼为模型,在安全浓度范围内,分别采用荧光显像和体内碱性磷酸酶定量检测的方法,以PTK787为阳性对照,考察马钱子水提取物对斑马鱼血管生成的... 目的:以斑马鱼为模型,探讨马钱子的抗血管生成活性。方法:以Tg(kdrl:mCherry)斑马鱼和野生斑马鱼为模型,在安全浓度范围内,分别采用荧光显像和体内碱性磷酸酶定量检测的方法,以PTK787为阳性对照,考察马钱子水提取物对斑马鱼血管生成的抑制作用。结果:与空白对照组比较,在一定的浓度范围内,低浓度的马钱子水提取物能抑制Tg(kdrl:mCherry)斑马鱼的节间血管生成,随着提取物浓度的增加抑制作用更加明显,抑制作用呈剂量依赖性。在碱性磷酸酶定量检测实验中,马钱子水提取物浓度为25μg·mL^(-1)时,血管生成抑制率为8.61%;浓度为100μg·mL^(-1)时,血管生成抑制率为26.16%;在一定的浓度范围内,马钱子处理组均表现出显著的抗血管生成活性(P<0.05),血管生成抑制率与马钱子水提取物浓度成线性关系。结论:马钱子水提取物可以有效的抑制斑马鱼血管生成,有明显的抗血管生成活性。 展开更多
关键词 马钱子 斑马鱼 抗血管生成 荧光显像 碱性磷酸酶定量
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基于多成分药物代谢的秦艽质控成分遴选研究 被引量:5
7
作者 杨文宁 韩星 +3 位作者 杨海洋 李雪岩 刘洋 林瑞超 《世界中医药》 CAS 2020年第13期1897-1902,1907,共7页
目的:基于中药多成分作用特点,探讨秦艽多成分在体内的代谢情况,遴选秦艽质控成分。方法:制备秦艽水提物,采用相应的实验操作手术,收集秦艽的肠代谢、肝代谢以及综合代谢样品,结合超高效液相色谱-四级杆/静电场高分辨质谱联用技术(UPLC-... 目的:基于中药多成分作用特点,探讨秦艽多成分在体内的代谢情况,遴选秦艽质控成分。方法:制备秦艽水提物,采用相应的实验操作手术,收集秦艽的肠代谢、肝代谢以及综合代谢样品,结合超高效液相色谱-四级杆/静电场高分辨质谱联用技术(UPLC-Q-Exactive MS),对秦艽水提物、肠代谢样品、肝代谢样品及综合代谢样品中的成分进行鉴别,遴选秦艽的质控成分。结果:秦艽水提物中共鉴定出33个化学成分,其中有12个成分在经肠代谢样品中可检测到,有9个成分在先经肠代谢后经肝代谢样品中可检测到,有11个成分在经灌胃给药后的综合代谢样品中检测到。结论:根据质谱数据分析结果,遴选出秦艽中9个可以以原型的形式进入血液循环的成分作为该药材的质控成分,包括马钱苷酸、secologanoside、6′-O-β-葡萄糖龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、异牡荆素、淫羊藿苷、齐墩果酸,作为秦艽的质控成分。 展开更多
关键词 秦艽 多成分药物代谢 质控成分 质量控制 超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-MS/MS)
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基于市售重楼饮片质量研究对重楼饮片标准的思考 被引量:8
8
作者 贾天颖 高岩 +7 位作者 王海丽 辛洁萍 白玉莹 王敏 韩婷 刘梦楠 李向日 林瑞超 《世界中医药》 CAS 2020年第13期1886-1890,共5页
目的:对重楼市售饮片进行基于性状鉴别、浸出物、含量测定等多方面分析,以期为重楼的质量评价和重楼饮片市场的良性发展提供数据支持。方法:建立了重楼饮片浸出物测定方法,采用热浸法测定其醇溶性浸出物,对重楼饮片炮制方法进行了研究,... 目的:对重楼市售饮片进行基于性状鉴别、浸出物、含量测定等多方面分析,以期为重楼的质量评价和重楼饮片市场的良性发展提供数据支持。方法:建立了重楼饮片浸出物测定方法,采用热浸法测定其醇溶性浸出物,对重楼饮片炮制方法进行了研究,测定了重楼饮片外观性状及重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量。结果:重楼饮片浸出物含量之间的差异性较大,云南产地浸出物的平均含量略小于四川产地浸出物含量;市售重楼饮片大部分为厚片,少数为段,均不符合《中华人民共和国药典》(2015年版)“重楼”炮制项“切薄片”的规定;重楼饮片皂苷含量差异较大,四川产地重楼饮片皂苷含量略大于云南产地,多数重楼饮片所含皂苷以重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅶ为主,少数样品重楼皂苷Ⅵ含量较高,可能存在掺伪现象。结论:为保证临床使用需求及药效,建议《中华人民共和国药典》修订饮片炮制项、含量测定项,并补充性状项。 展开更多
关键词 重楼饮片 质量研究 《中华人民共和国药典》 标准修订 炮制 含量测定 饮片性状
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铁皮石斛多糖的分离纯化及抗衰老活性研究 被引量:7
9
作者 赵苑伶 张雪 +5 位作者 陈林珍 刘妍 刘静 赵崇军 刘永刚 马志强 《世界中医药》 CAS 2022年第17期2410-2415,共6页
目的:分离纯化铁皮石斛多糖(DOP),得到纯化后的铁皮石斛多糖DOP-1,并以秀丽隐杆线虫为模式生物,研究DOP-1的抗衰老作用。方法:以铁皮石斛鲜品为原料,经提取、浓缩、乙醇沉淀和真空干燥后,得到铁皮石斛粗多糖,铁皮石斛粗多糖经DEAE-Sepha... 目的:分离纯化铁皮石斛多糖(DOP),得到纯化后的铁皮石斛多糖DOP-1,并以秀丽隐杆线虫为模式生物,研究DOP-1的抗衰老作用。方法:以铁皮石斛鲜品为原料,经提取、浓缩、乙醇沉淀和真空干燥后,得到铁皮石斛粗多糖,铁皮石斛粗多糖经DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱和HW-55F凝胶柱洗脱后获得纯品铁皮石斛多糖DOP-1,通过高效凝胶渗透色谱法测定其纯度及相对分子质量等参数,同时研究不同浓度DOP-1(100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL)对秀丽隐杆线虫寿命、生殖能力、抗高温损伤、氧化应激损能力及脂褐素的影响。结果:分离纯化后的DOP-1为均一性多糖,其相对分子质量为3.260×10^(5),不同浓度DOP-1均可以显著延长秀丽隐杆线虫的寿命(P<0.05或P<0.01),其中以200μg/mL DOP-1作用最为明显,与对照组比较,寿命延长了43.37%,DOP-1对高温损伤和氧化应激损伤有一定的抵御作用,能有效降低秀丽隐杆线虫体内脂褐素的积累,并对其生殖能力无明显影响。结论:分离纯化后的DOP-1为均一性多糖,并具有较显著的抗衰老作用,可对其结构与抗衰老活性之间关系的研究提供参考。 展开更多
关键词 铁皮石斛 多糖 分离纯化 秀丽隐杆线虫 寿命 抗氧化 抗衰老
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基于蛋白质组学技术测定全蝎中β-肌动蛋白的含量 被引量:6
10
作者 梁瑞强 孙姗姗 +3 位作者 曹进 康帅 林瑞超 邹迪新 《世界中医药》 CAS 2020年第13期1849-1856,共8页
目的:通过蛋白质组学技术手段找到适用于药材全蝎含量测定的目标蛋白质及其特征肽段,用该特征肽段形成定量方法。方法:全蝎粉碎后经PBS缓冲溶液超声提取并过滤后,得到药材的蛋白质提取溶液。上述溶液经胰蛋白酶酶解后通过高分辨质谱进... 目的:通过蛋白质组学技术手段找到适用于药材全蝎含量测定的目标蛋白质及其特征肽段,用该特征肽段形成定量方法。方法:全蝎粉碎后经PBS缓冲溶液超声提取并过滤后,得到药材的蛋白质提取溶液。上述溶液经胰蛋白酶酶解后通过高分辨质谱进行分析,确定待测的目标蛋白质(β-肌动蛋白)和与之对应的特征肽段(IIAPPER),并进行特征肽段及其同位素内标物(IIA*(13C3,15N)PPER)的合成。用得到特征肽段做对照品,同位素内标物做内标进行含量测定。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸溶液(V/V)-水和乙腈,梯度洗脱。质谱使用电喷雾离子源(ESI)正离子模式,采用多反应监测模式(MRM)进行信号采集。定量方法为内标法。结果:β-肌动蛋白的特征肽段在0.1~40 nmol/L浓度范围内线性良好,相关系数(r2)在0.999以上。方法检出限为0.04 mg/kg,定量限为0.13 mg/kg。加标回收率在87%~93%,重复性的RSD为5.2%,中间精密度的RSD为4.8%,供试品溶液在4 h内稳定。利用该方法对来自不同产地的37批次全蝎药材中的β-肌动蛋白进行含量测定,结果在4.66~100.26 mg/kg之间。结论:该方法灵敏度高,准确度较好和重复性较稳定,可以为全蝎药材药材的质量控制提供一种有效的手段。 展开更多
关键词 全蝎 超高效液相色谱串联质谱法 蛋白质组学 Β-肌动蛋白 含量测定 质量控制
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微波消解⁃电感耦合等离子体质谱法测冰黄肤乐软膏中的6种重金属的量 被引量:10
11
作者 赵霞 康帅 +6 位作者 梁瑞强 邹迪新 孟雪丹 顾念念 吴怡青 赵崇军 林瑞超 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期514-517,共4页
目的建立同时测定含硫制剂冰黄肤乐软膏中Cr、As、Cu、Cd、Pb、Hg 6种重金属元素的分析方法。方法采用微波消解⁃电感耦合等离子体质谱(ICP⁃MS)法,对样品进行前处理,采用内标法监测待测溶液的基体效应,补偿漂移值,采用外标法对重金属元... 目的建立同时测定含硫制剂冰黄肤乐软膏中Cr、As、Cu、Cd、Pb、Hg 6种重金属元素的分析方法。方法采用微波消解⁃电感耦合等离子体质谱(ICP⁃MS)法,对样品进行前处理,采用内标法监测待测溶液的基体效应,补偿漂移值,采用外标法对重金属元素的含量进行测定。结果6种元素在各自范围内线性关系良好(r≥0.9930),回收率符合痕量分析的要求。除Cr以外,其余5种重金属含量均未超标,符合《中国药典》标准。结论该方法操作简单,准确,灵敏度高,可用于含硫制剂软膏类6种重金属元素的含量检测。 展开更多
关键词 冰黄肤乐软膏 重金属 微波消解 ICP⁃MS
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包装对三七粉和熟三七粉稳定性的影响研究 被引量:5
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作者 刘梦楠 王敏 +5 位作者 白玉莹 徐文娟 李春帅 邹秦文 李向日 林瑞超 《世界中医药》 CAS 2020年第13期1891-1896,共6页
目的:通过考察不同包装下三七粉和熟三七粉外观性状、水分及有效成分含量等变化情况,确定包装对三七粉和熟三七粉稳定性的影响。方法:在恒温恒湿箱中对三七粉和熟三七粉进行加速试验,于0、1、2、3、6月对三七粉和熟三七粉外观性状及含... 目的:通过考察不同包装下三七粉和熟三七粉外观性状、水分及有效成分含量等变化情况,确定包装对三七粉和熟三七粉稳定性的影响。方法:在恒温恒湿箱中对三七粉和熟三七粉进行加速试验,于0、1、2、3、6月对三七粉和熟三七粉外观性状及含水量进行考察,同时以皂苷类成分的含量作为检测指标,利用本课题组前期建立的高效液相色谱法,对三七粉和熟三七粉中的皂苷类有效成分含量进行检测,并统计分析。结果:所有样品经6个月加速试验后观察未见霉变、虫蛀等现象,外观性状基本一致,水分含量增高但其含量仍符合《中华人民共和国药典》(2015版)规定(水分含量≤14%)。三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1含量的总和及熟三七粉中人参皂苷Rk1、Rh4含量的总和无显著减少。真空与非真空2种包装状态对饮片有效成分含量的影响较小,但对饮片的吸湿性有影响。结论:PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜是较理想的包材,能保证三七粉和熟三七粉质量的稳定,真空包装可以显著降低样品的吸湿程度。 展开更多
关键词 三七粉 熟三七粉 加速试验 有效成分 稳定性
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基于斑马鱼模型结合网络药理学探究重楼肝毒性机制 被引量:4
13
作者 李芝奇 陈美琳 +8 位作者 郭思敏 范琦琦 林子力 钟鑫悦 蔡琼 高睿涵 林瑞超 赵崇军 刘振权 《世界中医药》 CAS 2023年第6期739-747,755,共10页
目的:重楼在《中华人民共和国药典》中记载为小毒,但其毒性机制尚未阐明。随着人们对中药安全性问题的重视,重楼的临床使用安全性及其机制也待明确,本文旨在阐明重楼提取物的肝毒性机制。方法:通过斑马鱼模式生物进行急性毒性验证,采用4... 目的:重楼在《中华人民共和国药典》中记载为小毒,但其毒性机制尚未阐明。随着人们对中药安全性问题的重视,重楼的临床使用安全性及其机制也待明确,本文旨在阐明重楼提取物的肝毒性机制。方法:通过斑马鱼模式生物进行急性毒性验证,采用4 dpf斑马鱼暴露于重楼提取物中,24 h后吖啶橙染色,组织病理切片证明其肝脏毒性。通过网络药理学及分子对接技术预测重楼肝毒性靶点,并采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)验证网络预测靶点及通路。结果:实验结果表明,重楼提取物暴露处理4 dpf斑马鱼24 h,吖啶橙染色重楼水提物组及醇提物组在肝脏部分均会出现黄绿色荧光点,组织病理切片显示肝细胞排列紊乱松散,出现细胞凋亡、空泡等现象,表明重楼具有肝脏毒性。网络药理学结果预测重楼肝毒性可能与细胞增殖的肉瘤基因(Ras)信号通路,能量代谢和信号转导相关的磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、酪氨酸激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路相关,血管内皮生长因子A(VEGFA)、血小板衍生生长因子受体(PDGFRB)、鼠双微基因2(MDM2)、STAT3、雷帕霉素靶蛋白(MTOR)、原癌基因(MET)、B细胞淋巴瘤2样1(BCL2L1)、成纤维细胞生长因子2(FGF2)、白细胞介素-2(IL-2)及MAPK14可能是重楼造成肝毒性核心靶点,RT-PCR实验结果验证了以上推测。结论:重楼可能影响肝细胞增殖、能量代谢等通路的信号转导,从而引起肝毒性。 展开更多
关键词 重楼 肝毒性 斑马鱼 网络药理学 分子对接 RT-PCR验证 PI3K-AKT信号通路 Ras信号通路
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基于多成分药物代谢的枸杞子质控成分遴选研究 被引量:9
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作者 潘福璐 韩星 +4 位作者 冀艳华 江晓泉 森慕黎 刘洋 林瑞超 《世界中医药》 CAS 2020年第13期1865-1871,共7页
目的:基于多成分序贯代谢的研究策略,探讨枸杞子在体内的代谢成分,遴选枸杞子的质控成分。方法:制备枸杞子水提液后,运用在体双向肠灌流技术和灌胃采血技术收集其肠代谢、肝代谢及综合代谢样品,结合超高效液相色谱-四级杆/静电场高分辨... 目的:基于多成分序贯代谢的研究策略,探讨枸杞子在体内的代谢成分,遴选枸杞子的质控成分。方法:制备枸杞子水提液后,运用在体双向肠灌流技术和灌胃采血技术收集其肠代谢、肝代谢及综合代谢样品,结合超高效液相色谱-四级杆/静电场高分辨质谱联用技术(UPLC-Q-Exactive MS),对枸杞子水提物、肠代谢样品、肝代谢样品及综合代谢样品中的成分进行鉴别,遴选枸杞子的质控成分。结果:枸杞子提取物经LC-MS分析,共鉴定出36个化学成分。序贯代谢研究表明,枸杞子中有20个原形入血成分,其中有17个成分在经过肠代谢后可以检测到,16个成分在经过肝代谢后可以检测到,11个成分经过灌胃给药后,在腹主动脉血中可以检测到。结论:根据序贯代谢的研究结果,可以将这11个成分作为枸杞子药材的候选指标性成分,其分别为咖啡酸己糖偶联物、香豆酸己糖偶联物、N-caffeoyl,N′-dihydrocaffeoyl spermidine dihexose、绿原酸、N1,N10-bis(dihydrocaffeoyl)spermidine hexose、香豆素、槲皮素-O-芸香糖苷、阿魏酸、芦丁、N-乙酰色氨酸、水杨酸。 展开更多
关键词 枸杞子 序贯代谢 多成分药物代谢 质控成分 质量控制
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基于超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱质谱的胃复春片化学成分研究 被引量:16
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作者 周丹丹 邹秦文 林瑞超 《世界中医药》 CAS 2020年第13期1841-1848,共8页
目的:基于超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术对胃复春片的物质基础进行了全面的研究,对主要化学成分进行快速鉴定。方法:采用Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,3μm),以0.05%... 目的:基于超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术对胃复春片的物质基础进行了全面的研究,对主要化学成分进行快速鉴定。方法:采用Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,3μm),以0.05%甲酸水-乙腈为流动相的梯度洗脱进行分离。质谱采用正、负离子检测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描功能(Full MS/dd MS2)采集数据。通过化合物的最大紫外吸收波长、精确相对分子质量及二级碎片离子信息,与对照品的保留时间、mzVault 2.0质谱数据库及相关文献报道进行比对,鉴定胃复春片的主要化学成分。结果:共鉴定出164种化学成分,其中包括人参皂苷类42个、黄酮类97个、二萜类19个、其他6个。结论:UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术能够快速、准确、较全面地鉴定胃复春片中化学成分,为明确药效物质基础研究及提升质量标准提供了理论依据。 展开更多
关键词 胃复春片 化学成分 UPLC-Q-Orbitrap HRMS 人参皂苷 黄酮 二萜
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珍珠层粉氨基酸指纹图谱的构建及氨基酸含量测定的研究 被引量:10
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作者 乔艺涵 孟雪丹 +7 位作者 索亚然 刘雯雪 李二文 王昭懿 冯丹 柯尊洪 林瑞超 邹迪新 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第7期1353-1363,共11页
目的 建立中药珍珠层粉HPLC氨基酸指纹图谱,进行指纹图谱的模式识别研究,并测定珍珠层粉的氨基酸含量,为珍珠层粉质量评价提供依据;方法 采用Venusi1-AA氨基酸分析柱(4.6 mm×250 mm,5μm,柱号:AA952505-0),柱温:28℃,进样量。10μL... 目的 建立中药珍珠层粉HPLC氨基酸指纹图谱,进行指纹图谱的模式识别研究,并测定珍珠层粉的氨基酸含量,为珍珠层粉质量评价提供依据;方法 采用Venusi1-AA氨基酸分析柱(4.6 mm×250 mm,5μm,柱号:AA952505-0),柱温:28℃,进样量。10μL,波长:254 nm,流速:0.9 mL·min-1,以pH为6.5的醋酸钠水溶液为流动相A,以80%乙腈水溶液为流动相B。运用SAS和SPSS统计软件进行聚类分析和主成分分析,对珍珠层粉指纹图谱进行模式识别研究。结果 建立了珍珠层粉氨基酸指纹图谱,以及氨基酸指纹图谱的共有模式,检测出23个共有峰,并指认出其中15个共有峰相似度分析的结果与聚类分析和主成分分析保持一致,不同产地的珍珠层粉氨基酸成分差异不大,但不同基源的珍珠层粉氨基酸成分差异明显。本研究测定17个批次珍珠层粉中17种氨基酸(Asp天门冬氨酸、Glu谷氨酸、Ser丝氨酸、Gly甘氨酸、His组氨酸、Arg精氨酸、Thr苏氨酸、Ala丙氨酸、Pro脯氨酸、Tyr酪氨酸、Val缬氨酸、Met蛋氨酸、Cys胱氨酸、Ile异亮氨酸、Leu亮氨酸、Phe苯丙氨酸、Lys赖氨酸)的含量。结论 本研究建立的珍珠层粉氨基酸指纹图谱分析方法专属性强,及氨基酸含量测定方法简便易行、准确可靠,可对珍珠层粉的质量评价提供依据。 展开更多
关键词 珍珠层粉 氨基酸指纹图谱 氨基酸含量测定 聚类分析 主成分分析
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近红外判别结合COI序列基因分析鉴定地龙物种基源 被引量:5
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作者 吴怡青 赵崇军 +5 位作者 张文婷 赵霞 顾念念 孟雪丹 林瑞超 邹迪新 《世界中医药》 CAS 2020年第13期1879-1885,共7页
目的:建立地龙药材的真伪鉴别方法,为地龙药材优质用药提供新方法。方法:采用COI序列进行分子生物学层面的基因序列分析,近红外二级光谱判别建模分析进行光谱学层面的分析,两者共同鉴定地龙药材的真伪。结果:COI序列分析能够鉴别地龙种... 目的:建立地龙药材的真伪鉴别方法,为地龙药材优质用药提供新方法。方法:采用COI序列进行分子生物学层面的基因序列分析,近红外二级光谱判别建模分析进行光谱学层面的分析,两者共同鉴定地龙药材的真伪。结果:COI序列分析能够鉴别地龙种属,明确药材的基源,近红外建模分析结果与COI序列分析结果一致。结论:近红外判别与COI基因分析结合能够简便,全面的控制地龙药材真实性,明确药材基源。 展开更多
关键词 地龙 COI序列 近红外建模 真伪鉴别 物种基源
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复方马红散中羟基红花黄色素A与ZnO的含量测定方法研究 被引量:4
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作者 王昭懿 陈扬 +7 位作者 邹秦文 顾念念 赵霞 孟雪丹 冯丹 梁瑞强 林瑞超 高达欣 《世界中医药》 CAS 2020年第13期1903-1907,共5页
目的:针对复方马红散中具有抗炎、收湿止痒功效的两味中药红花和炉甘石,分别建立快速、高效、准确的高效液相色谱法及紫外-可见光分光光度法以测定其中羟基红花黄色素A和ZnO的含量,为复方马红散的质量控制提供保障、为其质量标准的建立... 目的:针对复方马红散中具有抗炎、收湿止痒功效的两味中药红花和炉甘石,分别建立快速、高效、准确的高效液相色谱法及紫外-可见光分光光度法以测定其中羟基红花黄色素A和ZnO的含量,为复方马红散的质量控制提供保障、为其质量标准的建立提供参考。方法:羟基红花黄色素A的含量测定采用Waters XSelect HSS T3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温设置为30℃,以乙腈-0.1%磷酸溶液(23∶77)为流动相等度洗脱,流速1.0 mL/min,进样量为20μL,在403 nm波长下检测。以锌试剂为显色剂,采用改良的紫外-可见光分光光度法在620 nm下测定ZnO的含量。结果:15批复方马红散样品中羟基红花黄色素A的含量范围为8.61~15.31 mg/g。15批复方马红散样品中ZnO的含量范围为82.67~149.40 mg/g。结论:本文基于2020版《中华人民共和国药典》和相关文献,对羟基红花黄色素A、ZnO的含量测定方法进行了一定的优化,经方法学考察,所建立的含量测定方法能快速、准确地测定复方马红散中羟基红花黄色素A、ZnO的含量,对其质量控制及质量标准的制定有一定的参考意义。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A ZNO 高效液相色谱法 紫外-可见光分光光度法 含量测定 复方马红散
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冰黄肤乐软膏中24种机元素含量测定及重金属限量标准的建立 被引量:4
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作者 赵霞 李芝奇 +6 位作者 徐玥 于梦圆 张文婷 王昭懿 李朝峰 林瑞超 赵崇军 《世界中医药》 CAS 2020年第13期1857-1864,共8页
目的:测定冰黄肤乐软膏中无机元素的含量,提出重金属元素的限量标准,为冰黄肤乐软膏的质量标准的完善和中医临床用药安全提供参考。方法:通过采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法对冰黄肤乐软膏的无机元素进行测定和分析。结果:建立了... 目的:测定冰黄肤乐软膏中无机元素的含量,提出重金属元素的限量标准,为冰黄肤乐软膏的质量标准的完善和中医临床用药安全提供参考。方法:通过采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法对冰黄肤乐软膏的无机元素进行测定和分析。结果:建立了冰黄肤乐软膏中24种无机元素的含量测定方法,精密度、稳定性、重复性、加样回收实验结果均符合药典相关规定。结论:建立的冰黄肤乐软膏无机元素检测方法可行,为冰黄肤乐软膏的质量标准的完善和临床用药安全提供参考。 展开更多
关键词 冰黄肤乐软膏 无机元素 重金属 含量测定 限量标准
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