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高通量筛选JAK-STAT6信号传导通路抑制剂方法的初步建立
被引量：
5
1
作者
笪宇蓉
姚智
+5 位作者
李静雅
邵洁
沈强
东莉洁
李佳
杨洁
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期943-947,共5页
目的构建可用于高通量筛选JAK/STAT6信号传导通路抑制剂的工程细胞株,建立稳定可靠的筛选方法。方法利用基因重组和转染技术,将STAT6特异性识别启动子IgE基因序列和虫荧光素酶报告基因联合插入pCMV质粒,脂质体法转染至HeLa细胞,经潮红霉...
目的构建可用于高通量筛选JAK/STAT6信号传导通路抑制剂的工程细胞株,建立稳定可靠的筛选方法。方法利用基因重组和转染技术,将STAT6特异性识别启动子IgE基因序列和虫荧光素酶报告基因联合插入pCMV质粒,脂质体法转染至HeLa细胞,经潮红霉素B抗性筛选及报告基因检测,得到稳定表达虫荧光素酶的工程细胞株。通过优化溶剂DMSO浓度,IL4作用浓度及孵育时间等筛选条件,建立了可靠的筛选方法,并在此基础上对1600种化合物进行了筛选。结果建立的筛选方法稳定可靠,系统Z′因子达到0.64。通过对1600种化合物的筛选,得到3个抑制效果较理想的化合物并测得其IC50值。结论所建立的高通量筛选方法可用于JAK/STAT6信号传导通路抑制剂的筛选。
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关键词
JAK/STAT6
高通量筛选
工程细胞株
抑制剂
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职称材料
题名
高通量筛选JAK-STAT6信号传导通路抑制剂方法的初步建立
被引量：
5
1
作者
笪宇蓉
姚智
李静雅
邵洁
沈强
东莉洁
李佳
杨洁
机构
天津医科大学免疫教研室
中科院上海药物所国家新药筛选中心
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期943-947,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No30300070)
国家教育部新世纪人才支持计划(NCET-04-0245)
+2 种基金
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(No20040062003)
天津市应用基础研究重点资助项目(No043802811)
天津医科大学自然科学基金资助项目(No2005KY01)
文摘
目的构建可用于高通量筛选JAK/STAT6信号传导通路抑制剂的工程细胞株,建立稳定可靠的筛选方法。方法利用基因重组和转染技术,将STAT6特异性识别启动子IgE基因序列和虫荧光素酶报告基因联合插入pCMV质粒,脂质体法转染至HeLa细胞,经潮红霉素B抗性筛选及报告基因检测,得到稳定表达虫荧光素酶的工程细胞株。通过优化溶剂DMSO浓度,IL4作用浓度及孵育时间等筛选条件,建立了可靠的筛选方法,并在此基础上对1600种化合物进行了筛选。结果建立的筛选方法稳定可靠,系统Z′因子达到0.64。通过对1600种化合物的筛选,得到3个抑制效果较理想的化合物并测得其IC50值。结论所建立的高通量筛选方法可用于JAK/STAT6信号传导通路抑制剂的筛选。
关键词
JAK/STAT6
高通量筛选
工程细胞株
抑制剂
Keywords
JAK/STAT6
high throughput screen
cell model
inhibitor
分类号
R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高通量筛选JAK-STAT6信号传导通路抑制剂方法的初步建立
笪宇蓉
姚智
李静雅
邵洁
沈强
东莉洁
李佳
杨洁
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
5
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