壳聚糖微囊的部分特性研究 被引量：11

1

作者 赵国骏 姜涌明 +3 位作者 胡健 吉鑫松 钱雪明 袁中一 《功能高分子学报》 CAS CSCD 1999年第1期65-69,共5页

以壳聚糖为主要材料，制备壳聚糖微囊。微囊直径在０．５～０．８ｍｍ间，微囊在ｐＨ４～１１的缓冲液中稳定，能耐受３０００ｒ／ｍｉｎ离心３０ｍｉｎ以上。用牛血清白蛋白和γ－球蛋白测其通透性，表明随着微囊所在溶液ｐＨ的升高，... 以壳聚糖为主要材料，制备壳聚糖微囊。微囊直径在０．５～０．８ｍｍ间，微囊在ｐＨ４～１１的缓冲液中稳定，能耐受３０００ｒ／ｍｉｎ离心３０ｍｉｎ以上。用牛血清白蛋白和γ－球蛋白测其通透性，表明随着微囊所在溶液ｐＨ的升高，微囊通透性降低。壳聚糖的分子量在一定范围内对微囊通透性几乎无影响而脱乙酰度对通透性影响很大。升高壳聚糖的脱乙酰度，微囊通透性明显降低，而其机械强度无明显变化。用该微囊固定化丝孢酵母细胞，结果酶活力回收达８０％以上，操作半衰期达２．５～３月。 展开更多

关键词 壳聚糖 微囊 通透性 微胶囊

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干细胞的研究进展 被引量：18

2

作者 王琪 方向东 戚正武 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期91-94,共4页

关键词 干细胞移植 造血干细胞 胚胎干细胞

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IL2－GMCSF融合蛋白高效表达条件的初步研究 被引量：5

3

作者 黄树其 林来兴妹 +5 位作者 齐锡位 殷志新 刘新垣 方向东 高基民 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 1996年第3期224-226,共3页

已构建好的白细胞介素２－粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＩＬ２－ＧＭＣＳＦ）融合基因载体，转化大肠杆菌ＤＨ５α，进行热诱导表达条件的研究。工程菌在３０℃培养活化至ＯＤ６００ｎｍ＝０．５±０．１时，融合蛋白的表达率最为稳... 已构建好的白细胞介素２－粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＩＬ２－ＧＭＣＳＦ）融合基因载体，转化大肠杆菌ＤＨ５α，进行热诱导表达条件的研究。工程菌在３０℃培养活化至ＯＤ６００ｎｍ＝０．５±０．１时，融合蛋白的表达率最为稳定；而后转为４２℃热诱导４±０．５ｈ，蛋白表达效率最高。 展开更多

关键词 IL2-GMCSF 融合基因 融合蛋白 高效表达

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用固定化方法研究超氧化物歧化酶的活性与结构的关系 被引量：5

4

作者 袁勤生 邓碧玉 +1 位作者 杨曜中 李文杰 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第3期326-330,共5页

采用吸附、包埋、共价交联等方法固定化超氧化物歧化酶(SOD)所得固定化酶活力回收都不高,表明酶的催化反应速率受超氧阴离子自由基(O_2^-)扩散速率的控制。用海藻酸钠包埋SOD,固定化酶不表现活力,破固定化后所得的糊状物却有很高的活力... 采用吸附、包埋、共价交联等方法固定化超氧化物歧化酶(SOD)所得固定化酶活力回收都不高,表明酶的催化反应速率受超氧阴离子自由基(O_2^-)扩散速率的控制。用海藻酸钠包埋SOD,固定化酶不表现活力,破固定化后所得的糊状物却有很高的活力。用戊二醛交联所得的固定化酶活力回收率也很低,表明ε-NH_3^+的正电荷是酶活力所必需。 展开更多

关键词 固定 超氧物歧化酶

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超氧化物歧化酶活性中心中铜离子的氧化还原研究 被引量：3

5

作者 袁勤生 邓碧玉 +1 位作者 杨曜中 李文杰 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第3期275-278,共4页

用电子顺磁共振EPR技术研究铜锌超氧化物歧化酶(Cu·Zn-SOD)与底物(O_2^(·-)反应达到平衡态时铜离子的EPR波谱表明,在平衡态时的铜离子处于还原态。用还原剂H_2O_2、NaBH_4处理Cu·Zn-SOD后,酶活力变化不同,电泳行为也不... 用电子顺磁共振EPR技术研究铜锌超氧化物歧化酶(Cu·Zn-SOD)与底物(O_2^(·-)反应达到平衡态时铜离子的EPR波谱表明,在平衡态时的铜离子处于还原态。用还原剂H_2O_2、NaBH_4处理Cu·Zn-SOD后,酶活力变化不同,电泳行为也不同。用NaBH_4处理SOD其活性及电泳行为接近天然酶,但经H_2O_2还原后的酶活性损失严重,电泳后出现多条色带。 展开更多

关键词 超氧物歧化酶 铜离子 氧化还原

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血管性假血友病的研究进展 被引量：1

6

作者 方向东 陈淳 《实用医学杂志》 CAS 1995年第6期406-408,共3页

血管性假血友病的研究进展中科院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室（２０００３１）方向东，陈淳综述戚正武审阅血管性假血友病是德国科学家Ｅｒｉｋｖｏｎｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ１９２６年在芬兰Ａｌａｎｄ岛上研究当地居民... 血管性假血友病的研究进展中科院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室（２０００３１）方向东，陈淳综述戚正武审阅血管性假血友病是德国科学家Ｅｒｉｋｖｏｎｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ１９２６年在芬兰Ａｌａｎｄ岛上研究当地居民的出血性疾病过程中首次报告的（１）... 展开更多

关键词 血管性 假性血友病 遗传性疾病 诊断 治疗

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含有HA或myc基因的融合表达载体构建及应用研究

7

作者 王琪 方向东 +2 位作者 陈淳 顾建新 戚正武 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期175-178,共4页

目的构建含有HA和myc编码序列的真核细胞融合表达载体,用于验证两种蛋白质之间的相互作用。方法利用寡核苷酸合成和PCR技术,扩增HA和myc的部分编码序列。在哺乳动物细胞表达载体pcDNA3的基础上,构建了pcDNA3HA和pcDNA3myc两种真核融合... 目的构建含有HA和myc编码序列的真核细胞融合表达载体,用于验证两种蛋白质之间的相互作用。方法利用寡核苷酸合成和PCR技术,扩增HA和myc的部分编码序列。在哺乳动物细胞表达载体pcDNA3的基础上,构建了pcDNA3HA和pcDNA3myc两种真核融合表达载体。结果将两种候选蛋白的编码序列分别克隆于上述融合载体,转染Cos7细胞后的表达产物,可利用抗HA或myc的mAb进行Westernblot和免疫共沉淀。结论利用上述系统,可验证两种候选蛋白在哺乳动物细胞中是否具有相互作用。 展开更多

关键词 融合表达载体 哺乳动物细胞 免疫共沉淀 MYC基因 HA基因 载体构建

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重组PAI－1对u－PA抑制活性的研究

8

作者 隋广超 孙红 胡美浩 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第5期604-608,共5页

利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子－１（ｒＰＡＩ－１）具有许多与天然ＰＡＩ－１相同的性质，ｒＰＡＩ－１对ｕ－ＰＡ抑制活性研究的内容包括：几种化学物质（盐酸胍、尿素、硫氰酸钾、ＳＤＳ、氯化钠等）对ｒＰＡＩ－１... 利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子－１（ｒＰＡＩ－１）具有许多与天然ＰＡＩ－１相同的性质，ｒＰＡＩ－１对ｕ－ＰＡ抑制活性研究的内容包括：几种化学物质（盐酸胍、尿素、硫氰酸钾、ＳＤＳ、氯化钠等）对ｒＰＡＩ－１的激活作用、盐酸胍激活ｒＰＡＩ－１的浓度与温度效应、显色底物法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纤维蛋白自显影对ｒＰＡＩ－１活性的测定、活性态ｒＰＡＩ－１向潜状态的转变及其与盐浓度和ｐＨ值的关系。 展开更多

关键词 重组rPAI-1 U-PA 抑制活性 药理学

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生长抑素主动免疫肉猪的增重效果 被引量：5

9

作者 黄夺先 赵伟 +4 位作者 孙益兴 朱建辉 吴美珍 姚连生 徐根宝 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 1991年第4期53-54,共2页

家畜的生长发育是一个十分复杂的生理过程,受到许多因素的影响。从内分泌学的角度来看,参与生长发育调控的激素很多,其中生长激素尤为重要。Machlin(1972)曾使用猪脑垂体生长激素制剂促进了仔猪的生长速度。然而,生长激素又直接受下丘... 家畜的生长发育是一个十分复杂的生理过程,受到许多因素的影响。从内分泌学的角度来看,参与生长发育调控的激素很多,其中生长激素尤为重要。Machlin(1972)曾使用猪脑垂体生长激素制剂促进了仔猪的生长速度。然而,生长激素又直接受下丘脑弓状核和内腹侧核分泌的生长激素释放激素(GHRH)和生长抑素(SRIH,SST)的控制。倘若用免疫学的方法消除SST对生长激素的抑制作用,是否也能收到与使用外源生长激素一样的功效?许多学者的研究已作出了肯定的回答。Ferland等(1976)用SST抗血清被动免疫大鼠,Spencer等(1983)用SST主动免疫羔羊,均能提高动物体内的生长激素和胰岛素水平,促进其生长发育。 展开更多

关键词 猪 肉猪 生长抑素 免疫 增重

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以伤寒杆菌为载体制备小分子多肽抗血清 被引量：2

10

作者 陈颖 王进 施溥涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期170-172,共3页

以伤寒杆菌为载体，采用物理吸附方法制备了１０个不同的合成多肽－载体免疫原，用这些免疫原对兔子进行免疫，所得抗血清经酶联免疫吸附法检测，具有高效价和强特异性。而且该方法具有较常规化学交联法制备免疫原更多的优点。

关键词 多肽 载体 免疫原 伤寒杆菌 酶联免疫吸附法

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PAK株与PA103株绿脓杆菌外毒素结构基因间的差异及其对功能的影响 被引量：2

11

作者 高基民 林来兴妹 +4 位作者 黄洪莲 王小宁 徐羚飞 郑仲承 刘新垣 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第1期31-35,共5页

对ＰＡＫ株的绿脓杆菌外毒素结构基因进行全长核苷酸顺序测定时发现：来源于ＰＡ１０３株和ＰＡＫ株的ＰＥ基因一级结构间存在差异，其中Ｔｈｒ^（１７９）（ＡＣＣ）→Ａｌａ^（１７９）（ＧＣＣ）、Ｓｅｒ^（５１５）（ＡＧＣ）→Ｇｌ... 对ＰＡＫ株的绿脓杆菌外毒素结构基因进行全长核苷酸顺序测定时发现：来源于ＰＡ１０３株和ＰＡＫ株的ＰＥ基因一级结构间存在差异，其中Ｔｈｒ^（１７９）（ＡＣＣ）→Ａｌａ^（１７９）（ＧＣＣ）、Ｓｅｒ^（５１５）（ＡＧＣ）→Ｇｌｙ^（５１５）（ＧＧＣ），并有１１个同义突变，但变异并不影响白细胞介素２－绿脓杆菌外毒素融合蛋白的ＡＤＰ－核糖基化活性及其细胞毒活性。 展开更多

关键词 绿脓杆菌 绿脓杆菌外毒素 结构基因 细胞毒活性

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抗癌胚抗原单区抗体的质粒构建及表达 被引量：1

12

作者 李彪 朱承谟 吴祥甫 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第2期99-102,109,共5页

目的对抗癌胚抗原单区抗体进行表达研究。方法采用PCR技术将已获得的抗癌胚抗原（CEA）鼠源单克隆抗体E7B10重、轻链可变区基因（VH、VK）进行改造后分别克隆进大肠杆菌表达质粒pET－24α（＋）中，并进行表达。结果显示重、轻链可变区... 目的对抗癌胚抗原单区抗体进行表达研究。方法采用PCR技术将已获得的抗癌胚抗原（CEA）鼠源单克隆抗体E7B10重、轻链可变区基因（VH、VK）进行改造后分别克隆进大肠杆菌表达质粒pET－24α（＋）中，并进行表达。结果显示重、轻链可变区在大肠杆菌中获得了高效表达，其表达量达到菌体总蛋白的20％与25％，SDS－PAGE和Westernblot图谱显示表达产物分子量为13KD、12KD，与其基因编码蛋白的理论推算值相符。表达产物在胞内主要以不溶性包含体存在。结论经变性和复性处理后，RIA表明重链可变区基因表达产物具有结合其特异性抗原CEA的能力。 展开更多

关键词 癌胚抗原 PCR 基因表达 肿瘤 诊断 治疗 抗体

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hTNFα寡聚组氨酸融合蛋白的表达 被引量：1

13

作者 李彪 朱承谟 吴祥甫 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第4期348-351,共4页

目的利用大肠杆菌表达系统对人肿瘤坏死因子 (hTNFα)的寡聚组氨酸 (6×His)融合蛋白进行表达和纯化研究。　方法采用大肠杆菌表达系统的表达载体 pET - 2 8a(+)和 pET - 2 2b(+)表达了hTNFα 的 6×His融合蛋白 ,其 6×Hi... 目的利用大肠杆菌表达系统对人肿瘤坏死因子 (hTNFα)的寡聚组氨酸 (6×His)融合蛋白进行表达和纯化研究。　方法采用大肠杆菌表达系统的表达载体 pET - 2 8a(+)和 pET - 2 2b(+)表达了hTNFα 的 6×His融合蛋白 ,其 6×His分别位于融合蛋白的N和C端 ,并利用寡聚组氨酸与过渡态金属离子的高亲和力性质 ,经Ni2 +-IDASepharose 6B亲和柱对表达产物进行了纯化。　结果其表达量分别为菌体总蛋白的 45 %和 8%。前者在胞内以不溶性包涵体存在 ,未对表达产物作进一步纯化 ;后者在胞质空间以可溶性存在 ,经亲和纯化的hTNFα- 6×His纯度可达 90 %以上 ,得率为 0 .4mg/ 10 0ml,并对L92 9细胞具有杀伤的功能 ,其活力为 5 .42× 10 4 U/mg。　 结论表达产物经纯化后具有细胞毒的活性。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 寡聚组氨酸 纯化 融合蛋白 表达

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〔B25－Trp〕去B链C端五肽胰岛素酰胺的合成及性质 被引量：1

14

作者 骆焕东 丘隆芳 +4 位作者 崔大敷 张新堂 郑乐 阮康成 张友尚 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第4期470-473,共4页

去Ｂ链Ｃ端八肽胰岛素（ＤＯＩ）与Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｒｐ－ＮＨ２通过胰蛋白酶催化缩合后，经分离纯化得到聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的Ｂ２５－Ｔｒｐ取代的去Ｂ链Ｃ端五肽胰岛素酰胺（〔Ｂ２５－Ｔｒｙ〕ＤＰＩ－ＮＨ２）．酶促缩合率... 去Ｂ链Ｃ端八肽胰岛素（ＤＯＩ）与Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｒｐ－ＮＨ２通过胰蛋白酶催化缩合后，经分离纯化得到聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的Ｂ２５－Ｔｒｐ取代的去Ｂ链Ｃ端五肽胰岛素酰胺（〔Ｂ２５－Ｔｒｙ〕ＤＰＩ－ＮＨ２）．酶促缩合率大于８５％，回收率为３６．２％。用小白鼠惊厥法测得〔Ｂ２５－Ｔｒｐ〕ＤＰＩ－ＮＨ２的体内活力约为天然胰岛素的７０％，用人胎盘细胞膜测得的其胰岛素受体结合能力为天然胰岛素的７２．５±２．４％；利用色氨酸和酪氨酸的内源荧光研究了此类似物的溶液构象． 展开更多

关键词 去B链C端五肽 胰岛素酰胺 胰岛素 酶促合成

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