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rhIL-15表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 被引量:2
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作者 王从印 王润田 +1 位作者 陈良 葛锡锐 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期332-334,338,共4页
目的 获得rhIL 15基因工程菌。方法 从肺癌细胞株A549中提取细胞总RNA ,用RT PCR法扩增编码人IL 15成熟区基因的片段。经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后 ,插入融合表达质粒pGEX 4T 2的相应酶切位点 ,构建重组融合蛋白表达质粒 ,并转化感受态... 目的 获得rhIL 15基因工程菌。方法 从肺癌细胞株A549中提取细胞总RNA ,用RT PCR法扩增编码人IL 15成熟区基因的片段。经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后 ,插入融合表达质粒pGEX 4T 2的相应酶切位点 ,构建重组融合蛋白表达质粒 ,并转化感受态大肠杆菌BL2 1而得到工程菌。结果 重组质粒插入片段核酸序列测定的结果 ,与文献报道的IL 15蛋白成熟区的核酸序列相一致。该工程菌所表达的融合蛋白多数以包涵体的形式存在 ,占菌体蛋白总量的 39%。复性后 ,纯化的rhIL 15蛋白经MTT比色法初步测定 ,具有促进CTLL 2细胞增殖的能力。结论 获得了具有生物学活性的rhIL 展开更多
关键词 hIL-15 基因重组 表达 包涵体 大肠杆菌
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全反式维甲酸对胰腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用 被引量:2
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作者 朱颖 章永平 +1 位作者 张学军 袁耀宗 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1154-1157,共4页
目的建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,通过体内实验观察全反式维甲酸(ATRA)对胰腺癌的治疗作用。方法将人胰腺癌细胞株SW 1990和Bx-PC3细胞接种于裸鼠皮下,建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,予ATRA 40 mg/kg每日口服,或4 mmol/LATRA每次0.1 mL隔日瘤... 目的建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,通过体内实验观察全反式维甲酸(ATRA)对胰腺癌的治疗作用。方法将人胰腺癌细胞株SW 1990和Bx-PC3细胞接种于裸鼠皮下,建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,予ATRA 40 mg/kg每日口服,或4 mmol/LATRA每次0.1 mL隔日瘤内注射。观察瘤体质量和体积变化,TUNEL法观察ATRA干预后移植瘤组织内的细胞凋亡情况,免疫组化法检测caspase-3的表达。结果成功建立两种人胰腺癌细胞株的移植瘤模型;口服和瘤内注射ATRA后,抑瘤率在Bx-PC3移植瘤分别为64.24%和55.78%,在SW 1990移植瘤分别为44.03%和49.13%;TUNEL法和电镜观察证实,ATRA诱导后移植瘤内出现细胞凋亡;免疫组化显示,caspase-3表达增加。结论ATRA口服或瘤内注射均能抑制胰腺癌移植瘤的生长,活化胰腺癌细胞内caspase-3,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 胰腺癌 凋亡 全反式维甲酸 移植瘤
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