掌叶半夏主要成分对子宫颈癌细胞生长的抑制作用 被引量：10

1

作者 王莉 杨永杰 +3 位作者 归绥琪 陈松华 葛锡锐 李桂玲 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期675-680,共6页

目的观察掌叶半夏主要成分对子宫颈癌细胞活性、形态和超微结构、细胞周期和凋亡的影响。方法在子宫颈癌细胞SiHa的培养基中加入不同浓度的β-谷甾醇和/或掌叶半夏总蛋白培养1～7 d,采用MTT比色法检测细胞的活性。采用倒置相差显微镜、... 目的观察掌叶半夏主要成分对子宫颈癌细胞活性、形态和超微结构、细胞周期和凋亡的影响。方法在子宫颈癌细胞SiHa的培养基中加入不同浓度的β-谷甾醇和/或掌叶半夏总蛋白培养1～7 d,采用MTT比色法检测细胞的活性。采用倒置相差显微镜、扫描和透射电镜观察细胞形态学和超微结构的变化,流式细胞术检测β-谷甾醇对细胞周期和细胞凋亡的影响。结果β-谷甾醇对子宫颈癌细胞SiHa的活性表现出明显的抑制作用,且具有时间、剂量依赖关系,掌叶半夏总蛋白对SiHa细胞的活性无显著影响。与对照组比较,20μmol/L的β-谷甾醇使SiHa细胞出现S期聚集、凋亡和坏死细胞增加,细胞形态和超微结构发生显著改变。结论掌叶半夏总蛋白对SiHa细胞活性的抑制作用不明显,β-谷甾醇能抑制人子宫颈癌细胞的活性,使细胞周期聚集在S期,诱导少量细胞凋亡和坏死,对细胞的形态和超微结构有显著的影响。因此,β-谷甾醇有希望成为一种安全低毒的抗子宫颈癌药物。 展开更多

关键词 掌叶半夏 Β-谷甾醇 子宫颈癌 细胞周期

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雷公藤甲素对LPS诱导的海马炎症过程中COX-2和iNOS表达的影响 被引量：9

2

作者 代玉桥 金道忠 +4 位作者 邓小华 李建明 刘正清 罗学港 雷德亮 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期521-524,共4页

选用健康成年雄性SD大鼠,用不同剂量(10μg·kg-1·d-1,25μg·kg-1·d-1,50μg·kg-1·d-1)的雷公藤甲素预处理5d后,立体定位海马注射脂多糖(LPS),采用免疫组织化学染色方法观察海马CA3区环氧化酶2(COX-2)和... 选用健康成年雄性SD大鼠,用不同剂量(10μg·kg-1·d-1,25μg·kg-1·d-1,50μg·kg-1·d-1)的雷公藤甲素预处理5d后,立体定位海马注射脂多糖(LPS),采用免疫组织化学染色方法观察海马CA3区环氧化酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达变化。结果发现:与注射生理盐水对照组比较,注射LPS可引起海马CA3区的COX-2和iNOS显著表达,而雷公藤甲素(50μg·kg-1·d-1)可明显下调LPS诱导的COX-2和iNOS的表达,其抑制程度与药物剂量呈正相关。本实验结果提示雷公藤甲素对中枢神经系统中LPS诱导的COX-2和iNOS的表达有明显的抑制作用。 展开更多

关键词 雷公藤甲素 脂多糖 环氧化酶2 诱导型一氧化氮合酶 炎症

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心肌热休克蛋白在发育大鼠慢性间歇性低压低氧中的心脏保护作用 被引量：7

3

作者 布会敏 王妹玲 +2 位作者 孙红 周兆年 张翼 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期49-53,共5页

目的探讨慢性间歇性低压低氧(CIHH)对发育大鼠心脏的保护作用及其热休克蛋白所起的作用。方法新生♂SD大鼠20只,随机分为两组:CIHH处理组(CIHH)和对照组(CON)。CIHH动物(连同母鼠)接受56 d相当于海拔3 000 m的低压低氧处理(5 h/d)。应... 目的探讨慢性间歇性低压低氧(CIHH)对发育大鼠心脏的保护作用及其热休克蛋白所起的作用。方法新生♂SD大鼠20只,随机分为两组:CIHH处理组(CIHH)和对照组(CON)。CIHH动物(连同母鼠)接受56 d相当于海拔3 000 m的低压低氧处理(5 h/d)。应用导管法描记左心室功能及血液动力学,包括左室峰压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力最大变化速率(±LVdp/dtmax)、动脉收缩压(SAP)和心率(HR),并观察急性低氧/复氧对其影响。应用半定量RT-PCR技术检测各组动物心肌热休克蛋白27(HSP27)、热休克蛋白70(HSP70)和热休克蛋白90(HSP90)mRNA的表达。结果①基础状态下,CON组动物与CIHH组动物之间左心室功能和血液动力学无差异(P>0.05);急性低氧/复氧导致发育大鼠LVSP、±LVdp/dtmax、SAP降低,HR减慢(P<0.05),但CIHH大鼠各参数变化明显小于CON动物(P<0.05)。②基础状态下,CIHH动物心肌HSP70 mRNA表达明显高于CON动物(P<0.05);急性低氧/复氧状态下,CIHH动物心肌HSP27和HSP70 mRNA表达高于CON动物(P<0.05)。结论 CIHH可通过促进心肌热休克蛋白27和热休克蛋白70表达,增强发育大鼠心肌抗急性低氧/复氧损伤能力。 展开更多

关键词 慢性间歇性低压低氧 左心室功能 热休克蛋白 低氧/复氧 心肌 发育大鼠

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PPARs配体对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达的影响 被引量：6

4

作者 张俊峰 葛恒 +1 位作者 郭炳诗 王长谦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1519-1523,共5页

目的:观察PPARα、γ配体对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPR IN)表达的影响。方法:体外诱导THP-1单核细胞转化为巨噬细胞、泡沫细胞,分别加入PPARα配体氯贝特(c lofibrate)、PPARγ配体吡格列酮(p ioglitazone)... 目的:观察PPARα、γ配体对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPR IN)表达的影响。方法:体外诱导THP-1单核细胞转化为巨噬细胞、泡沫细胞,分别加入PPARα配体氯贝特(c lofibrate)、PPARγ配体吡格列酮(p ioglitazone)共同培养,应用Real-tim e RT-PCR和W estern b lotting测定巨噬细胞、泡沫细胞中EMMPR IN基因和蛋白表达,ELISA测定细胞培养上清液MMP-9浓度,Zymgraphy法测定MMP-9活性。结果:氯贝特和吡格列酮均能显著抑制巨噬细胞和泡沫细胞EMMPR IN的表达,此抑制作用与PPARα、γ配体抑制MMP-9分泌及活性的趋势一致。结论:PPARα、γ配体均可抑制巨噬细胞、泡沫细胞EMMPR IN的表达,下调EMMPR IN可能是PPAR s配体抑制粥样斑块局部MMPs产生的机制之一。 展开更多

关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子 基质金属蛋白酶 动脉硬化

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白细胞介素13诱导Dami细胞分化并下调转录因子c-myc表达 被引量：3

5

作者 周莹 李文林 +2 位作者 王志刚 张学军 石小玉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期787-791,共5页

目的:研究重组人白细胞介素13(recombinant human interleukine-13,rhIL-13)对巨核细胞白血病细胞株Dami细胞分化的影响,以及Dami细胞白细胞介素13受体α1(Interleukine-13receptor alpha1,IL-13Rα1)的表达,探讨IL-13诱导Dami细胞分化... 目的:研究重组人白细胞介素13(recombinant human interleukine-13,rhIL-13)对巨核细胞白血病细胞株Dami细胞分化的影响,以及Dami细胞白细胞介素13受体α1(Interleukine-13receptor alpha1,IL-13Rα1)的表达,探讨IL-13诱导Dami细胞分化的机制。方法:Dami细胞经无血清培养20小时后,以rhIL-13分别作用不同时间,提取总RNA,用RT-PCR检测Dami细胞IL-13受体α1mRNA、GPⅡb mRNA、c-myc mRNA表达水平。流式细胞仪检测在rhIL-13作用下,Dami细胞GPⅡb表达。免疫组化法检测在rhIL-13作用下,Dami细胞c-myc的表达。图像分析仪对结果进行分析。结果:①Dami细胞表达IL-13Rα1mRNA,rhIL-13作用Dami细胞4小时,IL-13Rα1mRNA表达降低,12小时IL-13Rα1mRNA表达恢复。②rhIL-13作用Dami细胞后,巨核细胞的分化标志物GPⅡb mRNA和蛋白质表达增加。③rhIL-13作用Dami细胞,c-myc mRNA和蛋白质表达降低。结论:白细胞介素13下调c-myc表达。 展开更多

关键词 白细胞介素13 白细胞介素13受体α1 Dami细胞 c—myc

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沙枣花香气的人气调查及化学成分分析 被引量：13

6

作者 黄馨瑶 马晖 +1 位作者 王小明 刘益宁 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2009年第3期480-488,464,共10页

本文用从沙枣树鲜花中洗脱的香气提取物,以问卷形式调查其在上海人群中的喜好度,并以固相微萃取(SPME)结合气相色谱质谱(GC-MS)技术对沙枣花的香气成分进行鉴定,对主要组分的各种性质等做了综合分析。结果反映调查人群中66%的被访者接... 本文用从沙枣树鲜花中洗脱的香气提取物,以问卷形式调查其在上海人群中的喜好度,并以固相微萃取(SPME)结合气相色谱质谱(GC-MS)技术对沙枣花的香气成分进行鉴定,对主要组分的各种性质等做了综合分析。结果反映调查人群中66%的被访者接受和喜欢样品的气味,认可这种香气作为生活中的用品形式出现。从香气提取物中得到16种主要化合物,其中含量最多的是肉桂酸乙酯和肉桂酸甲酯,相对含量达到50%以上,其它还有丁烯酸正丁酯、肉桂酸正丁酯、苯乙醇等。大部分主要成分在其他植物中亦有存在,且在国内外多被用于食品和化工工业等。西北地方特色树种沙枣具有多元经济和生态价值,开发沙枣花香精或仅对其中所含的肉桂酸酯类进行规模提取皆具有良好的市场前景,因此提倡增加沙枣树在西北地区的规模种植,从而推动该抗旱耐瘠薄盐碱树种的反荒漠化种植。 展开更多

关键词 沙枣花 香气成分 大众喜好度 化学分析

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针对RXRα的元宝草抗肿瘤活性成分研究 被引量：2

7

作者 亓建斌 王力 +2 位作者 陈超 曾锦章 胡昌奇 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2008年第1期129-130,69,共3页

在核受体RXRα药理筛选模型指导下,对元宝草(Hypericum sampsonii Hance)进行抗肿瘤活性成分研究,分离得到3个化合物,利用MS、NMR等波谱技术鉴定为槲皮素(1)、大黄素-6-甲醚(2)、叶绿素a(3)。大黄素-6-甲醚和叶绿素a针对RXRα有活性,有... 在核受体RXRα药理筛选模型指导下,对元宝草(Hypericum sampsonii Hance)进行抗肿瘤活性成分研究,分离得到3个化合物,利用MS、NMR等波谱技术鉴定为槲皮素(1)、大黄素-6-甲醚(2)、叶绿素a(3)。大黄素-6-甲醚和叶绿素a针对RXRα有活性,有效浓度分别为0.1、20μg/mL,两者均首次从该属植物中分离得到。这也是首次以RXRα为靶点对中草药进行的抗肿瘤活性成分研究。 展开更多

关键词 RXRα 元宝草 抗肿瘤 大黄素-6-甲醚 叶绿素A

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rhIL-15表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 被引量：2

8

作者 王从印 王润田 +1 位作者 陈良 葛锡锐 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期332-334,338,共4页

目的　获得rhIL 15基因工程菌。方法　从肺癌细胞株A549中提取细胞总RNA ,用RT PCR法扩增编码人IL 15成熟区基因的片段。经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后 ,插入融合表达质粒pGEX 4T 2的相应酶切位点 ,构建重组融合蛋白表达质粒 ,并转化感受态... 目的　获得rhIL 15基因工程菌。方法　从肺癌细胞株A549中提取细胞总RNA ,用RT PCR法扩增编码人IL 15成熟区基因的片段。经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后 ,插入融合表达质粒pGEX 4T 2的相应酶切位点 ,构建重组融合蛋白表达质粒 ,并转化感受态大肠杆菌BL2 1而得到工程菌。结果　重组质粒插入片段核酸序列测定的结果 ,与文献报道的IL 15蛋白成熟区的核酸序列相一致。该工程菌所表达的融合蛋白多数以包涵体的形式存在 ,占菌体蛋白总量的 39%。复性后 ,纯化的rhIL 15蛋白经MTT比色法初步测定 ,具有促进CTLL 2细胞增殖的能力。结论　获得了具有生物学活性的rhIL 展开更多

关键词 hIL-15 基因重组 表达 包涵体 大肠杆菌

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全反式维甲酸对胰腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用 被引量：2

9

作者 朱颖 章永平 +1 位作者 张学军 袁耀宗 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1154-1157,共4页

目的建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,通过体内实验观察全反式维甲酸(ATRA)对胰腺癌的治疗作用。方法将人胰腺癌细胞株SW 1990和Bx-PC3细胞接种于裸鼠皮下,建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,予ATRA 40 mg/kg每日口服,或4 mmol/LATRA每次0.1 mL隔日瘤... 目的建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,通过体内实验观察全反式维甲酸(ATRA)对胰腺癌的治疗作用。方法将人胰腺癌细胞株SW 1990和Bx-PC3细胞接种于裸鼠皮下,建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,予ATRA 40 mg/kg每日口服,或4 mmol/LATRA每次0.1 mL隔日瘤内注射。观察瘤体质量和体积变化,TUNEL法观察ATRA干预后移植瘤组织内的细胞凋亡情况,免疫组化法检测caspase-3的表达。结果成功建立两种人胰腺癌细胞株的移植瘤模型;口服和瘤内注射ATRA后,抑瘤率在Bx-PC3移植瘤分别为64.24%和55.78%,在SW 1990移植瘤分别为44.03%和49.13%;TUNEL法和电镜观察证实,ATRA诱导后移植瘤内出现细胞凋亡;免疫组化显示,caspase-3表达增加。结论ATRA口服或瘤内注射均能抑制胰腺癌移植瘤的生长,活化胰腺癌细胞内caspase-3,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 胰腺癌 凋亡 全反式维甲酸 移植瘤

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常规致畸试验窝效应的统计处理及统计软件实现 被引量：2

10

作者 王炳顺 宫丽崑 +1 位作者 高尔生 袁伟 《中国卫生统计》 CSCD 北大核心 2003年第4期201-204,共4页

目的　致畸试验数据不宜采用常规统计方法进行分析 ,为探讨分析常规致畸试验窝效应的统计处理 ,本文介绍了通过SUDAAN统计软件的实现过程。方法　利用SUDAAN统计程序实现致畸试验中两分类结局变量的统计分析。结果　本软件对致畸试验数... 目的　致畸试验数据不宜采用常规统计方法进行分析 ,为探讨分析常规致畸试验窝效应的统计处理 ,本文介绍了通过SUDAAN统计软件的实现过程。方法　利用SUDAAN统计程序实现致畸试验中两分类结局变量的统计分析。结果　本软件对致畸试验数据统计分析可获得参数的一致性估计 ,并可获得稳健的方差估计 ,从而得出正确的统计推断。结论　包括SUDAAN在内的一些统计软件可以正确分析来自致畸试验等研究的聚集性数据 ,实际应用中可根据专业数据特点结合程序选项合理运用。 展开更多

关键词 致畸试验 窝效应 统计软件 聚集性数据 SUDAAN

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反义核酸对胃癌细胞端粒酶活性与细胞生长的抑制

11

作者 叶静 吴云林 +4 位作者 乔敏敏 章永平 郭立霞 陈字 谢弘 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第5期385-389,共5页

目的 阐述反义核酸对端粒酶活性抑制作用的浓度依赖性和序列特异性,表明端粒酶活性表达对胃癌细胞分化的不依赖性。方法 运用改良的端粒酶活性定量检测法,测定三种胃癌细胞(MKN-28、SGC-7901、MKN-45)的端粒酶活性;用台盼蓝染色法,观察... 目的 阐述反义核酸对端粒酶活性抑制作用的浓度依赖性和序列特异性,表明端粒酶活性表达对胃癌细胞分化的不依赖性。方法 运用改良的端粒酶活性定量检测法,测定三种胃癌细胞(MKN-28、SGC-7901、MKN-45)的端粒酶活性;用台盼蓝染色法,观察胃癌细胞的活力。结果 三种不同分化程度的胃癌细胞均有端粒酶活性的表达,但其活性的高低与其分化程度没有显著关系。在指定的浓度下,端粒酶反义核酸作用于胃癌细胞后,MKN-45和SGC-7901胃癌细胞出现明显的端粒酶活性和细胞生长的抑制,但在同样浓度条件下,MKN-28胃癌细胞只出现端粒酶活性的抑制。错义序列对照组则无明显变化。结论 端粒酶活性与胃癌细胞的分化没有显著相关性。端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸能抑制胃癌细胞的生长和端粒酶活性,其抑制作用有浓度依赖性和序列特异性,其作用机制是通过抑制端粒酶活性,端粒酶活性的抑制并不总是同细胞生长的抑制平行的。 展开更多

关键词 胃癌 端粒酶活性 反义核酸 细胞生长 抑制作用

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特异性启动子LEP503介导的自杀基因系统对晶状体上皮细胞增殖的抑制作用

12

作者 杨晋 卢奕 +1 位作者 刘天津 蒋永祥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第10期912-916,共5页

目的构建晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)特异性启动子LEP503(lens epithelium gene product503)调控的Lenti-LEP503-HSV-tk-EGFP载体,观察慢病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙环鸟苷系统(herps simplex virus thymidine ki... 目的构建晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)特异性启动子LEP503(lens epithelium gene product503)调控的Lenti-LEP503-HSV-tk-EGFP载体,观察慢病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙环鸟苷系统(herps simplex virus thymidine kinase/ganciclov-ir,HSV-tk/GCV)自杀基因系统对人晶状体上皮细胞(HLEC)增殖的靶向性抑制作用。方法用RT-PCR方法从HLEC基因组中克隆LEP503启动子序列,构建单纯LEP503启动子调控HSV-tk基因表达的慢病毒载体Lenti-LEP503-HSV-tk-EGFP,同时构建广谱启动子巨细胞病毒(cytomegalo virus,CMV)调控的HSV-tk载体Lenti-CMV-HSV-tk-EGFP。将特异性表达载体Lenti-LEP503-HSV-tk-EGFP分别转入HLEC和Hela细胞,用荧光显微镜观察荧光强度,用RT-PCR方法评估相关蛋白的组织特异性表达。将Lenti-LEP503-HSV-tk-EGFP和Lenti-CMV-HSV-tk-EGFP分别转入HLEC,通过荧光显微镜观察EGFP的表达,用流式细胞仪及RT-PCR比较CMV与LEP503启动子介导下游靶基因HSV-tk的表达差异。结果 Lenti-LEP503-HSV-tk-EGFP能在HLEC中特异性表达,但Lenti-LEP503-HSV-tk-EGFP的表达效率明显低于Lenti-CMV-HSV-tk-EGFP。转染Lenti-LEP503-HSV-tk-EGFP的HLEC在20mg·L-1GCV作用48h后EGFP阳性细胞的形态发生明显变化;GCV作用24h后Lenti-LEP503-HSV-tk-EGFP转染HLEC较正常HLEC和Lenti-LEP503-HSV-tk-EGFP转染Hela细胞活性有明显抑制,且随时间的延长抑制效果逐渐增强。结论 LEP503启动子能介导HSV-tk基因在HLEC中特异表达,并介导HSV-tk/GCV自杀基因系统靶向性抑制HLEC增殖,但该启动子表达效率较低,所介导的HSV-tk/GCV系统对HLECs增殖的抑制效率低于CMV启动子。 展开更多

关键词 慢病毒 单纯疱疹病毒酶 胸苷激酶 晶状体上皮细胞 特异性启动子 LEP503 自杀基因系统

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反义寡聚核苷酸的化学修饰

13

作者 叶静 吴云林 谢弘 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第3期285-288,共4页

反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotides, AS-ODNs)的概念最先提出于1967年,经过30多年的研究,人们已意识到在各种反义寡聚核苷酸的广阔领域里,有可能寻找到更有效的抗病毒和抗肿瘤新药.

关键词 反义寡聚核苷酸 化学修饰 核酸酶 反义药物 生物学活性

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TPRC3通道对MPP^＋所致MN9D细胞损伤的保护作用 被引量：1

14

作者 张雷 王军锋 +1 位作者 葛瑞良 王晓民 《首都医科大学学报》 CAS 2008年第2期153-157,共5页

目的探讨经典瞬间受体电位通道蛋白(transient receptor potential-canonical channel,TRPC)家族在1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-Methyl-4-phenylpy ridinium ion,MPP+)导致的MN9D细胞毒性损伤中的作用。方法用不同浓度(62.5、125、250、500... 目的探讨经典瞬间受体电位通道蛋白(transient receptor potential-canonical channel,TRPC)家族在1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-Methyl-4-phenylpy ridinium ion,MPP+)导致的MN9D细胞毒性损伤中的作用。方法用不同浓度(62.5、125、250、500、1000μmol/L)的MPP+处理MN9D细胞24h,500μmol/L MPP+处理MN9D细胞不同时间(3、6、12、24、36h),建立细胞损伤模型。用RT-PCR的方法检测MN9D细胞中内源性TRPC的表达情况;500μmol/L MPP+作用于MN9D细胞,以Western blot法检测MN9D细胞内源性TRPC表达的变化;构建GFP与TRPC3-GFP腺病毒载体,转染到MN9D细胞中,以四甲基偶氮唑盐比色法(methods the tetrazolium,MTT)的方法检测过表达的TRPC3对MPP+引起的MN9D细胞损伤的保护作用。结果500μmol/LMPP+处理MN9D细胞6h就可以显著降低细胞内TRPC3蛋白水平的表达,但对TRPC6的表达无影响。过表达TRPC3能够保护MN9D细胞免受MPP+的毒性损伤。结论MPP+特异性地降低MN9D细胞TRPC3蛋白水平,过表达TRPC3可以抑制MPP+引起的MN9D细胞损伤。这种现象提示TRPC3通道可能参与了帕金森病发病的分子机制。 展开更多

关键词 帕金森病 1-甲基-4-苯基吡啶离子 经典瞬间受体电位通道蛋白 神经保护

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