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正交试验与单因子双重试验法优化玉米PCR反应体系 被引量:2
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作者 江常胜 朱洪海 +2 位作者 钟永丽 刘明晓 东方 《智慧农业导刊》 2022年第21期14-17,共4页
为探索出玉米PCR反应的最佳体系,解决玉米分子育种工作中基因序列扩增问题,给育种工作提供便利,该文试验以玉米幼嫩叶片为材料,采用正交试验设计法对影响玉米PCR反应的引物用量、模板和模板质量浓度等因素进行3因素4水平优化;对退火温... 为探索出玉米PCR反应的最佳体系,解决玉米分子育种工作中基因序列扩增问题,给育种工作提供便利,该文试验以玉米幼嫩叶片为材料,采用正交试验设计法对影响玉米PCR反应的引物用量、模板和模板质量浓度等因素进行3因素4水平优化;对退火温度进行单因子8水平试验优化,通过试验探索出玉米10μLPCR的最佳反应体系为5μL2×EasyTaq~?PCR SuperMix(含EasyTaq~?DNA Polymerase、dNTPs)、引物0.25μL和1μL40 ng/μL模板DNA,退火温度56.6℃。 展开更多
关键词 分子育种 玉米 PCR 正交试验设计 单因子试验 体系优化
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基于基因组测序揭示玉米WAK基因的变异信息
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作者 东方 江常胜 +1 位作者 钟永丽 袁建中 《智慧农业导刊》 2022年第24期32-36,共5页
玉米是全球总产量最高的粮食作物,对粮食安全产生重大影响。通过下一代测序技术对5个玉米品种Z07、Z24、Z29、Z41及YLZ进行全基因组测序,结果表明,4个玉米品种的WAK基因序列基本一致,而Z07没有测出这段序列。在编码区无明显变异的情况下... 玉米是全球总产量最高的粮食作物,对粮食安全产生重大影响。通过下一代测序技术对5个玉米品种Z07、Z24、Z29、Z41及YLZ进行全基因组测序,结果表明,4个玉米品种的WAK基因序列基本一致,而Z07没有测出这段序列。在编码区无明显变异的情况下,启动子区新发现有1个插入突变,这种变异类型在已测序并公开发表的75份玉米资源的WAK基因序列中也有发现,命名为ZmWAK-i。 展开更多
关键词 玉米 WAK基因变异 启动子 SNP INDEL
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不同提取方法与研磨方式对玉米种子DNA提取效果的影响
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作者 钟永丽 江常胜 +2 位作者 朱绍勇 刘明晓 东方 《智慧农业导刊》 2023年第1期32-35,共4页
以玉米自交系Z17、Z24、Z29为材料,采用改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和试剂盒法,比较不同提取方法和研磨方式对玉米种子基因组DNA的提取效果。通过超微量分光光度计检测、琼脂糖凝胶电泳和聚合酶链式反应(PCR)扩增,对提取的基因组... 以玉米自交系Z17、Z24、Z29为材料,采用改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和试剂盒法,比较不同提取方法和研磨方式对玉米种子基因组DNA的提取效果。通过超微量分光光度计检测、琼脂糖凝胶电泳和聚合酶链式反应(PCR)扩增,对提取的基因组DNA进行分析。结果表明,与改良CTAB法相比,试剂盒法获得的DNA浓度适宜,纯度高,简单快速,效果稳定。优化试剂盒法,从玉米干种子中直接提取DNA质量更高。 展开更多
关键词 玉米 种子 基因组DNA 研磨 影响
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