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PEDV、PoRV、PDCoV多重荧光定量RT-PCR方法的建立和应用被引量：1: 1; 作者陈登金李鹏宇 +5 位作者董楠常昊天胡渤肖进张蕾马良《中国兽医杂志》北大核心 2025年第9期71-78,共8页; 为实现对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的同时鉴别检测,本试验根据PEDV核衣壳蛋白(N)基因、PoRV结构蛋白6(VP6)基因和PDCoV基质蛋白(M)基因筛选设计3对特异性引物和荧光标记探针,通过矩阵法优化... 展开更多; 关键词猪流行性腹泻病毒(PEDV) 猪轮状病毒(PoRV) 猪德尔塔冠状病毒(PDCoV) 逆转录聚合酶链式反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

3种口蹄疫O型抗体检测试剂盒对疫苗免疫牛血清抗体检测的比较试验被引量：5: 2; 作者董春娜马爱荣 +6 位作者张蕾李静巴利民王振豹齐鹏汪明肖进《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第12期38-40,共3页; 为了提供检测结果准确且操作便捷的试剂盒,本试验应用两种商品化试剂盒和本实验室研制的一种基于合成肽包被抗原的间接ELISA试剂盒同时对口蹄疫疫苗免疫后14、21和28 d的150份免疫牛血清进行口蹄疫O型抗体水平的检测,并对3种试剂盒测定... 展开更多; 关键词牛口蹄疫 ELISA 试剂盒; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛口蹄疫O型合成肽VP1结构蛋白ELISA抗体检测方法的建立被引量：1: 3; 作者张蕾肖进 +7 位作者董春娜巴利民栗利芳宋芳王楠周强齐鹏汪明《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期22-24,共3页; 根据牛口蹄疫O型3个拓扑型VP1序列设计3条合成肽,以此为包被抗原建立牛口蹄疫O型合成肽VP1结构蛋白ELISA抗体检测方法,并对该方法敏感性、特异性和重复性进行验证。结果显示,该方法敏感性为96.7%,特异性为99.1%,批内和批间变异系数分别... 展开更多; 关键词牛口蹄疫合成肽 ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪SLA-1体外表达及其结合多肽的筛选被引量：1: 4; 作者巴利民王振豹 +3 位作者齐鹏汪明肖进喻长远《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期32-35,共4页; 本文将猪群中表达频率较高的SLA-1*1301胞外区及SLA-β2 m基因序列片段合成后连接到pET21a(+)原核表达载体上,构建出pET21a-SLA-1*1301和pET21a-SLA-β2m重组表达质粒。通过IPTG诱导大肠杆菌刺激产生大量的相关目标产物,再将所获得的质... 展开更多; 关键词猪 SLA-1 口蹄疫 CTL表位; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PEDV、PoRV、PDCoV多重荧光定量RT-PCR方法的建立和应用被引量：1: 1; 作者陈登金李鹏宇董楠常昊天胡渤肖进张蕾马良; 机构中牧实业股份有限公司农业部兽用生物制品与化药重点实验室、北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术中心; 出处《中国兽医杂志》北大核心 2025年第9期71-78,共8页; 文摘为实现对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的同时鉴别检测,本试验根据PEDV核衣壳蛋白(N)基因、PoRV结构蛋白6(VP6)基因和PDCoV基质蛋白(M)基因筛选设计3对特异性引物和荧光标记探针,通过矩阵法优化反应条件,建立多重荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,绘制标准曲线,验证该方法的特异性、敏感性和重复性,并进行临床样本检测。标准曲线拟合试验结果显示,PEDV、PoRV和PDCoV多重荧光定量RT-PCR方法针对各病毒扩增均具有良好的相关系数和扩增效率;特异性试验结果显示,该方法仅对PEDV、PoRV和PDCoV呈现特异性扩增,不与其他猪源病毒发生交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法对PEDV、PoRV和PDCoV的最低检测限均为1×10^(0)copies/μL;组内和组间重复性试验的Ct值变异系数均小于2%,具有良好的重复性。对367份临床样本进行PEDV、PoRV和PDCoV检测,多重荧光定量RT-PCR检测的阳性率为92.37%(339/367),而地方标准多重RT-PCR检测的阳性率为83.38%(306/367),2种方法临床样本检测符合率为91.01%(334/367)。结果表明,本试验建立了一种可快速、准确、灵敏检测PEDV、PoRV和PDCoV的多重荧光定量RT-PCR方法,可用于实验室病原和临床样本检测,为临床猪病毒性腹泻的研究和防控提供了有效技术方法。; 关键词猪流行性腹泻病毒(PEDV) 猪轮状病毒(PoRV) 猪德尔塔冠状病毒(PDCoV) 逆转录聚合酶链式反应; Keywords porcine epidemic diarrhea virus(PEDV) porcine rotavirus(PoRV) porcine delta coronavirus(PDCoV) re⁃verse transcription polymerase chain reaction; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名3种口蹄疫O型抗体检测试剂盒对疫苗免疫牛血清抗体检测的比较试验被引量：5: 2; 作者董春娜马爱荣张蕾李静巴利民王振豹齐鹏汪明肖进; 机构中牧实业股份有限公司农业部兽用生物制品与化药重点实验室北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术中心中牧股份兰州生物药厂中国农业大学动物医学院; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第12期38-40,共3页; 基金北京市科委项目(D161100001516001 D161100001516002); 文摘为了提供检测结果准确且操作便捷的试剂盒,本试验应用两种商品化试剂盒和本实验室研制的一种基于合成肽包被抗原的间接ELISA试剂盒同时对口蹄疫疫苗免疫后14、21和28 d的150份免疫牛血清进行口蹄疫O型抗体水平的检测,并对3种试剂盒测定结果的符合程度、重复性和便捷性进行了比较。试验结果表明3种试剂盒测得的抗体水平检测结果之间高度符合,且3种试剂盒各自的检测结果重复性良好,基于合成肽包被抗原的间接ELISA试剂盒在操作便捷性方面优势明显。; 关键词牛口蹄疫 ELISA 试剂盒; Keywords cattle FMDV ELISA kit; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛口蹄疫O型合成肽VP1结构蛋白ELISA抗体检测方法的建立被引量：1: 3; 作者张蕾肖进董春娜巴利民栗利芳宋芳王楠周强齐鹏汪明; 机构中牧实业股份有限公司农业部兽用生物制品与化药重点实验室北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术中心中国农业大学动物医学院; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期22-24,共3页; 文摘根据牛口蹄疫O型3个拓扑型VP1序列设计3条合成肽,以此为包被抗原建立牛口蹄疫O型合成肽VP1结构蛋白ELISA抗体检测方法,并对该方法敏感性、特异性和重复性进行验证。结果显示,该方法敏感性为96.7%,特异性为99.1%,批内和批间变异系数分别为2.1%-9.8%和3.5%-10.7%。与2种商品化试剂盒比较,符合率分别为93.5%和85.9%。结果表明,该方法敏感性好、特异性强、稳定性高,可用于牛口蹄疫O型抗体水平检测。; 关键词牛口蹄疫合成肽 ELISA; Keywords cattle FMDV synthetic peptide ELISA; 分类号 S858.23 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪SLA-1体外表达及其结合多肽的筛选被引量：1: 4; 作者巴利民王振豹齐鹏汪明肖进喻长远; 机构北京化工大学生命科学与技术学院中牧实业股份有限公司农业部兽用生物制品与化药重点实验室北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术中心中国农业大学动物医学院; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期32-35,共4页; 文摘本文将猪群中表达频率较高的SLA-1*1301胞外区及SLA-β2 m基因序列片段合成后连接到pET21a(+)原核表达载体上,构建出pET21a-SLA-1*1301和pET21a-SLA-β2m重组表达质粒。通过IPTG诱导大肠杆菌刺激产生大量的相关目标产物,再将所获得的质量比较高的SLA-1*1301胞外区表达蛋白、SLA-β2m蛋白分别与6条软件预测的口蹄疫细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位多肽进行蛋白复性和纯化,通过蛋白纯化仪分析,结果显示,其中4条预测口蹄疫CTL表位多肽可以形成稳定的SLA I-β2m-表位多肽复合体,表明该4条多肽可能为口蹄疫的CTL表位肽,对将来开发细胞免疫疫苗和相关免疫增强剂有重要的指导意义。; 关键词猪 SLA-1 口蹄疫 CTL表位; Keywords pig swine leukocyte antigen-1 foot-and-mouth disease CTL epitope; 分类号 S858 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	PEDV、PoRV、PDCoV多重荧光定量RT-PCR方法的建立和应用	陈登金李鹏宇董楠常昊天胡渤肖进张蕾马良	《中国兽医杂志》北大核心	2025	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	3种口蹄疫O型抗体检测试剂盒对疫苗免疫牛血清抗体检测的比较试验	董春娜马爱荣张蕾李静巴利民王振豹齐鹏汪明肖进	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2017	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	牛口蹄疫O型合成肽VP1结构蛋白ELISA抗体检测方法的建立	张蕾肖进董春娜巴利民栗利芳宋芳王楠周强齐鹏汪明	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪SLA-1体外表达及其结合多肽的筛选	巴利民王振豹齐鹏汪明肖进喻长远	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2020	1	在线阅读下载PDF 职称材料