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基于Stefin抗原兔豆状囊尾蚴病间接ELISA检测方法的建立
被引量:
1
1
作者
王由森
石正发
+6 位作者
车亮
张月玥
羊倩倩
李甲
肖琴
孙晓林
王泽祥
《甘肃农业大学学报》
北大核心
2025年第1期1-9,共9页
【目的】研究半胱氨酸蛋白酶抑制剂Stefin的生物活性,建立豆状囊尾蚴病新的、高效便捷的血清学诊断方法。【方法】用Bradford法测定纯化后的重组蛋白浓度。以重组蛋白stefin作为包被抗原,建立间接ELISA诊断方法,通过从抗原包被浓度、包...
【目的】研究半胱氨酸蛋白酶抑制剂Stefin的生物活性,建立豆状囊尾蚴病新的、高效便捷的血清学诊断方法。【方法】用Bradford法测定纯化后的重组蛋白浓度。以重组蛋白stefin作为包被抗原,建立间接ELISA诊断方法,通过从抗原包被浓度、包被条件、封闭条件、血清稀释度、酶标二抗稀释度、反应时间、温度等条件,以阳性血清与阴性血清的D_(450 nm)比值(P/N)作为判断标准优化反应条件,并对ELISA方法的敏感性、特异性、重复性进行检测。【结果】测定了重组蛋白浓度。间接ELISA检测方法临界值为0.352。阳性血清稀释倍数至1∶12800时,D_(450 nm)的值仍大于临界值。兔球虫、兔弓形虫等阳性血清检测显示D_(450 nm)均小于0.352。【结论】Stefin蛋白可以大批量获得,以stefin作为抗原建立的间接ELISA检测方法可以应用于豆状囊尾蚴病的诊断和流行病学调查研究,对豆状囊尾蚴病的有效防控具有重要的意义。
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关键词
豆状囊尾蚴
BRADFORD
间接ELISA
Stefin
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题名
基于Stefin抗原兔豆状囊尾蚴病间接ELISA检测方法的建立
被引量:
1
1
作者
王由森
石正发
车亮
张月玥
羊倩倩
李甲
肖琴
孙晓林
王泽祥
机构
甘肃农业大学动物医学院
中牧实业有限公司兰州生物药厂
出处
《甘肃农业大学学报》
北大核心
2025年第1期1-9,共9页
基金
国家自然科学基金项目(32160843)
甘肃省自然科学基金项目(21JR7RA823)。
文摘
【目的】研究半胱氨酸蛋白酶抑制剂Stefin的生物活性,建立豆状囊尾蚴病新的、高效便捷的血清学诊断方法。【方法】用Bradford法测定纯化后的重组蛋白浓度。以重组蛋白stefin作为包被抗原,建立间接ELISA诊断方法,通过从抗原包被浓度、包被条件、封闭条件、血清稀释度、酶标二抗稀释度、反应时间、温度等条件,以阳性血清与阴性血清的D_(450 nm)比值(P/N)作为判断标准优化反应条件,并对ELISA方法的敏感性、特异性、重复性进行检测。【结果】测定了重组蛋白浓度。间接ELISA检测方法临界值为0.352。阳性血清稀释倍数至1∶12800时,D_(450 nm)的值仍大于临界值。兔球虫、兔弓形虫等阳性血清检测显示D_(450 nm)均小于0.352。【结论】Stefin蛋白可以大批量获得,以stefin作为抗原建立的间接ELISA检测方法可以应用于豆状囊尾蚴病的诊断和流行病学调查研究,对豆状囊尾蚴病的有效防控具有重要的意义。
关键词
豆状囊尾蚴
BRADFORD
间接ELISA
Stefin
Keywords
Cysticercus pisiformis
bradford
indirect ELISA
Stefin
分类号
S859 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于Stefin抗原兔豆状囊尾蚴病间接ELISA检测方法的建立
王由森
石正发
车亮
张月玥
羊倩倩
李甲
肖琴
孙晓林
王泽祥
《甘肃农业大学学报》
北大核心
2025
1
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