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人羊膜组织细胞神经生物学特性形态学研究 被引量:3
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作者 潘琳 舒峻 +8 位作者 蔡哲 张岚 郭艳茹 徐波 向青 耿同超 牟亮 孔祥英 左萍萍 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期46-49,i0001,共5页
目的利用神经干细胞特异性标志蛋白,鉴定人羊膜组织中神经细胞的存在,从组织和细胞形态学角度探讨羊膜组织细胞的神经生物学特性。方法利用TH、AchT、NeuN、MAP2、CNPase、MBP和GFAP单克隆抗体,通过免疫组织化学、免疫细胞化学和免疫荧... 目的利用神经干细胞特异性标志蛋白,鉴定人羊膜组织中神经细胞的存在,从组织和细胞形态学角度探讨羊膜组织细胞的神经生物学特性。方法利用TH、AchT、NeuN、MAP2、CNPase、MBP和GFAP单克隆抗体,通过免疫组织化学、免疫细胞化学和免疫荧光细胞化学技术方法,检测羊膜组织细胞中的多巴胺能神经元、胆碱能神经元、神经元、少突胶质细胞和胶质细胞。结果羊膜组织细胞中存在TH、AchT、NeuN、MAP2、CNPase、MBP和GFAP等神经细胞特异性标记蛋白表达阳性细胞。结论实验结果提示羊膜组织细胞内可能存在多巴胺能神经元、胆碱能神经元少突胶质细胞和星形胶质细胞等。这对细胞移植治疗帕金森氏病、老年痴呆和多发性硬化等神经系统疑难疾病将具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 人羊膜细胞 神经细胞 冲经元 神经系统退行性疾病 神经干细胞
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MTT、MTS、WST-1在细胞增殖检测中最佳实验条件的研究 被引量:35
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作者 李红艳 夏启胜 +4 位作者 徐梅 房青 徐波 陈志华 向青 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期824-826,共3页
目的:探讨MTT、MTS、WST-1三种四唑盐在细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法:取对数生长期的小鼠黑色素瘤B16细胞,用10%胎牛血清DMEM培养液制成不同浓度的细胞悬液加入96孔培养板中培养24h,分别加入三种试剂后在450nm、492nm和630nm波... 目的:探讨MTT、MTS、WST-1三种四唑盐在细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法:取对数生长期的小鼠黑色素瘤B16细胞,用10%胎牛血清DMEM培养液制成不同浓度的细胞悬液加入96孔培养板中培养24h,分别加入三种试剂后在450nm、492nm和630nm波长处测定OD值,根据不同波长所测OD值的大小确定三种试剂的最佳实验波长。根据细胞浓度与OD值关系曲线确定三种试剂各自的最适细胞浓度。取最适浓度的B16细胞分别加入三种试剂在0.5h、1h、2h和4h四个不同时间点测定吸收值,根据OD值确定最佳的检测时间。结果:MTT、MTS法的最佳波长为492nm,WST-1法为450nm。MTT的最适细胞接种浓度为1.6×103—2.56×104/mL,MTS的最适细胞接种浓度为5×10—6.4×103/mL,WST-1的最适细胞接种浓度为2.5×10—1.6×103/mL。三种方法的最佳测定时间均为4h。结论:MTT、MTS、WST-1分别适用于不同条件下检测细胞的存活与增殖,可为抗病毒及抗癌药物的筛选提供实验依据。 展开更多
关键词 四甲基偶氮唑盐法 内盐法 四唑单钠盐法 细胞增殖
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细胞低温长期生存系统的研究以及在空间搭载中的应用 被引量:5
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作者 房青 徐梅 +5 位作者 徐波 李红艳 向青 陈志华 刘轩 唐劲天 《中国康复理论与实践》 CSCD 2004年第11期649-651,共3页
目的研制哺乳动物细胞低温长期生存系统并用于空间搭载 ,为空间辐射的诱变效应研究提供基础条件。方法将基因工程细胞、肿瘤细胞和干细胞培养于细胞低温长期生存系统中 ,搭载神舟 4号飞船和第 18颗返回式卫星 ,观察细胞存活情况。结果... 目的研制哺乳动物细胞低温长期生存系统并用于空间搭载 ,为空间辐射的诱变效应研究提供基础条件。方法将基因工程细胞、肿瘤细胞和干细胞培养于细胞低温长期生存系统中 ,搭载神舟 4号飞船和第 18颗返回式卫星 ,观察细胞存活情况。结果多种细胞可在此系统中存活多达 2 6d ,其中空间飞行 18d。细胞返地后经短暂复温即可进行消化 ,可生长增殖形成单克隆。结论此简易的细胞培养系统可使细胞于空间搭载条件下长期存活 ,有利于研究空间辐射对增殖期哺乳动物细胞的诱变效应。 展开更多
关键词 低温 细胞培养 空间 培养系统
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人羊膜组织细胞的神经干细胞特性形态学研究 被引量:5
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作者 蔡哲 舒峻 +11 位作者 潘琳 张岚 徐波 郭艳如 黄小杰 向青 耿同超 胡景伟 周忠蜀 徐杨 高艳 崔晓惠 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1077-1081,1085,共6页
目的:利用形态学研究方法,探讨神经干细胞特异性标志蛋白的表达和增殖分化特性,鉴定人类羊膜组织中神经干/前体细胞的存在。方法:利用免疫组织化学法,检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中nestin、musashi-1、vimentin和PSA-NCAM等神... 目的:利用形态学研究方法,探讨神经干细胞特异性标志蛋白的表达和增殖分化特性,鉴定人类羊膜组织中神经干/前体细胞的存在。方法:利用免疫组织化学法,检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中nestin、musashi-1、vimentin和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白的表达,利用BrdU掺入实验鉴定羊膜组织来源神经干/前体细胞的增殖分化能力。结果:免疫组织化学检测证实人羊膜组织表达nestin、musashi-1、CD133和vimentin等神经干细胞特异性标志蛋白,主要分布于羊膜组织的间质层。培养羊膜细胞的免疫荧光化学染色显示nestin、musashi-1、vimentin和PSA-NCAM阳性细胞的存在。BrdU掺入的组织形态学实验显示培养羊膜细胞中存在BrdU标记阳性细胞,其中具有BrdU与nestin、musashi-1、vimentin双标阳性细胞,显示羊膜细胞中存在具有增殖活性神经干细胞标记蛋白表达阳性细胞;而BrdU与β-tubullinIII、TH和GFAP双标阳性细胞的存在,表明神经元和胶质细胞是由培养羊膜细胞增殖分化的。结论:羊膜组织中存在神经干细胞特异性标记蛋白Nestin、Musashi-1、CD133、PSA-NCAM和Vimentin表达阳性细胞,BrdU掺入的组织形态学结果不仅证实羊膜细胞中Nestin、Musashi-1、Vimentin阳性细胞具有增殖活性,而且其中存在已分化的神经元和胶质细胞,提示羊膜组织细胞内存在神经干/前体细胞。 展开更多
关键词 羊膜细胞 神经干细胞 巢蛋白
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Fas/FasL途径介导的人肺癌细胞免疫逃逸 被引量:15
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作者 向青 徐波 徐梅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期168-171,共4页
目的:观察在3种人肺癌细胞(A549、EBC-1、LCSC)和人T细胞(Jurkat)Fas/FasL表达情况,探讨人肺癌细胞免疫逃逸及反杀伤作用与Fas/FasL途径的关系。方法:用FACScan、RT-PCR方法检测Fas/FasL蛋白及mRNA表达;以荧光染色法观察细胞调亡;用台... 目的:观察在3种人肺癌细胞(A549、EBC-1、LCSC)和人T细胞(Jurkat)Fas/FasL表达情况,探讨人肺癌细胞免疫逃逸及反杀伤作用与Fas/FasL途径的关系。方法:用FACScan、RT-PCR方法检测Fas/FasL蛋白及mRNA表达;以荧光染色法观察细胞调亡;用台盼蓝拒染法检测细胞存活。结果:3种人肺癌细胞及T-细胞系(Jurkat)均表达Fas及FasL;肺癌细胞与Jurkat细胞共培养时,肺癌细胞可导致Jurkat细胞生长抑制(P<0.05)及凋亡;在共培养体系中加入FasL中和性抗体NOK1,可封闭肺癌细胞对Jurkat细胞的生长抑制作用(P>0.05)。结论:Fas/FasL途径可介导上述3种人肺癌细胞对Jurkat细胞的生长抑制及致凋亡作用;中和性抗体可有效阻断Fas信号转导途径,抑制肿瘤细胞的反杀伤作用,有效保护免疫系统。 展开更多
关键词 肺肿瘤 T淋巴细胞 FAS/FASL JURKAT细胞 免疫逃逸
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小鼠黑色素瘤B16细胞空间无源搭载条件的筛选 被引量:4
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作者 徐梅 向青 +7 位作者 李红艳 徐波 陈志华 刘轩 房青 耿传营 郭宇鹏 唐劲天 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第1期16-17,共2页
目的筛选小鼠黑色素瘤B16细胞无源搭载的最佳条件。方法将小鼠黑色素瘤B16细胞纯化后接种在微载体上 ,按不同细胞浓度、血清浓度、微载体量和温度分组。 3 3d后 ,Giemsa染色 ,光境下观察 ,计算细胞存活率。结果细胞存活率 8%和10 %的两... 目的筛选小鼠黑色素瘤B16细胞无源搭载的最佳条件。方法将小鼠黑色素瘤B16细胞纯化后接种在微载体上 ,按不同细胞浓度、血清浓度、微载体量和温度分组。 3 3d后 ,Giemsa染色 ,光境下观察 ,计算细胞存活率。结果细胞存活率 8%和10 %的两组为最佳条件。利用所选条件 ,将细胞搭载于第 2 0颗返回式卫星 ,空间飞行 18d ,细胞返回后 ,经单克隆化 ,获得 110株单克隆细胞 ,存活率为 1 1%。结论筛选出B16细胞无源搭载的最佳条件 ,实际空间飞行表明细胞在空间中的存活时间和生存率满意。 展开更多
关键词 空间 B16细胞 培养系统 筛选
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细胞凋亡与心脑血管疾病的关系 被引量:3
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作者 徐波 向青 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期875-877,共3页
关键词 细胞凋亡途径 心脑血管疾病 自身免疫性疾病 脑缺血缺氧性疾病 老年性痴呆症 动脉粥样硬化 凋亡相关疾病 生物机体 死亡方式 细胞坏死
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空间诱变致生长减慢CHO(dhfr^-)细胞株的特性
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作者 李红艳 徐梅 +5 位作者 向青 房青 徐波 高福云 刘国铃 唐劲天 《中国康复理论与实践》 CSCD 2004年第11期647-648,共2页
目的了解空间环境下生物工程细胞CHO(dhfr-)在形态、生长和周期等方面的变化。方法将CHO(dhfr-)生物工程细胞株搭载于我国第 18颗返回式卫星 ,返地的细胞在倍增之前进行单克隆化。从中随机选取 4株细胞 ,经 5代培养确定一株生长速度最... 目的了解空间环境下生物工程细胞CHO(dhfr-)在形态、生长和周期等方面的变化。方法将CHO(dhfr-)生物工程细胞株搭载于我国第 18颗返回式卫星 ,返地的细胞在倍增之前进行单克隆化。从中随机选取 4株细胞 ,经 5代培养确定一株生长速度最慢的细胞株 ,利用光镜、MTT法、FCM分析法观察细胞生长特性。结果返地后的CHO (dhfr-)细胞经过单克隆化、扩增 ,获得 15 9个细胞株。经空间诱变后的细胞出现细胞形态改变、生长增殖速度减慢、G1期细胞明显增多。结论生物工程CHO(dhfr-)细胞经空间诱变可引起生长特性的改变 ,为筛选优化的生物工程制药细胞提供可能。 展开更多
关键词 CHO(dhfr^-)细胞 空间 生长特性
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