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类风湿关节炎患者采用体格检查与超声评估的28关节疾病活动评分比较研究 被引量:32
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作者 陈光耀 罗静 +4 位作者 郑思思 何春晓 马骁 徐愿 陶庆文 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2018年第14期1727-1729,1734,共4页
目的评价超声下28关节疾病活动评分(US-DAS28)用于类风湿关节炎(RA)患者疾病活动度评估的敏感性及与28关节疾病活动评分(DAS28)的一致性。方法选取2013年1月—2017年7月于中日友好医院中医风湿病科门诊或住院治疗的RA患者127例为研究对... 目的评价超声下28关节疾病活动评分(US-DAS28)用于类风湿关节炎(RA)患者疾病活动度评估的敏感性及与28关节疾病活动评分(DAS28)的一致性。方法选取2013年1月—2017年7月于中日友好医院中医风湿病科门诊或住院治疗的RA患者127例为研究对象。临床检查双侧近端指间关节、掌指关节、腕关节、肘关节、肩关节、膝关节28个关节,记录关节压痛数、关节肿胀数以及患者整体评价、C反应蛋白水平,计算DAS28。采用超声下灰阶关节滑膜炎数替代关节肿胀数,计算US-DAS28数值。结果 127例患者临床检查关节肿胀有2.0(0,4.0)个,超声下关节肿胀有5.0(2.0,8.0)个,差异有统计学意义(Z=-7.783,P<0.001)。DAS28为(3.43±1.18),US-DAS28为(3.69±1.03),差异有统计学意义(t_(配对)=-9.668,P<0.001)。Pearson相关分析显示,DAS28与USDAS28呈正相关(r=0.968,P<0.001)。采用US-DAS28评估的疾病活动度较DAS28严重(Z=-4.680,P<0.001)。结论US-DAS28与DAS28具有良好的一致性,但US-DAS28可敏感评估RA患者的疾病活动度,宜作为治疗策略的选择依据。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 超声检查 28关节疾病活动评分 关节肿胀
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补肾强督方对强直性脊柱炎膜内成骨Wnt/β-catenin通路影响的实验研究 被引量:21
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作者 徐愿 孔维萍 +3 位作者 陶庆文 杨文雪 金玥 阎小萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期718-723,共6页
目的研究补肾强督方对BMSCs膜内成骨中Wnt通路的作用。{方法 BMSCs细胞分为空白对照组、西药对照组、补肾强督方低、中、高剂量组,进行膜内成骨诱导分化,ELISA法检测上清液ALP、BGP,Western blot和荧光定量PCR检测DKK-1和β-catenin蛋... 目的研究补肾强督方对BMSCs膜内成骨中Wnt通路的作用。{方法 BMSCs细胞分为空白对照组、西药对照组、补肾强督方低、中、高剂量组,进行膜内成骨诱导分化,ELISA法检测上清液ALP、BGP,Western blot和荧光定量PCR检测DKK-1和β-catenin蛋白和基因表达。结果补肾强督方含药血清对BMSCs能促进BMSCs成骨分化中DKK-1蛋白和mRNA表达,抑制β-catenin蛋白和mRNA表达,且呈剂量依赖性,但对成骨能力无影响。结论补肾强督方能调节BMSCs细胞成骨分化中Wnt通路,可能具有抑制AS骨化的作用。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 骨化 膜内成骨 Wnt/β-Scatenin通路
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不同中医证候类风湿关节炎患者28关节肌肉骨骼超声表现差异分析 被引量:21
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作者 陈光耀 胡琪 +4 位作者 徐愿 郑思思 马骁 罗静 陶庆文 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2019年第21期2616-2620,共5页
背景既往研究表明,不同中医证候类风湿关节炎(RA)患者实验室检查、影像学检查等临床指标具有一定的差异,同时临床指标能够为中医辨证提供依据。而探究不同中医证候RA患者28关节肌肉骨骼超声表现的差异,可为客观化RA的辨证论治提供依据... 背景既往研究表明,不同中医证候类风湿关节炎(RA)患者实验室检查、影像学检查等临床指标具有一定的差异,同时临床指标能够为中医辨证提供依据。而探究不同中医证候RA患者28关节肌肉骨骼超声表现的差异,可为客观化RA的辨证论治提供依据。目的分析不同中医证候RA患者28关节肌肉骨骼超声表现差异,为进一步将肌肉骨骼超声纳入RA中医辨证体系提供依据。方法选取2017年4月-2018年4月在中日友好医院中医风湿病科住院及于门诊就诊的RA患者120例为研究对象。参照《中药新药临床研究指导原则》将患者分为湿热痹阻证、肝肾亏虚证、寒湿痹阻证、痰瘀痹阻证4大临床常见证候类型。收集患者性别、年龄、病程、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、抗环瓜氨酸多肽抗体(ACPA)、类风湿因子(RF)[由于ACPA与RF是呈指数级进行增加的,为处理数据方便本研究使用ln(ACPA+1)及ln(RF+1)进行数据统计],记录28关节压痛关节数目(TJC28)、28关节肿胀关节数目(SJC28)及一般情况(GH)自我评估得分,计算28关节疾病活动度(DAS28)。对患者行28关节肌肉骨骼超声检查,记录其滑膜炎关节数、滑膜炎积分、多普勒血流信号(PD)关节数、PD积分、骨侵蚀关节数。结果 120例患者中医证候辨证分型:湿热痹阻证42例、肝肾亏虚证32例、寒湿痹阻证25例、痰瘀痹阻证21例。肝肾亏虚证患者病程长于湿热痹阻证、痰瘀痹阻证患者(P<0.05);肝肾亏虚证、寒湿痹阻证、痰瘀痹阻证患者CRP、ESR、ln(RF+1)、SJC28、GH自我评估得分、DAS28低于湿热痹阻证患者(P<0.05);寒湿痹阻证、痰瘀痹阻证患者TJC28低于湿热痹阻证患者(P<0.05)。湿热痹阻证、肝肾亏虚证患者滑膜炎关节数、滑膜炎积分大于寒湿痹阻证、痰瘀痹阻证患者(P<0.05);湿热痹阻证患者PD关节数、PD积分大于肝肾亏虚证、寒湿痹阻证、痰瘀痹阻证患者(P<0.05);湿热痹阻证患者骨侵蚀关节数小于肝肾亏虚证患者,大于寒湿痹阻证患者(P<0.05);肝肾亏虚证患者骨侵蚀关节数大于寒湿痹阻证、痰瘀痹阻证患者(P<0.05)。结论 RA的临床指标与中医证候具有密切关联,其中湿热痹阻证患者处于较高的疾病活动状态。同时中医证候与RA患者28关节肌肉骨骼超声下表现亦有一定的关联,湿热痹阻证与滑膜炎及PD密切相关,而肝肾亏虚证伴随着较多的骨侵蚀关节数。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 证候 超声检查 肌肉骨骼系统
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基于网络药理学探究骨碎补总黄酮治疗类风湿性关节炎的作用机制 被引量:5
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作者 刘潇予 陈光耀 +2 位作者 吴子彧 金琦 陶庆文 《海南医学院学报》 CAS 2022年第22期1732-1740,共9页
目的:基于网络药理学探究骨碎补总黄酮治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的作用机制,为进一步的研究提供基础。方法:利用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)获取骨碎补总黄酮的活性成分,通过TCMSP、Pubchem、Swiss Target ... 目的:基于网络药理学探究骨碎补总黄酮治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的作用机制,为进一步的研究提供基础。方法:利用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)获取骨碎补总黄酮的活性成分,通过TCMSP、Pubchem、Swiss Target Prediction和STITCH数据库预测骨碎补中有效黄酮类成分靶点,并通过Uniprot数据库获取标准靶点名称。通过Gen Bank、Gene Cards、Dis Ge NET和OMIM数据库检索RA疾病相关靶点。获取骨碎补药物靶点-RA的交集基因,使用STRING数据库构建蛋白互作网络以预测核心蛋白,进行GO功能富集分析与KEGG通路富集分析。构建骨碎补总黄酮治疗RA调控网络,并将骨碎补总黄酮活性成分与预测得到的核心靶点进行分子对接。结果:从骨碎补总黄酮中筛选出木犀草素、柚皮素、山奈酚等活性化合物共10个,预测得到有效靶点210个,筛选RA相关靶点2009个,得到骨碎补总黄酮-RA交集靶点123个。其中STAT3、MAPK1、MAPK3、AKT1、MAPK8、IL-6、TNF、MAPK14、IL-4、IL-2、VEGFA、IL-1β、MAPK9等可能为骨碎补总黄酮治疗RA的关键作用靶点。GO基因富集分析提示,转录调控及细胞因子活性调节可能是骨碎补总黄酮发挥RA治疗作用的关键途径。KEGG通路富集分析提示PI3K/AKT、IL-17、TNF-α、T细胞受体转导及Th17细胞分化调节等信号通路可能在骨碎补总黄酮治疗RA发挥重要作用。骨碎补总黄酮治疗RA调控网络提示,木犀草素与柚皮素可能是骨碎补总黄酮治疗RA的关键成分。分子对接提示木犀草素与核心靶点AKT1、PI3K和STAT3具有较好的亲和能力,可能通过改变分子构象进一步影响其磷酸化。结论:骨碎补总黄酮可能通过调控炎性相关细胞因子及相关传导途径,从而抑制RA的炎性反应,而PI3K/AKT通路可能是骨碎补总黄酮发挥治疗RA的重要途径。木犀草素是骨碎补总黄酮治疗RA的关键分子,并可能通过抑制相关核心蛋白的构象,进而调控磷酸化发挥下游途径作用。 展开更多
关键词 骨碎补总黄酮 类风湿关节炎 网络药理学 木犀草素
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类风湿关节炎超声下亚临床滑膜炎的特征分析 被引量:14
5
作者 陈光耀 胡琪 +3 位作者 徐愿 马骁 罗静 陶庆文 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2019年第6期735-738,共4页
背景亚临床滑膜炎指在超声或核磁共振下发现滑膜炎,而在临床体格检查中未发现关节肿胀。研究表明类风湿关节炎(RA)患者亚临床滑膜炎的关节具有骨破坏放射学进展,提示亚临床滑膜炎关节依旧处于疾病活动状态。目的探究RA超声下亚临床滑膜... 背景亚临床滑膜炎指在超声或核磁共振下发现滑膜炎,而在临床体格检查中未发现关节肿胀。研究表明类风湿关节炎(RA)患者亚临床滑膜炎的关节具有骨破坏放射学进展,提示亚临床滑膜炎关节依旧处于疾病活动状态。目的探究RA超声下亚临床滑膜炎的临床特征。方法选取2017年4月—2018年5月于中日友好医院中医风湿病科住院及门诊就诊的RA患者132例。分别采用临床体格检查及超声的方法评价掌指关节、近端指间关节、腕关节、肘关节、肩关节、膝关节包含的28关节,记录临床体格检查未发现关节肿胀而超声下发现滑膜炎的关节(即亚临床滑膜炎关节),并分析不同性别、年龄、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体RA患者亚临床滑膜炎关节数目。结果 132例RA患者中,男14例,女118例;18~44岁37例,45~59岁53例,60~75岁42例;ESR:正常43例,异常89例;CRP:正常45例,异常87例;RF:阴性34例,低滴度阳性56例,高滴度阳性42例;抗CCP抗体:阴性33例,低滴度阳性17例,高滴度阳性82例。亚临床滑膜炎数目:无亚临床滑膜炎患者26例,有亚临床滑膜炎患者106例。不同性别、年龄、ESR、CRP、RF患者亚临床滑膜炎关节数目比较,差异无统计学意义(P>0.05);抗CCP抗体高滴度阳性患者亚临床滑膜炎关节数目多于抗CCP抗体阴性、低滴度阳性患者(P<0.05)。结论抗CCP抗体高滴度阳性与RA患者亚临床滑膜炎的发生存在一定关系,提示该类患者除进行临床体格检查外,宜进行超声下亚临床滑膜炎的评估。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 滑膜炎 超声检查 抗环瓜氨酸肽抗体
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MicroRNA在强直性脊柱炎成骨、破骨机制中的作用 被引量:12
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作者 杨文雪 夏启胜 +5 位作者 陶庆文 周童亮 张兰 陈志华 阎小萍 孔维萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期402-406,共5页
炎性骨破坏和新骨形成是强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的典型病理改变,AS早期以炎症为主,晚期出现异位骨化和骨破坏,异位骨化和骨破坏两种矛盾的表现反映了强直性脊柱炎患者成骨与破骨过程之间的动态平衡被打破。其发病机制... 炎性骨破坏和新骨形成是强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的典型病理改变,AS早期以炎症为主,晚期出现异位骨化和骨破坏,异位骨化和骨破坏两种矛盾的表现反映了强直性脊柱炎患者成骨与破骨过程之间的动态平衡被打破。其发病机制尚不完全清楚,目前研究认为,AS复杂的新骨形成机制与Wnt/β-catenin信号通路及BMP/Smads通路密切相关,而破骨细胞则在骨破坏过程中起重要作用,RANKL/RANK/OPG系统中的细胞因子是调控破骨细胞分化成熟的关键因子。Micro RNA可调节成骨细胞、软骨细胞和破骨细胞的分化与功能,是骨形成、骨吸收、骨重塑和修复过程中的关键调节因子。研究MicroRNA在强直性脊柱炎成骨、破骨机制中的作用,可为AS的诊断和治疗提供新的依据。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 微小RNA 成骨细胞 破骨细胞
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强直性脊柱炎骨化临床研究进展 被引量:7
7
作者 徐愿 陶庆文 +1 位作者 孔维萍 阎小萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1504-1507,共4页
强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是脊柱关节病中最常见的疾病,早期以炎症为主,晚期可出现骨质疏松和骨化两种看似矛盾的表现,骨化的研究有助于AS的治疗。骨化是导致患者出现相关症状、功能障碍、甚至残疾的主要原因。骨化主要... 强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是脊柱关节病中最常见的疾病,早期以炎症为主,晚期可出现骨质疏松和骨化两种看似矛盾的表现,骨化的研究有助于AS的治疗。骨化是导致患者出现相关症状、功能障碍、甚至残疾的主要原因。骨化主要发生于脊柱,因为病变组织不易获取,且病程漫长,个体间差异大,目前研究进展缓慢。AS患者骨化平均每年改良的Stoke强直性脊柱炎脊柱评分(modified Stoke’s AS spine score,m SASSS)进展1分,仅不到30%的患者出现较快进展。基线时炎症与骨化进展有关,主要是红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、强直性脊柱炎疾病活动指数(ankylosing spondylitis disease activity score,ASDAS)等客观炎症指标,而与基于患者自我报告结果(patient-reported outcome,PRO)的Bath强直性脊柱炎疾病活动指数(bath ankylosing spondylitis disease activity index,BASDAI)关系不明确。此外,基线时已存在的骨化程度、磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)骨髓脂肪沉积、吸烟等也是骨化预测因素。非甾体抗炎药和肿瘤坏死因子拮抗剂对延缓AS病理性成骨的作用尚不明确。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 骨化 临床研究 研究进展
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男女强直性脊柱炎骨密度对比分析 被引量:3
8
作者 金玥 杨舒 +4 位作者 鄢泽然 朱笑夏 杨文雪 孔维萍 阎小萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期612-617,共6页
目的:探讨男性和女性强直性脊柱炎( Ankylosing Spondylitis,AS)患者骨密度( Bone mineral density,BMD)及BMD与其他临床指标的相关性。方法回顾性调查2006年3月至2014年12月中日友好医院中医风湿病科确诊为AS的患者,其中女性16... 目的:探讨男性和女性强直性脊柱炎( Ankylosing Spondylitis,AS)患者骨密度( Bone mineral density,BMD)及BMD与其他临床指标的相关性。方法回顾性调查2006年3月至2014年12月中日友好医院中医风湿病科确诊为AS的患者,其中女性168例,男性587例,年龄在20岁~45岁,双光能X线法检测腰椎、股骨颈、股骨粗隆的BMD,并与年龄、病程、疾病活动性指标、影像学指标进行相关分析。结果①男性AS患者腰椎BMD较女性腰椎BMD显著减低( P<0.01);男性AS患者骨质疏松(Osteoporosis,OP)及骨量减少(Osteopenia,OT)总发生率为71.04%,显著高于女性AS患者的42.86%(P<0.05),且在腰椎、股骨颈、股骨粗隆部位的OP、OT发生率均显著高于女性AS患者(P<0.01);②中年龄组(30~39岁)及高年龄组(40~45岁)的AS患者中男性腰椎BMD较女性显著降低( P<0.01);高年龄组AS患者中男性股骨颈BMD较女性显著降低( P<0.01);病程5~10年及大于10年的AS患者中男性腰椎、股骨颈BMD较女性显著降低( P<0.01、P<0.01、P<0.01、P<0.05)③相关性分析显示男性与女性AS患者BMD与疾病活动指标ESR、CRP,体征、骶髂关节炎分级等有相关性,而男性AS患者BMD与年龄、病程尚呈显著负相关( P<0.05)。结论男女AS患者均有较高的OT、OP的发生率,且男性OT及OP的较之女性更为显著,特别是腰椎BMD男性AS患者减低更为突出。此外年龄越大、病程越长的男性AS患者BMD减低程度越明显。男性与女性AS患者BMD的下降均与疾病程度、病情的活动性、肢体活动功能、HLA-B27相关联。对于男性AS患者更需要重视OT及OP的诊断与防治。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 BMD 性别
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早期强直性脊柱炎骨密度分析 被引量:10
9
作者 甘晓维 金玥 +7 位作者 朱笑夏 陶庆文 张英泽 罗静 杨文雪 卢文昭 孔维萍 阎小萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期962-965,共4页
目的探讨早期强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者骨密度(bone mineral density,BMD)及BMD与其他临床指标的相关性。方法回顾性研究调查2006年3月至2014年12月中日友好医院中医风湿病科确诊为早期AS患者120例,其中女性57例,平... 目的探讨早期强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者骨密度(bone mineral density,BMD)及BMD与其他临床指标的相关性。方法回顾性研究调查2006年3月至2014年12月中日友好医院中医风湿病科确诊为早期AS患者120例,其中女性57例,平均年龄(31.02±5.94)岁;男性63岁,平均年龄(29.79±6.87)岁。健康人107例,其中女性48例,平均年龄(32.97±6.47)岁;男性59例,平均年龄(29.58±6.65)岁。双光能X线法检测腰椎、股骨颈、股骨粗隆的BMD与年龄、病程、疾病活动性指标、影像学指标进行相关分析。结果 (1)早期AS男性患者各部位的BMD均较健康人减低(P<0.01),而女性患者则和健康人无统计学差异。(2)早期AS患者骨质疏松(osteoporosis,OP)6例(5%),骨量减少(osteopenia,OT)36例(21.67%)。其中男性早期AS患者腰椎OP者5例(7.93%),OT者29例(46.03%)。早期AS患者中,男性腰椎部位OP、OT发生率较女性高(P<0.05),股骨颈及股骨粗隆部位OP/OT发生率无差异。(3)中、低年龄组中,早期AS患者的腰椎和股骨颈BMD较健康人显著减低,差异有统计学差异(P<0.01)。(4)男性早期AS患者腰椎BMD与年龄呈显著负相关(P<0.01)。结论早期AS男性患者即可出现显著BMD下降,OP发生率为7.93%,OT发生率为46.03%。其中腰椎部位BMD减低及OT发生率更为突出。早期AS患者BMD的下降与疾病活动指标无关联。对于男性AS患者,在疾病早期即需要重视OT及OP的诊断与防治。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 骨密度 骨质疏松
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地塞米松对骨关节炎细胞模型基质金属蛋白酶的抑制作用
10
作者 陈光耀 陈嘉琪 +4 位作者 姚传辉 徐愿 罗静 鄢泽然 陶庆文 《海南医学院学报》 CAS 2021年第10期757-762,767,共7页
目的:探讨不同浓度地塞米松对白介素-1β(IL-1β)诱导的SW1353细胞骨关节炎细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)表达水平的抑制作用。方法:取人软骨肉瘤细胞(SW1353细胞)分别置于含浓度为10^(1)~10^(8)nmol/L地塞米松培... 目的:探讨不同浓度地塞米松对白介素-1β(IL-1β)诱导的SW1353细胞骨关节炎细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)表达水平的抑制作用。方法:取人软骨肉瘤细胞(SW1353细胞)分别置于含浓度为10^(1)~10^(8)nmol/L地塞米松培养液中,培养12 h后采用MTS法筛选适宜的地塞米松浓度范围进行后续实验。将SW1353细胞使用10 ng/mL IL-1β进行致炎造模后,给予10^(1)~10^(7)nmol/L地塞米松干预,使用实时定量-聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测MMP-1、MMP-3、MMP-13的mRNA表达水平。选取10^(4)nmol/L地塞米松干预后提取MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白,使用Western Blot法检测其蛋白表达水平。结果:MTS增殖实验结果显示,10^(1)~10^(7)nmol/L地塞米松对SW1353细胞活性无明显影响,10^(8)nmol/L地塞米松对SW1353有明显抑制作用(P<0.05),加入10 ng/mL IL-1β后对细胞增殖无明显影响。RT-PCR结果提示,IL-1β组和空白对照组比较,MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA的表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。和IL-1β组相比,10^(2)~10^(7)nmol/L浓度地塞米松干预后,MMP-1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05);10^(4)~10^(7)nmol/L地塞米松干预后,MMP-3 mRNA表达水平明显降低(P<0.05);10^(1)~10^(7)nmol/L地塞米松干预后,MMP-13 mRNA水平明显减少(P<0.05)。Western blot结果显示,相对于空白对照组,IL-1β组MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白表达水平明显增加;继续加入10^(4)nmol/L地塞米松干预后MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白表达水平明显降低。结论:地塞米松能够在mRNA及蛋白质水平抑制IL-1β诱导的骨关节炎细胞模型MMP-1、MMP-3、MMP-13的表达。 展开更多
关键词 骨关节炎 地塞米松 SW1353细胞 白介素-1Β
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基于Wnt/β-catenin通路探究骨痹通方对软骨基质的保护作用及其机制 被引量:2
11
作者 鄢泽然 陈光耀 +3 位作者 陈嘉琪 徐愿 罗静 陶庆文 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2021年第24期3122-3128,共7页
背景骨痹通方对骨关节炎(OA)具有较好的临床治疗效果,对OA模型大鼠软骨具有良好的保护作用,但其具体作用机制尚不明确。目的基于Wnt/β-catenin通路探究骨痹通方对软骨基质的保护作用及其机制。方法本研究于2020年6—9月完成。采用3-(4... 背景骨痹通方对骨关节炎(OA)具有较好的临床治疗效果,对OA模型大鼠软骨具有良好的保护作用,但其具体作用机制尚不明确。目的基于Wnt/β-catenin通路探究骨痹通方对软骨基质的保护作用及其机制。方法本研究于2020年6—9月完成。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTS)法检测SW1353软骨肉瘤细胞活力。通过白介素1β(IL-1β)介导的SW1353软骨肉瘤细胞建立OA细胞模型,设置A组、B组、C组、D组、E组,其中A组为空白对照,B组为阳性对照(加入10μg/L的IL-1β),C组、D组、E组加入10μg/L的IL-1β后分别加入低剂量(625 mg/L)、中剂量(1250 mg/L)、高剂量(2500 mg/L)骨痹通方溶液。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)mRNA表达情况,采用Western-blotting检测MMP-1、MMP-3、MMP-13、β-catenin蛋白表达情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MMP-1、MMP-3、MMP-13分泌情况。结果浓度为3000 mg/L的骨痹通方溶液对SW1353软骨肉瘤细胞活力有一定抑制作用(P<0.05)。B组、C组、D组、E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA相对表达量高于A组,但C组细胞MMP-1、MMP-3 mRNA相对表达量低于B组,D组、E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA相对表达量低于B组、C组,E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA相对表达量低于D组(P<0.05)。B组、C组、D组、E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白相对表达量高于A组,但C组细胞MMP-1、MMP-3蛋白相对表达量及D组、E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白相对表达量低于B组,D组细胞MMP-1、MMP-13及E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白相对表达量低于C组,E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白相对表达量低于D组(P<0.05)。B组、C组、D组、E组细胞上清液MMP-1、MMP-3、MMP-13含量高于A组,但C组、D组、E组细胞上清液MMP-1、MMP-3、MMP-13含量低于B组,D组、E组细胞上清液MMP-1、MMP-3、MMP-13含量低于C组,E组细胞上清液MMP-1、MMP-3、MMP-13含量低于D组(P<0.05)。分别在B组基础上加入5μmol/L Wnt/β-catenin通路激活剂WAY-262611溶液(F组)、10μmol/L地塞米松溶液(G组)。B组、C组、D组、E组、F组、G组细胞MMP-13、β-catenin蛋白相对表达量高于A组,F组细胞MMP-13、β-catenin蛋白相对表达量高于B组、C组、D组、E组、G组,但D组、E组、G组细胞MMP-13蛋白相对表达量及E组、G组细胞β-catenin蛋白相对表达量低于B组、C组,G组细胞MMP-13蛋白相对表达量及E组、G组细胞β-catenin蛋白相对表达量低于D组,G组细胞MMP-13、β-catenin蛋白相对表达量低于E组(P<0.05)。结论骨痹通方对软骨基质具有一定保护作用且存在一定剂量依赖效应,抑制基质金属蛋白酶(MMPs)的过度表达及Wnt/β-catenin通路异常激活可能是其发挥软骨基质保护作用的重要机制。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨 骨基质 骨痹通方 基质金属蛋白酶类 WNT信号通路
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