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应用代谢组学方法研究肠内给予丙氨酰谷氨酰胺对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用 被引量:6
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作者 李赟 吴晓滨 +5 位作者 杜艳萍 刘中辉 刁德昌 宋虎 王华摄 彭俊生 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第3期234-240,共7页
目的代谢组学(metabonomics)是生物学研究的新的平台,它可以通过发现生物标本中代谢物质谱的变化进而从机体整体或特定器官代谢状态的角度去评估营养干预措施的作用。丙氨酰谷氨酰胺(alanyl-glutamine,Ala-Gln)是临床上常用的人工合成... 目的代谢组学(metabonomics)是生物学研究的新的平台,它可以通过发现生物标本中代谢物质谱的变化进而从机体整体或特定器官代谢状态的角度去评估营养干预措施的作用。丙氨酰谷氨酰胺(alanyl-glutamine,Ala-Gln)是临床上常用的人工合成的含谷氨酰胺(glutamine,Gln)的二肽,在创伤修复过程中发挥重要的作用。文中利用代谢组学的方法观察肠内给予Ala-Gln对Sprague-Dawley(SD)大鼠肠缺血再灌注损伤(intestine ischemia reperfusion injury,IIRI)模型门静脉血代谢谱的影响,并同时探讨其与小肠组织学和局部炎症反应的关系。方法 32只SD大鼠分为假手术(sham operation,S)组(n=8),IIRI组(n=8),Ala-Gln组(n=8)和丙氨酸(alanine,Ala)组(n=8)。除S组外的其余大鼠均通过结扎肠系膜上动脉(superior mesenteric artery,SMA)给予60 min的缺血过程。Ala-Gln组和Ala组从缺血前3 d至再灌注72 h后(肠缺血当天除外)分别通过灌胃给予Ala-Gln(0.6 g.kg-1.d-1)或Ala(0.6g.kg-1.d-1),再灌注72h后取门静脉血上气相色谱质谱联机(gas chromatography coupled with mass spectrometry,GC/MS)进行代谢物质的分离和识别。代谢组数据通过SIMCA-P+12.0软件进行偏最小二乘法(partial least squares,PLS)分析,得出得分图、载荷图及各种物质的变量重要性因子(variable importancein the projection,VIP)值。同时进行小肠病理学检查及门静脉血肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白介素(Inter-leukins,IL)-1、6、10浓度检测。结果 PLS分析的得分图能够较明显地区别各组标本。根据VIP值和载荷图,研究发现3种有意义的差异物质分别是葡萄糖(VIP值3.36008)、尿素(VIP值2.81043)和胆固醇(VIP值1.00429)。Ala-Gln能明显缓解IIRI后门静脉血葡萄糖(P<0.01)丰度的降低以及尿素(P<0.01)和胆固醇(P<0.01)丰度的升高。Ala-Gln能部分改善IIRI所致的小肠组织学改变并缓解肠门静脉血TNF-α、IL-1、IL-6和IL-10的变化。而Ala对该IIRI模型并未表现出保护作用。结论肠内给予Ala-Gln有利于维持IIRI后大鼠肠道组织的代谢稳定,该作用与Ala-Gln对肠黏膜完整性的保护和对肠道炎症反应的抑制有关。 展开更多
关键词 代谢组学 再灌注损伤 肠道 谷氨酰胺 二肽
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蛋白质组学检测结直肠腺瘤及早期恶变患者血清的差异蛋白质变化及意义 被引量:6
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作者 吴晓滨 彭俊生 +7 位作者 李初俊 王辉 杜艳平 杨祖立 向军 胡坤华 刘炜 黎明涛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1098-1103,共6页
目的:通过比较分析结直肠腺瘤及早期恶变患者血清蛋白质的表达差异,寻找结直肠癌早期诊断的血清标记物。方法:建立结直肠腺瘤及腺瘤早期恶变患者血清蛋白双向电泳图谱,比较分析差异蛋白质斑点,切取酶解行MALDI-TOF/TOF质谱分析鉴定。结... 目的:通过比较分析结直肠腺瘤及早期恶变患者血清蛋白质的表达差异,寻找结直肠癌早期诊断的血清标记物。方法:建立结直肠腺瘤及腺瘤早期恶变患者血清蛋白双向电泳图谱,比较分析差异蛋白质斑点,切取酶解行MALDI-TOF/TOF质谱分析鉴定。结果:成功建立结直肠腺瘤及早期恶变患者血清蛋白双向电泳图谱,其平均蛋白质点分别为1672±73和1732±46,早期恶变组表达差异大于1.5倍的蛋白质斑点有28个,其中15个下调,13个上升;质谱分析鉴定出23个蛋白质,鉴定率达82.14%;合并重复鉴定的蛋白质,共获得的差异蛋白13种,其中8种为上调蛋白,5种为下调蛋白,分为6类,包括蛋白酶抑制剂、补体系统、免疫球蛋白、角质素、信号转导蛋白及未知蛋白。结论:蛋白质组学技术能灵敏分析结直肠腺瘤及早期恶变患者血清蛋白质的异常改变,本研究鉴定的蛋白质可能成为结直肠癌早期诊断的血清肿瘤标记物。 展开更多
关键词 结直肠腺瘤 结直肠腺癌 蛋白质组
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胃癌血清脂肪酸和脂肪酸酰胺水平的变化及其意义 被引量:2
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作者 宋虎 彭俊生 +5 位作者 杜艳平 杨祖立 吴晓滨 向军 王华摄 刁德昌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第16期2947-2950,共4页
目的:调查胃癌血清脂肪酸和脂肪酸酰胺的改变并探讨与胃癌相关的特征性小分子标记物。方法:利用GC/MS对30例胃癌和30例健康血清的脂肪酸和脂肪酸酰胺进行定量分析。结果:分析获得11种脂肪酸和3种脂肪酸酰胺,利用OPLS-DA建模可以较好地... 目的:调查胃癌血清脂肪酸和脂肪酸酰胺的改变并探讨与胃癌相关的特征性小分子标记物。方法:利用GC/MS对30例胃癌和30例健康血清的脂肪酸和脂肪酸酰胺进行定量分析。结果:分析获得11种脂肪酸和3种脂肪酸酰胺,利用OPLS-DA建模可以较好地区分胃癌组和对照组,并且发现4种脂肪酸的变化具有统计学差异,8种脂肪酸对两组患者的区分作用具有较大的贡献(VIP值>1)。结论:本实验发现胃癌血清中脂肪酸和脂肪酸酰胺的代谢发生了紊乱,血清脂类对于该病的诊断具有很大的潜力。 展开更多
关键词 胃肿瘤 脂肪酸 脂肪酸酰胺 血清
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结直肠癌组织多基因甲基化的检测及其临床意义 被引量:2
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作者 黄美近 康亮 +4 位作者 邓艳红 杨祖立 王磊 兰平 汪建平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1946-1949,共4页
目的:检测结直肠癌组织中脾酪氨酸激酶(Syk)、E-钙黏附素(E-cadherin,CDH1)和组织金属蛋白酶抑制因子-3(TIMP-3)多基因甲基化水平,并探讨多基因甲基化在结直肠癌发病机制中的作用与复发转移和术后预后的关系。方法:采用巢式甲基化特异性... 目的:检测结直肠癌组织中脾酪氨酸激酶(Syk)、E-钙黏附素(E-cadherin,CDH1)和组织金属蛋白酶抑制因子-3(TIMP-3)多基因甲基化水平,并探讨多基因甲基化在结直肠癌发病机制中的作用与复发转移和术后预后的关系。方法:采用巢式甲基化特异性PCR(n-MSP)方法检测120例结直肠癌肿瘤组织Syk的甲基化水平,及其中100例结直肠癌肿瘤组织CDH1和TIMP-3的甲基化水平。结果:1个及以上基因共甲基化率为74%,2个基因同时甲基化率为21%,3个基因共同甲基化为8%。3个基因同时甲基化阳性与淋巴结转移无关(2=0.725,P>0.05);CDH1基因甲基化与肝肺转移显著相关(2=6.938,P<0.01),Syk和TIMP-3基因甲基化与肝肺转移无关;Syk甲基化、TIMP-3甲基化、CDH1及TIMP-3同时甲基化是结直肠癌术后生存的相对危险因素,而3个基因同时甲基化则是非相对危险因素。结论:结直肠癌组织中存在多基因共同甲基化率,多基因共同甲基化在结直肠癌发病机制、侵袭复发机制及影响预后生存中并非必需条件。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 多基因甲基化 肿瘤侵润
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吲哚美辛诱导的胃癌细胞凋亡与Wnt/β-连接蛋白信号通路及其下游凋亡调控蛋白的关系 被引量:1
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作者 李赟 吴晓滨 +4 位作者 林义佳 陈泓磊 宋虎 向军 彭俊生 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第20期3341-3344,共4页
目的:探讨Wnt/β-连接蛋白(Catenin)信号通路及其下游凋亡调控蛋白Bcl-2和Caspase-3的表达与吲哚美辛引起的胃癌细胞凋亡的关系。方法:用终浓度为50、100、200μmol/L的吲哚美辛干预SGC7901细胞24h,并设不加吲哚美辛的对照组。用CCK8法... 目的:探讨Wnt/β-连接蛋白(Catenin)信号通路及其下游凋亡调控蛋白Bcl-2和Caspase-3的表达与吲哚美辛引起的胃癌细胞凋亡的关系。方法:用终浓度为50、100、200μmol/L的吲哚美辛干预SGC7901细胞24h,并设不加吲哚美辛的对照组。用CCK8法检测细胞增殖活性,用TUNEL法检测涂片中胃癌细胞的凋亡率,用Western blot法检测细胞内β-Catenin、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。结果:SGC7901细胞在50μmol/L的吲哚美辛作用24h后细胞存活率为(92.71±4.81)%,100和200μmol/L浓度组的细胞存活率则明显降低。对照组细胞的凋亡率为0,吲哚美辛干预后的细胞的凋亡率明显升高。对照组β-Catenin和Bcl-2蛋白表达最高而Caspase-3表达最低。吲哚美辛干预后β-Catenin和Bcl-2的表达明显降低,Caspase-3表达明显增高,且表现出明显的浓度依赖性。结论:Wnt/β-Catenin信号通路在吲哚美辛引导的SGC7901细胞凋亡过程中发挥重要的作用,其下游调控蛋白Bcl-2、Caspase-3共同参与了这一过程的调控。 展开更多
关键词 胃肿瘤 细胞凋亡 吲哚美辛 WNT/Β-CATENIN通路
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