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大鼠脑源性神经营养因子基因T载体的构建及鉴定
被引量：
3
1
作者
吴燕峰
王鹏
+3 位作者
唐勇
黄霖
杨睿
沈慧勇
《中国脊柱脊髓杂志》
CAS
CSCD
2006年第4期291-294,共4页
目的:探讨利用T载体完成大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)聚合酶链式反应(polymerasechainreac-tion,PCR)产物克隆的可行性。方法:提取大鼠脑组织总RNA,利用M-MLV逆转录酶及oligo-dT引物逆转录合成cDNA第一条链,再利用exTaq酶及BDNF上、下...
目的:探讨利用T载体完成大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)聚合酶链式反应(polymerasechainreac-tion,PCR)产物克隆的可行性。方法:提取大鼠脑组织总RNA,利用M-MLV逆转录酶及oligo-dT引物逆转录合成cDNA第一条链,再利用exTaq酶及BDNF上、下游引物扩增出BDNFcDNA,最后利用BufferⅠ连接液将BDNF基因克隆入T载体用于测序及下一步克隆。结果:成功构建了BDNF基因T载体,经双脱氧链终止法测序证实为大鼠BDNF基因。结论:利用T载体克隆BDNF基因PCR产物简便、快捷,成功率高。
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关键词
脑源性神经营养因子
T载体
基因克隆
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题名
大鼠脑源性神经营养因子基因T载体的构建及鉴定
被引量：
3
1
作者
吴燕峰
王鹏
唐勇
黄霖
杨睿
沈慧勇
机构
中山大学附属第二医院脐血库中山大学脊髓损伤研究所
中山大学
附属
第二
医院
骨科
中山大学
脊髓
损伤
研究所
出处
《中国脊柱脊髓杂志》
CAS
CSCD
2006年第4期291-294,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(基金编号30271311)
广东省自然科学基金资助项目(基金编号36642)
+1 种基金
广东省科技厅重大项目(基金编号2004A30201002)
广州市科委重大项目(2003Z-E-0011)
文摘
目的:探讨利用T载体完成大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)聚合酶链式反应(polymerasechainreac-tion,PCR)产物克隆的可行性。方法:提取大鼠脑组织总RNA,利用M-MLV逆转录酶及oligo-dT引物逆转录合成cDNA第一条链,再利用exTaq酶及BDNF上、下游引物扩增出BDNFcDNA,最后利用BufferⅠ连接液将BDNF基因克隆入T载体用于测序及下一步克隆。结果:成功构建了BDNF基因T载体,经双脱氧链终止法测序证实为大鼠BDNF基因。结论:利用T载体克隆BDNF基因PCR产物简便、快捷,成功率高。
关键词
脑源性神经营养因子
T载体
基因克隆
Keywords
brain derived neurotrophic factor
T-vector
Gene cloning
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大鼠脑源性神经营养因子基因T载体的构建及鉴定
吴燕峰
王鹏
唐勇
黄霖
杨睿
沈慧勇
《中国脊柱脊髓杂志》
CAS
CSCD
2006
3
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