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CFTR通过调控二磷酸腺苷受体P2Y_(12)影响血小板活化
被引量：
4
1
作者
李俊
杨涵滟
+2 位作者
韩慧
李梅
王冠蕾
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期521-527,共7页
【目的】二磷酸腺苷受体P2Y_(12)介导的血小板活化是血小板活化及血栓形成的核心机制,本研究探讨囊性纤维化跨膜转导调节子(CFTR)对P2Y_(12)介导的血小板活化的影响。【方法】应用8~16周龄CFTR全基因敲除(Cftr^(-/-) )小鼠及野生型(Cftr...
【目的】二磷酸腺苷受体P2Y_(12)介导的血小板活化是血小板活化及血栓形成的核心机制,本研究探讨囊性纤维化跨膜转导调节子(CFTR)对P2Y_(12)介导的血小板活化的影响。【方法】应用8~16周龄CFTR全基因敲除(Cftr^(-/-) )小鼠及野生型(Cftr^(+/+) )小鼠,分别制备胶原蛋白和肾上腺素诱导的肺栓塞小鼠模型。分离Cftr^(-/-) 和Cftr^(+/+) 小鼠外周血的血小板,采用免疫印迹技术检测P2Y_(12)、PI3K以及AKT总蛋白及磷酸化蛋白的表达。采用二磷酸腺苷(ADP)孵育人巨核细胞株Meg-01,检测ADP对CFTR和上述蛋白表达的影响。进一步应用特异性CFTR氯通道抑制剂CFTRinh-172与Meg-01细胞共孵育,检测其对CFTR和上述蛋白表达的影响。【结果】与Cftr^(+/+) 小鼠肺栓塞模型组相比,Cftr^(-/-) 鼠肺栓塞组织切片栓塞显著增加。Cftr^(-/-) 显著增加小鼠外周血血小板P2Y_(12)、磷酸化PI3K和AKT蛋白表达。P2Y_(12)全基因敲除小鼠血小板CFTR蛋白表达无明显改变,上述结果提示CFTR负性调控P2Y_(12)维持正常血小板活化功能。Meg-01细胞实验结果表明ADP浓度依赖性地诱导Meg-01细胞P2Y_(12)蛋白和PI3K以及AKT蛋白磷酸化增高,而CFTR蛋白表达水平逐渐降低。CFTR特异性阻断剂CFTRinh-172显著诱导Meg-01细胞P2Y_(12)蛋白表达增高。【结论】本研究揭示了血小板活化的一个新机制,即CFTR通过调控血小板P2Y_(12)蛋白表达影响血小板活化。
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关键词
囊性纤维化跨膜转导调节子
P2Y_(12)
血小板
活化
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职称材料
CFTR氯通道调控小鼠内毒素血症血小板活化及炎症因子生成
被引量：
1
2
作者
胡瑞
周仪
+1 位作者
李梅
王冠蕾
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第3期344-351,共8页
【目的】囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)氯通道参与血小板活化的调控。本研究探讨CFTR氯通道对脂多糖(LPS)引起的内毒素血症过程中血小板活化、血小板数目及血小板介导炎症因子生成的影响。【方法】应用8~12周龄CFTR全基因敲除(Cftr-...
【目的】囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)氯通道参与血小板活化的调控。本研究探讨CFTR氯通道对脂多糖(LPS)引起的内毒素血症过程中血小板活化、血小板数目及血小板介导炎症因子生成的影响。【方法】应用8~12周龄CFTR全基因敲除(Cftr-/-)小鼠及野生型(Cftr+/+)小鼠,制备股静脉注射LPS诱导内毒素血症模型。分离小鼠外周血的血小板,采用免疫印迹法检测TLR4蛋白的表达,采用实时定量PCR法检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α和CRP的表达。采用腺病毒介导的CFTRcDNA过表达(Ad-CFTR)和应用CFTR矫正剂VX-661处理人巨核细胞株MEG-01,检测CFTR对LPS引起的上述指标变化的影响。【结果】Cftr+/+小鼠静脉注射LPS后,外周血血小板TLR4和P-selectin表达增加、血小板数目减少、血小板表达促炎炎症因子mRNA水平升高,而CFTR全基因敲除加重之(P<0.05)。体外MEG-01人巨核细胞应用LPS刺激后,CFTR蛋白表达降低,TLR4蛋白表达升高,LPS上调IL-1β、CRP、TNF-α而下调IL-10表达(P<0.01);Ad-CFTR或VX661可部分或全部逆转上述效应(P<0.01)。【结论】本研究揭示了CFTR氯通道可调控血小板活化及血小板TLR4介导的炎症因子生成。
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关键词
CFTR
LPS
血小板
内毒素血症
炎症因子
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职称材料
题名
CFTR通过调控二磷酸腺苷受体P2Y_(12)影响血小板活化
被引量：
4
1
作者
李俊
杨涵滟
韩慧
李梅
王冠蕾
机构
中山大学
中山
医学院药理学教研室和心脑血管研究中心
中山大学附属第三医院特诊医疗病区
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期521-527,共7页
基金
国家自然科学基金(81773722,82073848)
广州市民生科技攻关计划(201803010092)。
文摘
【目的】二磷酸腺苷受体P2Y_(12)介导的血小板活化是血小板活化及血栓形成的核心机制,本研究探讨囊性纤维化跨膜转导调节子(CFTR)对P2Y_(12)介导的血小板活化的影响。【方法】应用8~16周龄CFTR全基因敲除(Cftr^(-/-) )小鼠及野生型(Cftr^(+/+) )小鼠,分别制备胶原蛋白和肾上腺素诱导的肺栓塞小鼠模型。分离Cftr^(-/-) 和Cftr^(+/+) 小鼠外周血的血小板,采用免疫印迹技术检测P2Y_(12)、PI3K以及AKT总蛋白及磷酸化蛋白的表达。采用二磷酸腺苷(ADP)孵育人巨核细胞株Meg-01,检测ADP对CFTR和上述蛋白表达的影响。进一步应用特异性CFTR氯通道抑制剂CFTRinh-172与Meg-01细胞共孵育,检测其对CFTR和上述蛋白表达的影响。【结果】与Cftr^(+/+) 小鼠肺栓塞模型组相比,Cftr^(-/-) 鼠肺栓塞组织切片栓塞显著增加。Cftr^(-/-) 显著增加小鼠外周血血小板P2Y_(12)、磷酸化PI3K和AKT蛋白表达。P2Y_(12)全基因敲除小鼠血小板CFTR蛋白表达无明显改变,上述结果提示CFTR负性调控P2Y_(12)维持正常血小板活化功能。Meg-01细胞实验结果表明ADP浓度依赖性地诱导Meg-01细胞P2Y_(12)蛋白和PI3K以及AKT蛋白磷酸化增高,而CFTR蛋白表达水平逐渐降低。CFTR特异性阻断剂CFTRinh-172显著诱导Meg-01细胞P2Y_(12)蛋白表达增高。【结论】本研究揭示了血小板活化的一个新机制,即CFTR通过调控血小板P2Y_(12)蛋白表达影响血小板活化。
关键词
囊性纤维化跨膜转导调节子
P2Y_(12)
血小板
活化
Keywords
CFTR
P2Y_(12)
platelet
activation
分类号
R96 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
CFTR氯通道调控小鼠内毒素血症血小板活化及炎症因子生成
被引量：
1
2
作者
胡瑞
周仪
李梅
王冠蕾
机构
中山大学
中山
医学院药理学教研室和心脑血管研究中心
中山大学附属第三医院特诊医疗病区
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第3期344-351,共8页
基金
国家自然科学基金(81773722,82073848)
广州市民生科技攻关计划(201803010092)。
文摘
【目的】囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)氯通道参与血小板活化的调控。本研究探讨CFTR氯通道对脂多糖(LPS)引起的内毒素血症过程中血小板活化、血小板数目及血小板介导炎症因子生成的影响。【方法】应用8~12周龄CFTR全基因敲除(Cftr-/-)小鼠及野生型(Cftr+/+)小鼠,制备股静脉注射LPS诱导内毒素血症模型。分离小鼠外周血的血小板,采用免疫印迹法检测TLR4蛋白的表达,采用实时定量PCR法检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α和CRP的表达。采用腺病毒介导的CFTRcDNA过表达(Ad-CFTR)和应用CFTR矫正剂VX-661处理人巨核细胞株MEG-01,检测CFTR对LPS引起的上述指标变化的影响。【结果】Cftr+/+小鼠静脉注射LPS后,外周血血小板TLR4和P-selectin表达增加、血小板数目减少、血小板表达促炎炎症因子mRNA水平升高,而CFTR全基因敲除加重之(P<0.05)。体外MEG-01人巨核细胞应用LPS刺激后,CFTR蛋白表达降低,TLR4蛋白表达升高,LPS上调IL-1β、CRP、TNF-α而下调IL-10表达(P<0.01);Ad-CFTR或VX661可部分或全部逆转上述效应(P<0.01)。【结论】本研究揭示了CFTR氯通道可调控血小板活化及血小板TLR4介导的炎症因子生成。
关键词
CFTR
LPS
血小板
内毒素血症
炎症因子
Keywords
CFTR
LPS
platelets
endotoxemia
inflammatory cytokines
分类号
R96 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CFTR通过调控二磷酸腺苷受体P2Y_(12)影响血小板活化
李俊
杨涵滟
韩慧
李梅
王冠蕾
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021
4
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下载PDF
职称材料
2
CFTR氯通道调控小鼠内毒素血症血小板活化及炎症因子生成
胡瑞
周仪
李梅
王冠蕾
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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