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舒洛地特通过抑制NOX4/NLRP3通路减轻高糖诱导的视网膜血管损伤
被引量:
9
1
作者
李婷
何学敏
+5 位作者
彭荣东
李静仁
付夏楠
周丽
石国军
陈燕铭
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期577-587,共11页
目的:观察舒洛地特(SDX)在糖尿病状态下对视网膜微血管内皮细胞的保护作用。方法:(1)采用高脂喂养及腹腔注射链脲佐菌素的方法构建C57BL/6小鼠的2型糖尿病模型,对小鼠腹腔注射SDX或等体积生理盐水治疗12周。用伊文思蓝法检测视网膜微血...
目的:观察舒洛地特(SDX)在糖尿病状态下对视网膜微血管内皮细胞的保护作用。方法:(1)采用高脂喂养及腹腔注射链脲佐菌素的方法构建C57BL/6小鼠的2型糖尿病模型,对小鼠腹腔注射SDX或等体积生理盐水治疗12周。用伊文思蓝法检测视网膜微血管渗漏及微血管密度改变;用Western blot、免疫荧光等方法检测各组小鼠视网膜中NLRP3炎症小体成分、紧密连接蛋白1(ZO-1)及NADPH氧化酶4(NOX4)的表达情况。(2)用高糖处理人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs),并与梯度浓度的SDX共处理;用腺病毒感染HRMECs以过表达NOX4或者用siRNA转染HRMECs以敲减NOX4,观察NLRP3炎症小体成分、NOX4、ZO-1和VE-钙黏着蛋白(VE-Cad)的表达情况,以及活性氧簇(ROS)的生成情况。结果:(1)SDX处理增加糖尿病小鼠视网膜中ZO-1蛋白的表达,抑制糖尿病小鼠视网膜微血管渗漏,增加糖尿病小鼠视网膜微血管密度和节细胞数量,并抑制NLRP3炎症小体的活化(P<0.05)。(2)在高糖刺激的HRMECs中,SDX处理增加ZO-1和VE-Cad蛋白的表达,显著抑制NLRP3炎症小体活化及NOX4介导的ROS生成(P<0.05)。(3)沉默NOX4可降低高糖刺激下HRMECs的NLRP3炎症小体活化和ROS生成,并抑制高糖刺激诱导的ZO-1和VE-Cad表达下降(P<0.05)。(4)过表达NOX4可明显增加HRMECs中NLRP3炎症小体活化和ROS生成,降低ZO-1和VE-Cad蛋白的表达(P<0.05);过表达NOX4后再予以SDX处理能部分逆转SDX引起的以上改变(P<0.05)。结论:SDX通过抑制NOX4/ROS/NLRP3通路减轻高糖诱导的视网膜血管内皮损伤。
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关键词
舒洛地特
糖尿病视网膜病变
NLRP3炎症小体
NADPH氧化酶4
活性氧簇
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职称材料
内质网应激激活STING信号通路并降低胰岛β细胞活力
被引量:
1
2
作者
彭荣东
何学敏
+6 位作者
王瑨
文哲瑶
艾鹤英
朱延华
鲁岩
石国军
陈燕铭
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第5期809-818,共10页
目的:鉴定胰岛β细胞中干扰素基因刺激因子(STING)信号通路相关基因的表达及其与内质网应激的相互作用,研究2个通路间的相互作用对胰岛β细胞活力的影响。方法:通过生物信息学分析来源于人的胰岛单细胞RNA测序数据集,得到STING信号通路...
目的:鉴定胰岛β细胞中干扰素基因刺激因子(STING)信号通路相关基因的表达及其与内质网应激的相互作用,研究2个通路间的相互作用对胰岛β细胞活力的影响。方法:通过生物信息学分析来源于人的胰岛单细胞RNA测序数据集,得到STING信号通路相关基因在胰岛β细胞中的表达变化;用免疫荧光法检测并比较野生型小鼠和db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞中STING蛋白的表达差异;用STING特异性激动剂5,6-二甲基呫吨酮-4-乙酸(DMXAA)处理3种常用的小鼠胰岛β细胞系(NIT-1、Min6及beta-TC-6),并通过RT-qPCR和Western blot分别检测其STING信号通路相关蛋白的mRNA和蛋白表达水平变化;用毒胡萝卜素(TG)诱导上述β细胞系内质网应激,通过Western blot检测STING信号通路相关蛋白的表达及磷酸化水平,并通过CCK-8法检测胰岛β细胞活力。结果:人胰岛β细胞中存在STING信号通路主要基因mRNA的表达,但在健康人群和糖尿病患者的表达水平无显著差异。免疫荧光结果表明,野生型小鼠和db/db小鼠胰岛β细胞的STING蛋白均在细胞核周边富集,且在db/db小鼠β细胞的表达量更高。在3种小鼠β细胞系中,只有beta-TC-6细胞具有较显著的STING表达,并能被STING通路激动剂DMXAA激活。TG能同时引起beta-TC-6细胞的内质网应激和STING通路激活;与STING激动剂联合处理可协同抑制细胞的活力。结论:人和小鼠胰岛β细胞及小鼠胰岛β细胞系beta-TC-6均表达STING信号通路的主要组分。在beta-TC-6细胞中,内质网应激能激活STING通路;内质网应激与STING通路可协同作用降低β细胞活力。
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关键词
糖尿病
干扰素基因刺激因子
单细胞测序
内质网应激
胰岛Β细胞
细胞活力
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职称材料
题名
舒洛地特通过抑制NOX4/NLRP3通路减轻高糖诱导的视网膜血管损伤
被引量:
9
1
作者
李婷
何学敏
彭荣东
李静仁
付夏楠
周丽
石国军
陈燕铭
机构
中山大学附属第三医院
内分泌与代谢性疾病科
中山大学附属第三医院临床免疫中心
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期577-587,共11页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81770826)
广东省科技计划项目(No.2019B020227003)
中山大学5010临床研究计划(No.2015015)。
文摘
目的:观察舒洛地特(SDX)在糖尿病状态下对视网膜微血管内皮细胞的保护作用。方法:(1)采用高脂喂养及腹腔注射链脲佐菌素的方法构建C57BL/6小鼠的2型糖尿病模型,对小鼠腹腔注射SDX或等体积生理盐水治疗12周。用伊文思蓝法检测视网膜微血管渗漏及微血管密度改变;用Western blot、免疫荧光等方法检测各组小鼠视网膜中NLRP3炎症小体成分、紧密连接蛋白1(ZO-1)及NADPH氧化酶4(NOX4)的表达情况。(2)用高糖处理人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs),并与梯度浓度的SDX共处理;用腺病毒感染HRMECs以过表达NOX4或者用siRNA转染HRMECs以敲减NOX4,观察NLRP3炎症小体成分、NOX4、ZO-1和VE-钙黏着蛋白(VE-Cad)的表达情况,以及活性氧簇(ROS)的生成情况。结果:(1)SDX处理增加糖尿病小鼠视网膜中ZO-1蛋白的表达,抑制糖尿病小鼠视网膜微血管渗漏,增加糖尿病小鼠视网膜微血管密度和节细胞数量,并抑制NLRP3炎症小体的活化(P<0.05)。(2)在高糖刺激的HRMECs中,SDX处理增加ZO-1和VE-Cad蛋白的表达,显著抑制NLRP3炎症小体活化及NOX4介导的ROS生成(P<0.05)。(3)沉默NOX4可降低高糖刺激下HRMECs的NLRP3炎症小体活化和ROS生成,并抑制高糖刺激诱导的ZO-1和VE-Cad表达下降(P<0.05)。(4)过表达NOX4可明显增加HRMECs中NLRP3炎症小体活化和ROS生成,降低ZO-1和VE-Cad蛋白的表达(P<0.05);过表达NOX4后再予以SDX处理能部分逆转SDX引起的以上改变(P<0.05)。结论:SDX通过抑制NOX4/ROS/NLRP3通路减轻高糖诱导的视网膜血管内皮损伤。
关键词
舒洛地特
糖尿病视网膜病变
NLRP3炎症小体
NADPH氧化酶4
活性氧簇
Keywords
Sulodexide
Diabetic retinopathy
NLRP3 inflammasome
NADPH oxidase 4
Reactive oxygen species
分类号
R363.2 [医药卫生—病理学]
R587.2 [医药卫生—内分泌]
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职称材料
题名
内质网应激激活STING信号通路并降低胰岛β细胞活力
被引量:
1
2
作者
彭荣东
何学敏
王瑨
文哲瑶
艾鹤英
朱延华
鲁岩
石国军
陈燕铭
机构
中山大学附属第三医院
内分泌与代谢病学科
中山大学附属第三医院临床免疫中心
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第5期809-818,共10页
基金
国家重点研究计划(No.2017YFA0105803)
国家自然科学基金资助项目(No.81770826
+6 种基金
No.82070811
No.82000782)
中山大学临床研究5010项目(No.2015015)
广东省基础与应用基础研究基金(No.2019B020227003
No:2020A1515010599)
广州市科技计划项目(No.202007040003)
中山大学附属第三医院国自然基金培育项目(No.2020G2RPYQN11)。
文摘
目的:鉴定胰岛β细胞中干扰素基因刺激因子(STING)信号通路相关基因的表达及其与内质网应激的相互作用,研究2个通路间的相互作用对胰岛β细胞活力的影响。方法:通过生物信息学分析来源于人的胰岛单细胞RNA测序数据集,得到STING信号通路相关基因在胰岛β细胞中的表达变化;用免疫荧光法检测并比较野生型小鼠和db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞中STING蛋白的表达差异;用STING特异性激动剂5,6-二甲基呫吨酮-4-乙酸(DMXAA)处理3种常用的小鼠胰岛β细胞系(NIT-1、Min6及beta-TC-6),并通过RT-qPCR和Western blot分别检测其STING信号通路相关蛋白的mRNA和蛋白表达水平变化;用毒胡萝卜素(TG)诱导上述β细胞系内质网应激,通过Western blot检测STING信号通路相关蛋白的表达及磷酸化水平,并通过CCK-8法检测胰岛β细胞活力。结果:人胰岛β细胞中存在STING信号通路主要基因mRNA的表达,但在健康人群和糖尿病患者的表达水平无显著差异。免疫荧光结果表明,野生型小鼠和db/db小鼠胰岛β细胞的STING蛋白均在细胞核周边富集,且在db/db小鼠β细胞的表达量更高。在3种小鼠β细胞系中,只有beta-TC-6细胞具有较显著的STING表达,并能被STING通路激动剂DMXAA激活。TG能同时引起beta-TC-6细胞的内质网应激和STING通路激活;与STING激动剂联合处理可协同抑制细胞的活力。结论:人和小鼠胰岛β细胞及小鼠胰岛β细胞系beta-TC-6均表达STING信号通路的主要组分。在beta-TC-6细胞中,内质网应激能激活STING通路;内质网应激与STING通路可协同作用降低β细胞活力。
关键词
糖尿病
干扰素基因刺激因子
单细胞测序
内质网应激
胰岛Β细胞
细胞活力
Keywords
Diabetes mellitus
Stimulator of interferon genes
Single-cell sequencing
Endoplasmic reticu‐lum stress
Isletβcells
Cell viability
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
R363.2 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
舒洛地特通过抑制NOX4/NLRP3通路减轻高糖诱导的视网膜血管损伤
李婷
何学敏
彭荣东
李静仁
付夏楠
周丽
石国军
陈燕铭
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
内质网应激激活STING信号通路并降低胰岛β细胞活力
彭荣东
何学敏
王瑨
文哲瑶
艾鹤英
朱延华
鲁岩
石国军
陈燕铭
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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