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5-HT通过5-HT2BR促进巨核细胞生长和抗巨核细胞凋亡
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作者 孔惠敏 岑玉蓉 +2 位作者 杨默 彭强 黄金棋 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第1期75-81,共7页
目的:探讨5-羟色胺(5-HT)对巨核细胞Meg-01增殖、凋亡以及巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的影响及其可能的机制。方法:反相高效液相色谱-电化学检测法检测Meg-01细胞对5-HT的摄取和5-HT在Meg-01细胞中的代谢。免疫荧光染色检测骨髓巨核细... 目的:探讨5-羟色胺(5-HT)对巨核细胞Meg-01增殖、凋亡以及巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的影响及其可能的机制。方法:反相高效液相色谱-电化学检测法检测Meg-01细胞对5-HT的摄取和5-HT在Meg-01细胞中的代谢。免疫荧光染色检测骨髓巨核细胞5-羟色胺2B型受体(5-HT2BR)的表达。将5-HT和/或5-HT2BR抑制剂Ketanserin加入到Meg-01细胞中培养48 h,应用MTT检测法和台盼蓝染色法检测细胞的增殖及细胞活率。Meg-01细胞中加入5-HT和/或Ketanserin孵育72 h,应用流式细胞术检测细胞的早期凋亡情况和凋亡蛋白酶caspase-3的活性。采用CFU-MK培养探究5-HT对巨核细胞分化的影响。结果:Meg-01细胞可以摄取5-HT,并将摄取的5-HT分解成5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)。免疫荧光染色表明骨髓巨核细胞表面有5-HT2BR的表达。5-HT对Meg-01细胞的增殖有促进作用,呈剂量依赖性(r=0.82),5-HT浓度为200 nmol/L时,对Meg-01细胞的促增殖作用最明显(P<0.001)。台盼蓝染色结果也提示200 nmol/L的5-HT对Meg-01细胞的存活率影响最明显(P<0.05)。在5-HT单独存在时,可明显促进Meg-01细胞的增殖(P<0.001),加入Ketanserin后,此作用减弱。5-HT可以明显降低Meg-01细胞的早期凋亡率(P<0.001)和caspase-3的活性(P<0.05),加入Ketanserin之后,Meg-01细胞的早期凋亡率明显增加(P<0.001),caspase-3的活性也有所增加。CFU-MK形成结果表明,5-HT可促进骨髓细胞CFU-MK的形成,且呈剂量依赖性(r=0.89);而在5-HT的基础上加入Ketanserin,5-HT对CFU-MK形成的促进作用减弱(P<0.01)。结论:巨核细胞内有可能存在代谢分解5-HT的单胺氧化酶,将5-HT分解为5-HIAA。5-HT有可能通过5-HT2BR促进巨核细胞的的增殖和分化。此外,在5-HT作用下还可以降低巨核细胞的凋亡,其抗凋亡作用可能是通过5-HT2BR和caspase-3通路介导的。 展开更多
关键词 5-羟色胺 Meg-01细胞 5-羟色胺2B型受体 增殖 凋亡
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PDGF-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的造血保护作用研究 被引量:2
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作者 罗毅 孔惠敏 +5 位作者 苏伟青 伊文芳 戈慧 陈卉 李亮 杨默 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1873-1880,共8页
目的:探讨血小板衍生生长因子(PDGF)-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的骨髓保护作用和减少人巨核细胞系Meg-01细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法:用4 Gy的^(137)Csγ射线辐照小鼠,建立小鼠骨髓抑制模型。在小鼠辐照前(d 0)和照射后d 7... 目的:探讨血小板衍生生长因子(PDGF)-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的骨髓保护作用和减少人巨核细胞系Meg-01细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法:用4 Gy的^(137)Csγ射线辐照小鼠,建立小鼠骨髓抑制模型。在小鼠辐照前(d 0)和照射后d 7、14和21对小鼠进行体重称量和外周血细胞计数;取d 21处死后的小鼠胸骨组织进行形态学观察和股骨骨髓细胞进行集落细胞形成单位的培养。无血清培养Meg-01细胞24 h诱导细胞凋亡,PDGFBB处理Meg-01细胞48 h后进行细胞计数,应用流式细胞术检测细胞的早期凋亡、线粒体膜电位(JC-1)和凋亡蛋白酶CasPpase-3活性的表达。结果:小鼠外周血计数结果表明,PDGF-BB可刺激放射后小鼠白细胞、红细胞和血小板的恢复(<0.05),对白细胞尤为明显。PDGF-BB处理组小鼠可观察到骨髓增生,巨核细胞及其祖细胞数量均高于对照组。细胞集落形成的培养结果显示,PDGF-BB处理组可明显刺激CFU-MK、CFU-GM、BFU-E和CFU-F的形成。不同浓度PPDGF-BB处理Meg-01细胞后,结果显示,PDGF-BB在5-50 ng/ml浓度范围内对细胞具有较强的促进增殖作用(<0.001)。PDGF-BB(50 ng/ml)可明显降低Annexin V的阳性表达(P<0.01);与PDGF-BB处理组相比,对照组细胞中线粒体膜电位下降,表明凋亡细胞数量明显增加(PP<0.01);PDGF-BB处理组的Caspase-3的表达明显低于对照组(<0.05)。结论:PDGF-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的造血系统具有保护作用,尤其是巨核细胞及其祖细胞。对Meg-01有促增殖和抗凋亡作用,其抗凋亡作用可能是通过JC-1和Caspase-3通路介导的。 展开更多
关键词 血小板衍生生长因子-BB 造血保护 Meg-01细胞 细胞凋亡
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当归补血汤及其主要成分对骨髓抑制小鼠的抗造血细胞凋亡的研究 被引量:21
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作者 孔惠敏 苏伟青 +4 位作者 叶红 王华 李亮 陈卉 杨默 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1679-1687,共9页
目的:探讨当归补血汤(danggui buxue tang,DBT)及其主要成分当归多糖(angelica polysaccharide,APS)和黄芪多糖(astragalus polysaccharide,ASPS)对骨髓抑制小鼠的造血保护作用和对巨核细胞系Meg-01细胞抗凋亡的机制研究。方法:用4 Gy的... 目的:探讨当归补血汤(danggui buxue tang,DBT)及其主要成分当归多糖(angelica polysaccharide,APS)和黄芪多糖(astragalus polysaccharide,ASPS)对骨髓抑制小鼠的造血保护作用和对巨核细胞系Meg-01细胞抗凋亡的机制研究。方法:用4 Gy的^(137)Csγ射线辐照小鼠,建立小鼠骨髓抑制模型。DBT、APS或ASPS(10mg/kg)注射小鼠,在小鼠辐照前(d0)和辐照后d7、14和21对小鼠进行一般状况评估、外周血细胞计数,以及d 21收集小鼠贫血小板血浆检测血小板生成素(TPO)浓度;取d21处死后的小鼠股骨骨髓细胞进行集落细胞形成单位的培养。无血清培养Meg-01细胞24h诱导细胞凋亡,DBT、APS或ASPS处理Meg-01细胞72h后,采用流式细胞术检测细胞的早期凋亡(Annexin V)、线粒体膜电位(JC-1)和凋亡蛋白酶(Caspase-3)的活性。结果:DBT可刺激骨髓抑制小鼠白细胞、红细胞和血小板的恢复,对白细胞和血小板尤为明显(P<0.01,P<0.05)。DBT治疗组小鼠骨髓细胞BFU-E、CFU-MK和CFU-GM的形成数量较对照组明显增多(BFU-E&CFU-GM:P<0.05;CFU-MK:P<0.01)。DBT对小鼠血液中TPO浓度的影响不明显(P=0.89)。与对照组相比,APS组红细胞、白细胞和血小板数均有明显升高(P<0.05);ASPS组白细胞数较对照组明显升高(P<0.05)。CFU培养结果显示,APS可刺激CFU-F、CFU-MK和CFU-GM的形成(P<0.05);而ASPS组只有CFU-GM的数量较对照组增多(P<0.05)。凋亡实验结果显示,DBT可明显降低Meg-01细胞的凋亡(P<0.05)。APS(100μg/ml)处理组Meg-01细胞的早期凋亡率和总死亡率较对照组明显降低(P<0.01,P<0.05);ASPS(100μg/ml)组早期凋亡率较对照组明显降低(P<0.05)。JC-1和Caspase-3结果显示,APS(100μg/ml)处理后,细胞凋亡率明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论:DBT对放射诱导骨髓抑制小鼠的造血系统具有保护作用,尤其是白细胞和血小板;对Meg-01细胞有抗凋亡作用。DBT上述作用主要是由APS引起的,其对抗细胞凋亡的机制主要是通过JC-1和Caspase-3途径进行的。 展开更多
关键词 当归补血汤 当归多糖 黄芪多糖 造血保护 Meg-01细胞 凋亡
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