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阿霉素肾病大鼠肾组织中nephrin和CD2AP的表达及意义 被引量:12
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作者 彭亚琴 莫樱 +2 位作者 蒋小云 张巧玲 陈述枚 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期15-20,25,共7页
【目的】动态观察nephrin、CD2相关蛋白(CD2AP)在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达变化,探讨其在蛋白尿发生发展过程中的作用。【方法】72只大鼠分为2组,模型组36只和对照组36只,模型组大鼠尾静脉一次性注射盐酸阿霉素,对照组大鼠尾静脉一... 【目的】动态观察nephrin、CD2相关蛋白(CD2AP)在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达变化,探讨其在蛋白尿发生发展过程中的作用。【方法】72只大鼠分为2组,模型组36只和对照组36只,模型组大鼠尾静脉一次性注射盐酸阿霉素,对照组大鼠尾静脉一次性注射等容积生理盐水,分别于注射后3、5、7、14、28、42d各杀检6只大鼠。采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学检测大鼠肾小球中nephrin、CD2AP的表达和分布变化。【结果】①模型组大鼠7d时nephrinmRNA表达增加,14d时其蛋白表达(9.44±0.49)亦显著增加;CD2AP表达增加时间较晚,28d时其mRNA和蛋白表达(7.88±1.01)才显著增加。②与对照组相比,模型组nephrin、CD2AP出现分布异常,从沿着毛细血管袢线样分布逐渐转变为不连续性颗粒样或斑片状分布。③肾小球nephrinmRNA、CD2APmRNA表达量与24h尿蛋白量均呈正相关关系(r=0.878,P<0.01;r=0.945,P<0.01)。【结论】①nephrin早期出现表达增加及分布异常,可能是导致蛋白尿的原因及判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标。②CD2AP在后期出现表达增加,可能是足细胞抵抗损伤的一种代偿反应。 展开更多
关键词 NEPHRIN CD2AP 阿霉素 蛋白尿
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双歧杆菌对卵清蛋白致敏大鼠肠道黏膜屏障的保护作用 被引量:11
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作者 卢亚亚 莫清萍 +2 位作者 张巧玲 张泉山 丘小汕 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期825-828,共4页
目的研究双歧杆菌对卵清蛋白(OVA)致敏大鼠肠道黏膜屏障的保护作用。方法3周龄Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠36只随机分为3组,每组12只,分别为正常对照组、阳性对照组和双歧杆菌组。双歧杆菌组取双歧杆菌活菌制剂按1.5mg/g用无菌生理盐水... 目的研究双歧杆菌对卵清蛋白(OVA)致敏大鼠肠道黏膜屏障的保护作用。方法3周龄Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠36只随机分为3组,每组12只,分别为正常对照组、阳性对照组和双歧杆菌组。双歧杆菌组取双歧杆菌活菌制剂按1.5mg/g用无菌生理盐水溶解后灌胃,正常对照组和阳性对照组均给予生理盐水灌胃,连续3周。双歧杆菌组和阳性对照组采用卵清蛋白腹腔注射法建立食物致敏模型,于灌胃3周后开始,分别于第1天和第15天予含10μg OVA及1mg Al(OH)3的无菌生理盐水0.5ml腹腔注射进行基础致敏和强化致敏,在强化致敏后第5、9、13、15天以含OVA500μg的无菌生理盐水0.5ml灌胃对大鼠进行激发。正常对照组按以上时间使用无菌生理盐水假致敏及假强化。留取24h尿液检测乳果糖与甘露醇比值(L/M)以了解肠道通透性;空肠标本行HE及甲苯胺蓝染色,在光镜下观察并计算完整肥大细胞的百分率,透射电镜观察肠黏膜超微结构变化。结果双歧杆菌组24h尿L/M(0.068±0.008)低于阳性对照组(0.131±0.012,P<0.05),但高于正常对照组(0.027±0.004,P<0.05)。HE染色和甲苯胺兰染色可见双歧杆菌组大鼠小肠绒毛上皮细胞局灶性坏死、脱落,固有层淋巴细胞及浆细胞等炎症细胞浸润、小肠肥大细胞聚集和脱颗粒现象较阳性对照组缓解。结论双歧杆菌对卵清蛋白致敏大鼠肠道黏膜屏障有一定的预防性保护作用。 展开更多
关键词 双歧杆菌 卵清蛋白 食物过敏 肠道黏膜屏障
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儿童狼疮性肾炎临床与病理特点及相关性分析 被引量:8
3
作者 张巧玲 蒋小云 +4 位作者 莫樱 吴伟 孙良忠 岳智慧 陈述枚 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期317-320,共4页
目的分析儿童狼疮性肾炎(LN)的临床及病理特点,探讨两者之间的相关性。方法对59例LN患儿的临床和病理资料进行回顾性分析。结果临床分型以肾病综合征型(NS型)最为常见(44.1%),其次为急性肾炎型(AGN型,23.7%)、孤立性血尿和(或)蛋白尿型(... 目的分析儿童狼疮性肾炎(LN)的临床及病理特点,探讨两者之间的相关性。方法对59例LN患儿的临床和病理资料进行回顾性分析。结果临床分型以肾病综合征型(NS型)最为常见(44.1%),其次为急性肾炎型(AGN型,23.7%)、孤立性血尿和(或)蛋白尿型(IH/P型,22.0%),急进性肾炎型和慢性肾炎型少见。病理分型以Ⅳ-G(A)和Ⅳ-G(A/C)型最常见,分别占40.7%和15.3%,其次为Ⅴ+Ⅲ型(8.5%)、Ⅴ+Ⅳ型(6.8%)和Ⅱ型(6.8%),Ⅵ型(5.1%)和Ⅰ型(1.7%)少见。临床分型为NS型者,病理多为Ⅳ型(65.4%),其次为Ⅴ型(26.9%)。病理Ⅳ型者肾小管间质(TIL)损害程度最为严重。LN患儿肾活检时的sCr水平与TIL病变程度呈正相关(rs=0.639,P<0.01)。Ⅳ型LN患儿dsDNA阳性率最高(87.9%),血补体C3水平最低;各组不同病理分型LN患儿的ESR、ANA、抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSA抗体和抗SSB抗体阳性率之间的差异无统计学意义。结论LN患儿的临床表现与肾脏病理改变复杂多样,两者有一定的相关性,临床以NS型最常见,病理多为Ⅳ级,且Ⅳ级者TIL病变最重。肾活检对指导治疗和评估预后有重要意义。 展开更多
关键词 儿童 狼疮性肾炎 临床 病理
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早期高蛋白饮食对SGA大鼠糖代谢的影响及脂联素-AMPK信号通路在其中的作用 被引量:4
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作者 余慕雪 沈振宇 +1 位作者 莫清萍 丘小汕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1812-1818,共7页
目的:探讨早期高蛋白饮食对小于胎龄(SGA)大鼠糖代谢的影响及脂联素-AMP活化蛋白激酶(AMPK)信号通路在其中的作用。方法:孕期限食母鼠分娩的48只新生SGA雄性大鼠出生时随机分为SGA对照组(CS组)和SGA高蛋白组(HPS组)各24只;正常母鼠分娩... 目的:探讨早期高蛋白饮食对小于胎龄(SGA)大鼠糖代谢的影响及脂联素-AMP活化蛋白激酶(AMPK)信号通路在其中的作用。方法:孕期限食母鼠分娩的48只新生SGA雄性大鼠出生时随机分为SGA对照组(CS组)和SGA高蛋白组(HPS组)各24只;正常母鼠分娩的正常新生雄鼠24只为正常对照组(CN组)。CN组和CS组在3周哺乳期间母鼠予基础饲料自由饮食,断乳后幼鼠予基础饲料自由饮食至12周龄。HPS组在3周哺乳期间母鼠予高蛋白饲料自由饮食,断乳后幼鼠予高蛋白饲料自由饮食至4周龄,满4周龄予基础饲料自由进食至12周龄。4和12周龄时分别测定各组空腹血糖和胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);测定血清脂联素水平;称取大鼠内脏脂肪质量(VFM),计算内脏脂肪体重百分比(VFM%);内脏脂肪组织切片测量脂肪细胞面积;检测骨骼肌AMPKα、磷酸化AMPKα和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达。12周龄时各组行口服糖耐量试验(OGTT)。结果:4周龄各组HOMA-IR差异无统计学意义(P>0.05)。12周龄CS组HOMA-IR显著高于CN组和HPS组(均P<0.01),CN组与HPS组差异无统计学意义(P>0.05)。4和12周龄CS组VFM%、内脏脂肪细胞面积显著高于CN组和HPS组(均P<0.01),CN组与HPS组差异无统计学意义(P>0.05)。4和12周龄CS组血清脂联素水平、磷酸化AMPKα和GLUT4的表达低于CN和HPS组(P<0.05或P<0.01),CN组与HPS组差异无统计学意义(P>0.05),各组骨骼肌AMPKα的表达差异无统计学意义(P>0.05)。12周龄OGTT中CS组血糖下曲线面积高于CN和HPS组(均P<0.05),CN组与HPS组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:早期高蛋白饮食干预能改善SGA大鼠的糖代谢,其机制与减少SGA内脏脂肪积聚、经由脂联素-AMPK信号通路上调骨骼肌GLUT4表达有关。 展开更多
关键词 小于胎龄 高蛋白饮食 葡萄糖代谢 脂联素 AMP活化蛋白激酶
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CD62P和CD44在儿童原发性IgA肾病肾组织中的表达及临床意义 被引量:2
5
作者 张巧玲 蒋小云 +2 位作者 吴伟 莫樱 陈述枚 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期25-29,33,共6页
【目的】探讨黏附分子P选择素(CD62P)和细胞表面糖蛋白(CD44)在儿童IgA肾病(IgAN)发病中的作用及其与肾小管间质损害的关系。【方法】46例IgAN患儿按临床表现分为3组:孤立性血尿组14例,血尿蛋白尿组17例,肾病综合征组15例;按病理分级分... 【目的】探讨黏附分子P选择素(CD62P)和细胞表面糖蛋白(CD44)在儿童IgA肾病(IgAN)发病中的作用及其与肾小管间质损害的关系。【方法】46例IgAN患儿按临床表现分为3组:孤立性血尿组14例,血尿蛋白尿组17例,肾病综合征组15例;按病理分级分为3组:病理Ⅰ+Ⅱ级组23例,Ⅲ级组14例,Ⅳ级组9例。设肾活检正常对照组4例。采用免疫组化SP法检测病例组与对照组肾组织CD62P和CD44的表达,并分析其与肾小管间质病变程度的相关性。【结果】①正常肾组织仅有少量CD62P和CD44表达。IgAN患儿肾组织中,CD62P在肾小管上皮细胞显著表达,CD44在肾小球、肾小管和肾间质均有表达。②IgAN患儿肾组织中CD62P和CD44的表达均较对照组明显增高,不同临床表现组中,肾病综合征组最高,孤立性血尿组最低,且与IgAN患儿的病理分级密切相关。③IgAN患儿肾组织CD62P和CD44的表达与肾小管间质损害程度呈正相关。【结论】CD62P和CD44参与了儿童IgAN的发病和肾小管间质损害,与IgAN的进展及预后有关。 展开更多
关键词 黏附分子 P选择素 CD44 IgA肾病 儿童
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新生儿缺氧缺血性脑病危险因素的病例对照研究 被引量:2
6
作者 张巧玲 林菀 +1 位作者 廖忠敬 麦文英 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第B03期156-158,共3页
【目的】通过病例对照研究了解新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的危险因素。【方法】选择 HIE 患儿102例,随机选择同期住院的高危非 HIE 新生儿93例作为对照,从母亲、胎儿、分娩3个方面,列出27个相关因素,进行单因素分析及多因素Logistic 回... 【目的】通过病例对照研究了解新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的危险因素。【方法】选择 HIE 患儿102例,随机选择同期住院的高危非 HIE 新生儿93例作为对照,从母亲、胎儿、分娩3个方面,列出27个相关因素,进行单因素分析及多因素Logistic 回归分析。【结果】单因素分析有10个因素为危险因素,分别为胎位不正、脐带异常、羊水污染、私人接生、产程延长、吸引产、钳产、1min Apgar 评分≤7分、5min Apgar 评分≤7分、10min Apgar 评分≤7分;多因素分析结果示1min Apgar 评分≤7分及钳产是 HIE 的危险因素;且生后1min 及5min Apgar 评分与 HIE 程度比较差异有显著性(P<0.01)。【结论】单因素分析所得项是 HIE 的危险因素,多因素分析所得项与 HIE 的发生关系尤为密切。防治胎儿宫内窘迫,提高产科技术水平及产儿科医护人员的复苏水平,可有效降低或减轻 HIE 的发生。 展开更多
关键词 婴儿 新生儿 脑缺氧 危险因素 病例对照研究
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不同时期高蛋白营养干预对宫内生长受限大鼠体成分和骨骼肌mTOR活性的影响 被引量:1
7
作者 余慕雪 沈振宇 +1 位作者 莫清萍 丘小汕 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期749-755,共7页
【目的】探讨不同时期高蛋白营养干预对宫内生长受限(IUGR)大鼠体成分和骨骼肌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)活性的影响。【方法】64只IUGR新生雄鼠出生时随机分为2组:IUGR对照组(CR)组40只、IUGR早期高蛋白干预组(EPR)组24只,另正常新... 【目的】探讨不同时期高蛋白营养干预对宫内生长受限(IUGR)大鼠体成分和骨骼肌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)活性的影响。【方法】64只IUGR新生雄鼠出生时随机分为2组:IUGR对照组(CR)组40只、IUGR早期高蛋白干预组(EPR)组24只,另正常新生雄鼠24只为正常对照组(CN组)。4周龄时各组处理8只大鼠后CR组随机取16只大鼠组成IUGR延迟高蛋白干预组(DPR组)。3周哺乳期间CN组和CR组母鼠予基础饲料自由饮食,而EPR组母鼠予高蛋白饲料自由饮食;CN组和CR组断乳后予基础饲料自由饮食至12周龄,EPR组断乳后予高蛋白饲料自由饮食至4周龄、以后予基础饲料自由进食至12周龄;DPR组4~8周龄予高蛋白饲料、8~12周龄予基础饲料自由饮食。8、12周龄各组再处理8只大鼠。4、8、12周龄分别检测各组大鼠体成分、血清脂联素、血糖和胰岛素水平、骨骼肌纤维横截面积、骨骼肌mTOR活性。计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。【结果】与CN组相比,CR组4、8、12周龄和DPR组12周龄体脂肪百分比增加(P<0.05或P<0.01),而瘦体质量百分比、骨骼肌纤维横截面积、骨骼肌mTOR活性,血清脂联素水平减低(P<0.05或P<0.01)。CR组8、12周龄和DPR组12周龄HOMA-IR高于CN组(P<0.05或P<0.01)。与CR组相比,EPR组4、8、12周龄以及DPR组8周龄体脂肪百分比减低(P<0.05或P<0.01),而瘦体质量百分比、骨骼肌纤维横截面积、骨骼肌mTOR活性、血清脂联素水平增加(P<0.05或P<0.01)。EPR组8、12周龄和DPR组8周龄HOMA-IR低于CR组(P值均<0.01)。【结论】出生到4周龄是高蛋白营养干预IUGR大鼠较合适的关键时期,近期和远期均可改善其体成分和胰岛素敏感性,与高蛋白干预上调骨骼肌mTOR活性、促进瘦体质量增长而减少体脂成分有关。 展开更多
关键词 宫内生长受限 体成分 高蛋白 MTOR
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血管紧张素-(1-7)通过抑制ClC-3通道减轻高糖引起的心肌细胞损伤 被引量:1
8
作者 蔡少艾 陈景福 +6 位作者 陈美姬 林健聪 冯鉴强 林凯 智喜梅 张伟杰 吴文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期895-901,共7页
目的探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]能否通过调控ClC-3通道保护心肌细胞对抗高糖引起的损伤。方法应用35 mmol/L葡萄糖处理H9c2心肌细胞24 h建立损伤模型。Ang-(1-7)或氯通道抑制剂与心肌细胞共处理24 h观察对高糖诱发的心肌细胞损伤... 目的探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]能否通过调控ClC-3通道保护心肌细胞对抗高糖引起的损伤。方法应用35 mmol/L葡萄糖处理H9c2心肌细胞24 h建立损伤模型。Ang-(1-7)或氯通道抑制剂与心肌细胞共处理24 h观察对高糖诱发的心肌细胞损伤的影响。应用细胞计数试剂盒8检测细胞存活率;Hoechst33258染色荧光显微镜照相术检测凋亡细胞的形态学改变;双氯荧光素染色荧光显微镜照相术测定细胞内活性氧水平;超氧化物歧化酶试剂盒测定活性;罗丹明123染色荧光显微镜照相术检测线粒体膜电位;Western blot法测定心肌细胞ClC-3通道蛋白的表达水平。结果 35 mmol/L葡萄糖处理H9c2心肌细胞24 h明显地增加ClC-3通道蛋白的表达水平(P<0.01);1μmol/LAng-(1-7)与葡萄糖共处理心肌细胞24 h显著地抑制葡萄糖对ClC-3通道蛋白表达的上调作用(P<0.01);1μmol/LAng-(1-7)或100μmol/L氯通道抑制剂氯通道抑制剂与葡萄糖共处理心肌细胞24 h减轻葡萄糖引起的损伤作用,表现为增加细胞存活率和超氧化物歧化酶活性,减小细胞凋亡数量,胞内活性氧水平及线粒体膜电位丢失(P<0.01)。结论 ClC-3通道参与葡萄糖引起的心肌细胞损伤;Ang-(1-7)通过抑制ClC-3通道保护心肌细胞对抗葡萄糖引起的损伤。 展开更多
关键词 血管紧张素-(1-7) ClC-3通道 高糖 心肌细胞 损伤
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普米克令舒加喘乐宁、爱喘乐雾化吸入佐治毛细支气管炎
9
作者 文序 廖忠敬 +1 位作者 莫恩明 麦文英 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第B03期146-148,共3页
【目的】探寻毛细支气管炎(毛支)目前有效的治疗方法。【方法】将70例毛支患儿随机分3组,均采用相同的综合治疗,普米克组加用普米克令舒及喘乐宁、爱喘乐雾化吸入治疗。泼尼松组加用口服泼尼松及雾化吸入喘乐宁、爱喘乐治疗。对照组加... 【目的】探寻毛细支气管炎(毛支)目前有效的治疗方法。【方法】将70例毛支患儿随机分3组,均采用相同的综合治疗,普米克组加用普米克令舒及喘乐宁、爱喘乐雾化吸入治疗。泼尼松组加用口服泼尼松及雾化吸入喘乐宁、爱喘乐治疗。对照组加用雾化吸入喘乐宁、爱喘乐治疗。对治疗前后症状、体征持续时间进行比较。【结果】在喘息缓解速度,咳嗽消失时间,肺部罗音消退时间,以及治愈率方面,普米克组疗效明显优于对照组,差异有显著性;但与泼尼松组相比差异无显著性。【结论】普米克令舒加喘乐宁、爱喘乐雾化吸入治疗小儿毛支,操作方便,副作用小,3药联用,强化协调,佐治毛细支气管炎效果较为满意,治愈率为93%。 展开更多
关键词 毛细支气管炎 普米克令舒 喘乐宁 爱喘乐 吸入
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79例新生儿胃肠功能障碍与多器官损害的关系分析
10
作者 廖忠敬 陈玮琪 +2 位作者 文序 张巧玲 麦文英 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第B03期150-152,共3页
【目的】探讨危重新生儿胃肠功能障碍与诱因及多器官损害的关系。【方法】将新生儿危重症监护室1997年1月至2001年1月收治79例伴有胃肠功能障碍的危重新生儿进行回顾性临床分析。【结果】79例中新生儿窒息58例,占73%(58/79)。79例有胃... 【目的】探讨危重新生儿胃肠功能障碍与诱因及多器官损害的关系。【方法】将新生儿危重症监护室1997年1月至2001年1月收治79例伴有胃肠功能障碍的危重新生儿进行回顾性临床分析。【结果】79例中新生儿窒息58例,占73%(58/79)。79例有胃肠功能障碍的新生儿除胃肠功能障碍外,全部伴有其他器官损害,伴有多个器官损害51例(65%),单个器官损害28例(35%)。51例轻中度胃肠功能障碍新生儿发生多器官损害28例(55%),单器官损害23例(45%);28例重度胃肠功能障碍新生儿发生多器官损害23例(82%),单器官损害5例(18%)。轻中度胃肠功能障碍与重度胃肠功能障碍的多器官损害发生例数相比,差异有显著性(P<0.05)。46例轻中度胃肠功能障碍新生儿死亡2例(0.04%),21例重度胃肠功能障碍的新生儿死亡12例(57%),其病死率有显著性差异(P<0.01)。【结论】新生儿胃肠功能障碍多发生于窒息的病理情况。重症胃肠功能障碍发生多器官损害者明显增多,其病死率也显著增加。提高认识,早期诊断,及时采取有效措施是提高生存率的关键。 展开更多
关键词 胃肠功能障碍 新生儿 窒息
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小儿支气管异物取出术的麻醉和呼吸管理的探讨 被引量:4
11
作者 余琼 文序 鲍菲 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第B03期158-159,共2页
【目的】探讨小儿支气管异物取出术的麻醉和呼吸管理的有效方法。【方法】采用氯胺酮、γ-羟基丁酸钠与地西泮(安定)复合麻醉的方法对76例小儿进行支气管异物取除术。【结果】76例小儿支气管异物取出术麻醉顺利,手术全获成功,均取出异物... 【目的】探讨小儿支气管异物取出术的麻醉和呼吸管理的有效方法。【方法】采用氯胺酮、γ-羟基丁酸钠与地西泮(安定)复合麻醉的方法对76例小儿进行支气管异物取除术。【结果】76例小儿支气管异物取出术麻醉顺利,手术全获成功,均取出异物,术后未发生呼吸梗阻及呼吸衰竭。【结论】采用氯胺酮与γ-羟基丁酸钠、地西泮复合麻醉的方法能保持患儿的呼吸、良好的镇痛、较少的术后并发症。 展开更多
关键词 小儿 支气管异物 麻醉管理 呼吸管理
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ATP敏感性钾通道的开放通过抑制TLR4/NF-κB通路对抗高糖引起的H9c2心肌细胞损伤和炎症 被引量:5
12
作者 梁伟杰 陈美姬 +6 位作者 何洁仪 黄惠敏 余盛龙 陈君 陈景福 宋明才 廖新学 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1153-1160,共8页
目的:探讨开放ATP敏感性钾通道(K_(ATP)通道)能否抑制Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路对抗高糖(HG)引起的H9c2心肌细胞损伤和炎症。方法:应用Western blot测定TLR4和NF-κB p65的蛋白水平;应用ELISA法检测细胞培养液中白细胞... 目的:探讨开放ATP敏感性钾通道(K_(ATP)通道)能否抑制Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路对抗高糖(HG)引起的H9c2心肌细胞损伤和炎症。方法:应用Western blot测定TLR4和NF-κB p65的蛋白水平;应用ELISA法检测细胞培养液中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定心肌细胞存活率;罗丹明123染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位(MMP);双氯荧光素染色荧光显微镜照相法测定细胞内活性氧簇(ROS)水平;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相法检测凋亡细胞数量。结果:H9c2心肌细胞经HG(35 mmol/L葡萄糖)处理24 h,胞内TLR4和磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)的蛋白水平明显增加,100μmol/L K_(ATP)通道开放剂二氮嗪(DZ)预处理30 min可抑制HG对TLR4和p-NF-κB p65蛋白水平的上调作用;此外,30μmol/L TAK-242(TLR4抑制剂)和HG共处理心肌细胞24 h也可减轻HG对p-NF-κB p65的上调作用。另一方面,100μmol/L DZ预处理有明确的心肌保护作用,可抑制HG引起的细胞毒性、炎症反应、线粒体损伤、氧化应激和细胞凋亡,使细胞存活率升高,并减少IL-1β和TNF-α分泌水平、MMP丢失、ROS生成及凋亡细胞数量;而30μmol/L TAK-242或100μmol/L PDTC(NF-κB抑制剂)共处理心肌细胞24 h也可发挥和DZ相类似的作用,能抑制HG引起的上述损伤和炎症反应。结论:开放K_(ATP)通道可通过抑制TLR4/NF-κB通路对抗HG引起的H9c2肌细胞损伤和炎症。 展开更多
关键词 ATP敏感性钾通道 Toll样受体4 核因子-κB 高糖 心肌细胞 损伤 炎症
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坏死性凋亡介导高糖引起的人脐静脉内皮细胞损伤 被引量:2
13
作者 林佳琼 陈美姬 +6 位作者 郭瑞鲜 张伟杰 智喜梅 邓海鸥 许翎 黎映兰 吴文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1608-1613,共6页
目的:研究坏死性凋亡是否介导高糖(HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤。方法:CCK-8法检测细胞存活率;Western blot法测定受体相互作用蛋白3(RIP3)、cleaved caspase-3的蛋白水平;罗丹明12... 目的:研究坏死性凋亡是否介导高糖(HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤。方法:CCK-8法检测细胞存活率;Western blot法测定受体相互作用蛋白3(RIP3)、cleaved caspase-3的蛋白水平;罗丹明123染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜照相法测定胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的水平。结果:应用不同浓度葡萄糖(10、20和40 mmol/L)处理HUVECs 24 h,RIP3的蛋白水平随葡萄糖剂量增加而升高,40 mmol/L时达高峰;应用40 mmol/L葡萄糖处理HUVECs 3 h、6 h、9 h、12 h和24 h能上调RIP3的蛋白水平,于9 h达最高峰;应用20μmol/L凋亡蛋白酶抑制剂Z-VAD-FMK预处理HUVECs 30 min促进RIP3表达;应用100μmol/L坏死性凋亡抑制剂necrostatin-1预处理HUVECs 1 h能抑制HG诱导HUVECs的细胞存活率降低,ROS过度生成及MMP丢失,但能升高cleaved caspase-3的蛋白水平。结论:坏死性凋亡介导高糖引起的人脐静脉内皮细胞损伤,但与内皮细胞凋亡存在负相关。 展开更多
关键词 坏死性凋亡 细胞凋亡 高糖 人脐静脉内皮细胞 Necrostatin-1
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血管紧张素-(1-7)通过抑制TLR4激活和坏死性凋亡的相互作用对抗高糖引起的H9c2心肌细胞损伤 被引量:5
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作者 梁伟杰 陈美姬 +5 位作者 何洁仪 李健豪 陈君 余盛龙 程飞 兰军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1750-1756,共7页
目的:研究血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]能否通过抑制Toll样受体4(TLR4)激活和坏死性凋亡的相互作用对抗高糖(HG)引起的H9c2心肌细胞损伤。方法:应用Western blot检测心肌细胞受体相互作用蛋白3(RIP3;反映坏死性凋亡的指标)和TLR4的表达... 目的:研究血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]能否通过抑制Toll样受体4(TLR4)激活和坏死性凋亡的相互作用对抗高糖(HG)引起的H9c2心肌细胞损伤。方法:应用Western blot检测心肌细胞受体相互作用蛋白3(RIP3;反映坏死性凋亡的指标)和TLR4的表达水平;CCK-8法测定心肌细胞存活率;用试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性;ELISA检测细胞培养液中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平;双氯荧光素染色法测定细胞内活性氧簇(ROS)水平;罗丹明123染色法测定线粒体膜电位(MMP)。结果:HG(35 mmol/L葡萄糖)作用H9c2心肌细胞24 h可使RIP3的表达水平明显升高,应用30μmol/L TAK-242(TLR4抑制剂)和HG共处理心肌细胞24 h可抑制HG对RIP3的上调;另一方面,HG可上调TLR4的表达,100μmol/L坏死性凋亡的特异性抑制剂necrostatin-1(Nec-1)和HG共处理心肌细胞24 h可抑制HG对TLR4的上调;而1μmol/L Ang-(1-7)和HG共处理心肌细胞24 h能同时抑制HG对RIP3和TLR4的上调。此外,1μmol/L Ang-(1-7)、30μmol/L TAK-242或100μmol/L Nec-1与HG共处理心肌细胞均能对抗HG引起的心肌细胞损伤,细胞存活率升高,LDH活性降低,ROS生成和MMP丢失减少,同时IL-1β和TNF-α的分泌减少。结论:Ang-(1-7)通过抑制TLR4激活和坏死性凋亡的相互作用对抗高糖引起的H9c2心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 血管紧张素-(1-7) TOLL样受体4 坏死性凋亡 高糖 心肌细胞
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ATP敏感性钾通道在硫化氢抑制坏死性凋亡介导的高糖致H9c2心肌细胞炎症中的作用 被引量:2
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作者 梁伟杰 陈美姬 +5 位作者 何健华 张稳柱 程飞 兰军 冯鉴强 黄惠敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1364-1369,共6页
目的:探讨ATP敏感性钾通道(K_ATP通道)在硫化氢(H2S)抑制坏死性凋亡介导的高糖(HG)致H9c2心肌细胞炎症中的作用。方法:应用Western blot法测定受体相互作用蛋白3(RIP3)和环氧化酶-2(COX-2)的表达水平;ELISA检测细胞培养液中白细胞介素-1... 目的:探讨ATP敏感性钾通道(K_ATP通道)在硫化氢(H2S)抑制坏死性凋亡介导的高糖(HG)致H9c2心肌细胞炎症中的作用。方法:应用Western blot法测定受体相互作用蛋白3(RIP3)和环氧化酶-2(COX-2)的表达水平;ELISA检测细胞培养液中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果:H9c2心肌细胞经HG(35 mmol/L葡萄糖)处理24 h,其RIP3的表达水平明显升高,100μmol/L K_ATP通道开放剂二氮嗪(DZ)和400μmol/L H_2S的供体硫氢化钠(Na HS)预处理心肌细胞30 min均可抑制HG对RIP3表达的上调;100μmol/L K_ATP通道阻断剂5-羟基癸酸(5-HD)预处理心肌细胞30 min可阻断Na HS对HG上调RIP3表达的抑制作用。另一方面,100μmol/L坏死性凋亡的特异性抑制剂necrostatin-1共处理或100μmol/L DZ、400μmol/L Na HS预处理心肌细胞均能抑制高糖引起的心肌细胞炎症,使COX-2表达及IL-1β和TNF-α的分泌水平均减少;而100μmol/L 5-HD能明显拮抗Na HS的上述抗炎症反应作用。结论:K_ATP通道在H_2S抑制坏死性凋亡介导的高糖致心肌细胞炎症反应中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 ATP敏感性钾通道 硫化氢 坏死性凋亡 高糖 心肌细胞 炎症
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硫化氢通过抑制p38MAPK通路和坏死性凋亡的相互作用对抗高糖引起的H9C2心肌细胞损伤和炎症
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作者 梁伟杰 陈美姬 +5 位作者 何洁仪 陈景福 郑东诞 李健豪 张稳柱 廖新学 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期649-656,共8页
【目的】探讨外源性硫化氢(H2S)能否通过抑制p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)通路和坏死性凋亡的相互作用对抗高糖引起的H9C2心肌细胞损伤和炎症。【方法】采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测心肌细胞的存活率;ELISA法检测细胞培养液中白... 【目的】探讨外源性硫化氢(H2S)能否通过抑制p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)通路和坏死性凋亡的相互作用对抗高糖引起的H9C2心肌细胞损伤和炎症。【方法】采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测心肌细胞的存活率;ELISA法检测细胞培养液中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)测定p38MAPK和RIP3蛋白(反映坏死性凋亡的指标)的蛋白水平;双氯荧光素染色荧光显微镜照相测定细胞内活性氧(ROS)水平;罗丹明123染色荧光显微镜照相测定线粒体膜电位(MMP)。【结果】H9C2心肌细胞经35 mmol/L葡萄糖(高糖,HG)作用24 h,胞内RIP3的蛋白水平明显增加,应用3μmol/L SB203580(p38 MAPK抑制剂)预处理心肌细胞60 min能明显地抑制HG对RIP3蛋白水平的上调作用;另一方面,HG可上调磷酸化(p)p38 MAPK的蛋白水平,应用100μmol/L necrostatin-1(Nec-1,坏死性凋亡的特异性抑制剂)共处理心肌细胞24 h能阻断HG对p-p38 MAPK蛋白水平的上调作用;而400μmol/L Na HS(为H2S的供体)预处理心肌细胞30 min能同时抑制HG对RIP3和p-p38 MAPK蛋白水平的上调作用。此外,400μmol/L Na HS、3μmol/L SB203580预处理或100μmol/L Nec-1共处理心肌细胞均可抑制HG引起的心肌细胞毒性、氧化应激、线粒体损伤和炎症反应,使细胞存活率升高,ROS生成、MMP丢失及IL-1β和TNF-ɑ的分泌水平减少。【结论】抑制p38 MAPK通路和坏死性凋亡的相互作用可能是外源性H2S对抗高糖引起的H9c2心肌细胞损伤和炎症的重要作用机制之一。 展开更多
关键词 硫化氢 P38丝裂原激活蛋白激酶 坏死性凋亡 相互作用 高糖 心肌细胞
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