雷帕霉素对血管平滑肌细胞增殖影响的实验研究 被引量：5

1

作者 王建波 杨建勇 +2 位作者 陈伟 庄文权 张珑涓 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期254-257,共4页

目的观察雷帕霉素(rapamycin)对体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的作用。方法组织贴块法体外原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,取对数生长期细胞(第6￣10代)用作实验,MTT法检测不同浓度雷帕霉素对平滑肌细胞增殖的效果,并用RT... 目的观察雷帕霉素(rapamycin)对体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的作用。方法组织贴块法体外原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,取对数生长期细胞(第6￣10代)用作实验,MTT法检测不同浓度雷帕霉素对平滑肌细胞增殖的效果,并用RT-PCR法检测其对平滑肌细胞增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)mRNA表达情况的影响。结果①MTT法检测显示雷帕霉素呈剂量依赖性抑制体外培养的大鼠平滑肌细胞增殖,各组吸光值(A)分别为:对照组0.902±0.106;0.1ng/mL组0.873±0.079;1ng/mL组0.797±0.046;10ng/mL组0.692±0.061;100ng/mL组0.624±0.075。方差分析差异有显著性,F=28.85,P<0.001;两两比较1ng/mL以上浓度组与对照组间差异均有显著性,不同浓度间差异显著。0.1ng/mL组与对照组相比差异无显著性。②RT-PCR显示雷帕霉素以浓度依赖模式抑制大鼠平滑肌细胞PCNA-mRNA合成。各组校正后光密度值分别为:对照组219.35±7.20;0.1ng/mL组212.39±6.56;1ng/mL组113.15±10.09;10ng/mL组97.17±12.25;100ng/mL组84.38±8.66。方差分析F=195.49,P<0.001。两两比较与MTT检测相同。结论雷帕霉素呈剂量依赖性显著抑制大鼠平滑肌细胞的增殖,1ng/mL时即可明显起效。雷帕霉素有望成为治疗内支架术后再狭窄的理想药物之一。 展开更多

关键词 雷帕霉素 血管平滑肌细胞 细胞增殖 大鼠

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Annexin A1在胃癌中的表达及其与胃癌预后的关系 被引量：10

2

作者 张珑涓 李斌 +5 位作者 谢至 陈连周 黄晓卉 苏乔 李雯 毕颎 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期237-241,共5页

【目的】通过检测Annexin A1蛋白在胃癌原发灶和转移灶中表达,探讨Annexin A1表达的病理临床意义及对预后的影响。【方法】构建组织芯片包含胃癌原发灶及相应的转移灶70对、癌旁组织30例,应用免疫组化方法检测Annexin A1在胃癌组织芯片... 【目的】通过检测Annexin A1蛋白在胃癌原发灶和转移灶中表达,探讨Annexin A1表达的病理临床意义及对预后的影响。【方法】构建组织芯片包含胃癌原发灶及相应的转移灶70对、癌旁组织30例,应用免疫组化方法检测Annexin A1在胃癌组织芯片中的表达,结合病理临床资料及生存资料,分析Annexin A1表达与病理临床参数的相关性。【结果】Annexin A1在癌旁组织中不表达,在胃癌原发灶中的阳性表达率为4/70(5.7%),淋巴结转移灶中的表达率为17/70(24.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移灶ANXA1的表达与TNM高分期相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示淋巴结转移灶ANXA1表达阳性组患者生存时间较阴性组短,差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归多因素分析ANXA1表达阳性是胃癌早期死亡的危险因素。【结论】Annexin A1的表达与肿瘤的远处转移、胃癌患者的早期死亡密切相关。 展开更多

关键词 胃癌 ANNEXIN A1 转移 预后

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ITP患者脾切除前后外周血Th亚群细胞因子的变化及意义 被引量：8

3

作者 王俊 郑冬 +1 位作者 张珑涓 郑朝旭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期901-906,共6页

目的:探讨辅助性T淋巴细胞(T helper lymphocyte,Th)亚群细胞因子在原发性免疫性血小板减少症(ITP)患者脾切除术前后的表达及意义。方法:采用QuantiGene Plex(QGP)方法检测22例ITP患者腹腔镜脾切除术前后外周血Th1(IL-2和IFN-γ)、Th2(I... 目的:探讨辅助性T淋巴细胞(T helper lymphocyte,Th)亚群细胞因子在原发性免疫性血小板减少症(ITP)患者脾切除术前后的表达及意义。方法:采用QuantiGene Plex(QGP)方法检测22例ITP患者腹腔镜脾切除术前后外周血Th1(IL-2和IFN-γ)、Th2(IL-4、IL-5、IL-6和IL-10)、Th3(TGF-β1)和Th17(IL-17)细胞因子mRNA表达水平的变化。30例健康体检者作为对照组。结果:(1)术前组IL-2表达水平较对照组明显降低(P<0.05),IL-17表达水平较对照组明显升高(P<0.05),其它细胞因子表达水平在术前组和对照组之间无显著差异(P>0.05)。术后组TGF-β1表达较术前组和正常对照组均明显升高(P<0.05);术后组IL-2表达较术前有所升高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。其它细胞因子表达水平在术前组和术后组之间无显著性差异(P>0.05)。(2)术前IL-2与IFN-γ之间成正相关(r=0.647,P<0.01),术前其它细胞因子之间均无明显相关性(P>0.05)。术后3对细胞因子之间成正相关,分别是IL-2与IFN-γ(r=0.787,P<0.01),IL-17与IL-2(r=0.554,P<0.01),IL-17与IFN-γ(r=0.461,P<0.05);术后其它细胞因子之间均无明显相关性(P>0.05)。结论:ITP患者存在Th亚群细胞因子失衡,脾切除术可改善ITP患者部分Th亚群细胞因子的失衡。 展开更多

关键词 血小板减少 脾切除术 细胞因子类 辅助性T淋巴细胞

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肿瘤型M2丙酮酸激酶与癌类抗原19-9联合检测在胰腺癌诊断中的应用 被引量：4

4

作者 周娟 王东 +3 位作者 陈连周 曾文涛 傅茜 黄晓卉 《实用医学杂志》 CAS 2005年第20期2252-2253,共2页

目的:探讨肿瘤型M2丙酮酸激酶(TumorM2-PK,TuM2-PK)、糖类抗原19-9(CA19-9)在胰腺癌中的表达特性。方法:采用ELISA法分别检测50例胰腺癌患者、35例胰腺炎患者及80名健康体检人血中TuM2-PK、CA19-9含量。结果:胰腺癌患者血中TuM2-PK、CA1... 目的:探讨肿瘤型M2丙酮酸激酶(TumorM2-PK,TuM2-PK)、糖类抗原19-9(CA19-9)在胰腺癌中的表达特性。方法:采用ELISA法分别检测50例胰腺癌患者、35例胰腺炎患者及80名健康体检人血中TuM2-PK、CA19-9含量。结果:胰腺癌患者血中TuM2-PK、CA19-9值分别是(164.9±41.3)U/mL、(630.1±200.3)U/mL。在胰腺癌的诊断中单独检测时TuM2-PK、CA19-9敏感性分别为75%、74.5%,特异性分别为90%、85%,联合测定敏感性、特异性分别达到82.3%、100%。结论:联合检测TuM2-PK、CA19-9有助于提高对胰腺癌诊断的特异性和敏感性。 展开更多

关键词 丙酮酸激酶 胰腺肿瘤 胰腺癌患者 联合检测 糖类抗原 肿瘤型 诊断 CA19-9 ELISA法 M2-PK

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猪-人-鼠嵌合体动物模型的建立及介导人T细胞对猪异种抗原的耐受 被引量：3

5

作者 邹一丰 张珑娟 +5 位作者 吴小剑 何晓生 练磊 刘雷 汪建平 兰平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期318-322,共5页

目的:通过共移植人胎胸腺、胎肝组织及猪骨髓细胞于SCID鼠体内,建立猪-人-鼠嵌合体模型,介导人T细胞对猪异种抗原的免疫耐受。方法:实验鼠分成3组:A组为猪骨髓细胞移植组,B组为人胎胸腺、肝脏组织移植组,C组为猪骨髓细胞+人胎胸腺+肝脏... 目的:通过共移植人胎胸腺、胎肝组织及猪骨髓细胞于SCID鼠体内,建立猪-人-鼠嵌合体模型,介导人T细胞对猪异种抗原的免疫耐受。方法:实验鼠分成3组:A组为猪骨髓细胞移植组,B组为人胎胸腺、肝脏组织移植组,C组为猪骨髓细胞+人胎胸腺+肝脏组织移植组;在移植后每3周,用流式细胞仪测定猪和人嵌合体的水平,直至20周;通过混和淋巴细胞反应确定人T细胞的功能及对猪异种抗原的耐受情况。结果:猪嵌合体在所有实验鼠(包括共移植人组织的实验鼠)中持续时间均超过20周;在移植人胎组织20周时,T细胞的数量为0.7×106/L,在外周血细胞中所占的百分比为0.14%±0.01%;人嵌合体在所有实验鼠(包括共移植猪骨髓细胞的实验鼠)中持续时间亦超过20周。结论:通过共移植人胎胸腺、胎肝组织及猪造血干细胞于SCID鼠体内,可以建立猪-人-鼠嵌合体模型,并能诱导人T细胞对猪异种抗原的免疫耐受。 展开更多

关键词 嵌合体 免疫耐受 模型 动物 移植 异种

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血管内皮生长因子C及膜突蛋白表达与宫颈癌恶性进展的相关性 被引量：4

6

作者 程杨 何勉 +2 位作者 李雯 刘军秀 刘琼珊 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期173-176,共4页

【目的】研究宫颈癌恶变过程中血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)及膜突蛋白(moesin)的表达变化,并在培养的宫颈癌细胞中初步探讨VEGF-C对膜突蛋白的调控作用。【方法】利用临床上活体取材的不同临床分期的宫颈癌组织标本及正常对照宫颈组... 【目的】研究宫颈癌恶变过程中血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)及膜突蛋白(moesin)的表达变化,并在培养的宫颈癌细胞中初步探讨VEGF-C对膜突蛋白的调控作用。【方法】利用临床上活体取材的不同临床分期的宫颈癌组织标本及正常对照宫颈组织,蛋白免疫印迹法检测VEGF-C及moesin蛋白的表达情况。体外培养宫颈癌细胞株Hela细胞,蛋白免疫印迹法测定VEGF-C对moesin蛋白的表达和磷酸化的调控作用。【结果】随着宫颈癌临床分期的增高,VEGF-C、moesin蛋白及磷酸化moesin蛋白表达水平均随之增加。与正常宫颈组织比较,宫颈原位癌(CIN)组织中VEGF-C、moesin、磷酸化moesin蛋白表达分别增加了45%±9%、63%±12%、74%±16%(P<0.05);宫颈鳞癌Ⅰ期各蛋白增高幅度分别为94%±18%、104%±27%、123%±30%(P<0.01);宫颈鳞癌Ⅱ期(未放疗化疗)各蛋白表达增高更为显著,其幅度分别为186%±24%、246%±37%、194%±28%(P<0.001)。在培养的宫颈癌细胞株HeLa细胞上,VEGF-C(100#g/L)处理24h后,可显著增高moesin蛋白、磷酸化moesin蛋白的表达。VEGF-C单克隆抗体可抑制VEGF-C对moesin蛋白表达及磷酸化的上调作用。【结论】VEGF-C、moesin蛋白表达与宫颈癌恶性程度密切相关,推测VEGF-C可能通过上调moesin表达及其磷酸化水平而促进宫颈癌的恶性进展。 展开更多

关键词 宫颈癌 血管内皮生长因子C 膜突蛋白

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糖尿病患者血清超敏C反应蛋白、白细胞介素-6及白细胞介素-10的变化 被引量：4

7

作者 曾文涛 王东 +3 位作者 傅茜 陈连周 吴夏枫 王长希 《实用医学杂志》 CAS 2006年第17期1995-1997,共3页

目的:研究血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)在糖尿病患者中的变化,及其对心血管并发症的预示作用。方法:收集99例糖尿病患者血清,其中胆固醇正常者68例,胆固醇升高者31例,及50例正常体检人员的血... 目的:研究血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)在糖尿病患者中的变化,及其对心血管并发症的预示作用。方法:收集99例糖尿病患者血清,其中胆固醇正常者68例,胆固醇升高者31例,及50例正常体检人员的血清。使用乳胶增强免疫透射比浊法检测hs-CRP,一步酶法检测胆固醇,同时采用ELISA双抗体夹心法测定血清IL-6、IL-10。结果:正常对照组血清hs-CRP、IL-6和IL-10浓度分别为(1.66±0.95)mg/L、(24±8)ng/L和(27±7)ng/L,胆固醇正常糖尿病组血清hs-CRP、IL-6和IL-10浓度分别为(2.77±1.19)mg/L、(25±10)ng/L和(28±8)ng/L,胆固醇升高糖尿病组血清hs-CRP、IL-6和IL-10浓度分别为(5.70±1.81)mg/L、(34±10)ng/L和(21±5)ng/L。与正常对照组、胆固醇正常糖尿病组相比,胆固醇升高糖尿病组hs-CRP、IL-6和IL-10表达水平差异均有统计学意义(分别为P<0.01、P<0.05、P<0.05)。与正常对照组比较,胆固醇正常糖尿病组hs-CRP高表达(P<0.05),而这两组间IL-6和IL-10表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:炎症因子hs-CRP在预测糖尿病患者并发冠心病中具有重要的临床意义。 展开更多

关键词 C反应蛋白质 白细胞介素6 白细胞介素10 糖尿病

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抗原致敏IL-12基因修饰的树突状细胞诱导抗肾癌免疫的体外研究 被引量：2

8

作者 罗道升 戴宇平 +3 位作者 张珑涓 赵继宗 郑伏甫 罗彬 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期397-401,共5页

【目的】探讨肾癌细胞抗原致敏白介素-12(IL-12)基因修饰的树突状细胞(DC)体外诱导、激活细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫杀伤肾癌细胞的效能及相关免疫机制。【方法】采用重组逆转录病毒介导IL-12基因修饰人外周血单个核细胞(PBMC)来源的DC... 【目的】探讨肾癌细胞抗原致敏白介素-12(IL-12)基因修饰的树突状细胞(DC)体外诱导、激活细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫杀伤肾癌细胞的效能及相关免疫机制。【方法】采用重组逆转录病毒介导IL-12基因修饰人外周血单个核细胞(PBMC)来源的DC;超声细胞破碎法提取肾癌细胞粗提抗原(Ag)致敏经IL-12转染的DC;ELISA法检测各组DCs和各组CTLs上清中IL-12、IFN-γ因子的分泌水平;流式细胞仪(FACS)分析各组DCs表面CD83、CD86、HLA-DR的表达;MTT法检测DC刺激同源T淋巴细胞增殖的能力及CTL免疫杀伤肾癌细胞的效能;统计学分析比较各组间的差异。【结果】经IL-12基因修饰和抗原致敏后的DC高表达CD83和CD86分子分别为(65.9%±3.1%,92.8%±3.4%),分泌高水平IL-12(279.6±1.7)pg/mL及IFN-γ(892±31)pg/mL,刺激同源T淋巴细胞增殖明显,诱导激活的CTL上清中IFN-γ水平(1146±31)pg/mL显著高于对照组;CTL对肾癌细胞有强大的杀伤作用,显著高于各对照组。【结论】经IL-12基因修饰和抗原致敏后的DC能有效地诱导CTL特异性抗肿瘤免疫应答。其机制可能与IL-12基因修饰和抗原致敏活化了DC抗原提呈第二信号,促进了DC高分泌IL-12因子,激活了T淋巴细胞致使CTL分泌IFN-γ的能力增强密切相关。 展开更多

关键词 肾细胞癌 肿瘤抗原 白细胞介素-12 树突状细胞 肿瘤疫苗

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烟碱拮抗秋水仙碱诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用 被引量：2

9

作者 黄晓卉 朱小南 +2 位作者 许燕 陈汝筑 汪雪兰 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期160-163,167,共5页

【目的】研究烟碱对皮质神经元的保护作用。【方法】在培养至第6天的皮质神经元中以不同浓度(1 μmol/L,10μmol/L,100μmol/L)烟碱预孵2 h,再加入0.1μmol/L秋水仙碱作用24 h。通过相差显微镜形态学观察,Hoechst33258核荧光染色进行凋... 【目的】研究烟碱对皮质神经元的保护作用。【方法】在培养至第6天的皮质神经元中以不同浓度(1 μmol/L,10μmol/L,100μmol/L)烟碱预孵2 h,再加入0.1μmol/L秋水仙碱作用24 h。通过相差显微镜形态学观察,Hoechst33258核荧光染色进行凋亡率计数和测定乳酸脱氢酶相对释放量(LDH)的实验,再测试10μmol/L 预孵不同时间(0.5,2,8)h的烟碱对秋水仙碱诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用。【结果】秋水仙碱可诱导皮质神经元调亡,烟碱可拮抗秋水仙碱的此种作用。其中10μmol/L烟碱预孵2 h保护作用最强。【结论】烟碱可拮抗秋水仙碱诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用。 展开更多

关键词 烟碱 皮质神经元 秋水仙碱 凋亡 乳酸脱氢酶

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半乳糖凝集素3在血管内皮生长因子C促宫颈癌转移中的作用 被引量：3

10

作者 程杨 夏薇 +1 位作者 陈华云 何勉 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期553-557,共5页

【目的】研究半乳糖凝集素3(Gal-3)在血管内皮生长因子C(VEGF-C)促宫颈癌转移中的作用。【方法】体外培养宫颈癌细胞株SiHa细胞,免疫印迹法检测不同浓度的Gal-3作用于细胞不同时间,对VEGF-C受体(VEGFR3)磷酸化的影响;以VEGF-C处理SiHa细... 【目的】研究半乳糖凝集素3(Gal-3)在血管内皮生长因子C(VEGF-C)促宫颈癌转移中的作用。【方法】体外培养宫颈癌细胞株SiHa细胞,免疫印迹法检测不同浓度的Gal-3作用于细胞不同时间,对VEGF-C受体(VEGFR3)磷酸化的影响;以VEGF-C处理SiHa细胞10 min,免疫共沉淀法观察Gal-3与VEGFR3的蛋白交联变化;转染Gal-3 siRNA抑制Gal-3表达后,采用Transwell侵袭小室法观察VEGF-C对SiHa细胞侵袭的影响。【结果】Gal-3(10μg/mL)处理SiHa细胞2 min、5 min及10 min后,均能促进VEGFR3磷酸化,其增加幅度分别为(162.4±10.4)%(n=3,P<0.05)、(202.5±16.2)%(n=3,P<0.01)、(282.4±18.6)%(n=3,P<0.001)。不同浓度的Gal-3(2、5、10μg/mL)处理SiHa细胞10 min,均能促进VEGFR3磷酸化,其增加幅度分别为(144.6±6.5)%(n=3,P<0.05)、(192.8±12.4)%(n=3,P<0.01)、(263.6±15.4)%(n=3,P<0.001)。VEGF-C(100 ng/mL)处理SiHa细胞10 min后,与对照组比较,VEGFR3与Gal-3之间的蛋白交联明显增加。VEGF-C可明显促进SiHa细胞的侵袭,与对照组比较,其增加幅度为(263.6±32.8)%(n=5,P<0.01)。而在转染特异性Gal-3 siRNA 48 h抑制Gal-3表达后,VEGF-C促细胞侵袭的能力明显减弱,抑制率为(80.5±10.2)%(n=5,P<0.01)。【结论】Gal-3可介导VEGF-C促宫颈癌细胞侵袭的作用,这一效应可能与Gal-3交联VEGFR3蛋白,并进一步引发VEGFR3磷酸化有关。 展开更多

关键词 宫颈癌 血管内皮生长因子C 半乳糖凝集素3 侵袭

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活化巨噬细胞培养上清液对VSMCsⅠ型胶原合成的影响 被引量：3

11

作者 王子亮 杨建勇 +2 位作者 庄文权 陈伟 徐鸿绪 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期297-299,315,共4页

【目的】观察活化巨噬细胞培养上清液对原代培养VSMCsⅠ型胶原代谢的影响。【方法】体外原代培养大鼠血管平滑肌细胞并制备活化巨噬细胞培养上清液,L鄄3H脯氨酸掺入法和RT鄄PCR检测不同浓度和作用时间的巨噬细胞培养上清液对VSMCs的胶... 【目的】观察活化巨噬细胞培养上清液对原代培养VSMCsⅠ型胶原代谢的影响。【方法】体外原代培养大鼠血管平滑肌细胞并制备活化巨噬细胞培养上清液,L鄄3H脯氨酸掺入法和RT鄄PCR检测不同浓度和作用时间的巨噬细胞培养上清液对VSMCs的胶原合成和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。【结果】活化巨噬细胞培养上清液促进VSMCs的胶原合成,L鄄3H脯氨酸掺入量明显增加,呈剂量相关性,r=0.48(P<0.05);Ⅰ型胶原mRNA表达随浓度和时间增加而上升,r值分别为0.58(P<0.05)和0.55(P<0.05)。【结论】活化巨噬细胞分泌促进VSMCs胶原代谢,呈时间和剂量相关性,这可能是支架植入术后血管内膜过度增生的重要机制之一。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 巨噬细胞 胶原 RT-PCR检测

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HLA-B27基因检测对诊断强直性脊柱炎的临床意义 被引量：2

12

作者 曾文涛 陈连周 +1 位作者 徐鸿绪 傅茜 《实用医学杂志》 CAS 2002年第3期247-248,共2页

目的 :探讨进行HLA B2 7基因检测对早期诊断强直性脊柱炎 (AS)的临床意义。方法 :采用聚合酶链反应 序列特异性引物技术 (PCR SSP)方法对 6 80例患者 (其中AS患者 15 0例 ,5 30例其它疾病患者 )进行HLA B2 7基因检测。结果 :6 80例标本... 目的 :探讨进行HLA B2 7基因检测对早期诊断强直性脊柱炎 (AS)的临床意义。方法 :采用聚合酶链反应 序列特异性引物技术 (PCR SSP)方法对 6 80例患者 (其中AS患者 15 0例 ,5 30例其它疾病患者 )进行HLA B2 7基因检测。结果 :6 80例标本中 ,15 0例AS患者 138例 ( 92 0 % )HLA B2 7抗原阳性 ,其他 5 30例患者 5 1例 ( 9 6 2 % )HLA B2 7抗原阳性 ,检测结果的敏感性为 92 0 % ,特异性为 89 6 %。结论 :HLA B2 7基因与AS呈高度相关性 ,可以作为AS的早期辅助诊断和鉴别诊断的指标。 展开更多

关键词 HLA-B27抗原 强直性脊柱炎 聚合酶链反应 临床意义 诊断

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核基蛋白监测膀胱癌复发的临床价值 被引量：1

13

作者 徐战平 戴宇平 +3 位作者 赵继宗 黄正宇 孙祥宙 邱红 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第B03期41-43,共3页

【目的】探讨核基蛋白(NMP22)在监测复发性膀胱移行细胞癌的临床价值。【方法】应用酶联免疫法检测81例膀胱癌术后患者的尿 NMP22含量,并与膀胱镜检查和尿细胞学检查(UC)相比较。【结果】膀胱镜检有44例证实复发,其中有33例尿 NMP22表... 【目的】探讨核基蛋白(NMP22)在监测复发性膀胱移行细胞癌的临床价值。【方法】应用酶联免疫法检测81例膀胱癌术后患者的尿 NMP22含量,并与膀胱镜检查和尿细胞学检查(UC)相比较。【结果】膀胱镜检有44例证实复发,其中有33例尿 NMP22表现为阳性,敏感性为75.0%,特异性为94.6%,10例 UC 检查表现阳性,敏感性为22.7%。在病理分期 T_a、T_1>T_2组中敏感性分别为60.0%、72.7%、85.7%,T_a 与 T_1,T_a 与 T_2组差异显著,P<0.05,分级 G_1、G_2、G_3组中敏感性为71.4%、72.2%、91.7%,G_1与 G_2,G_1与 G_3组差异显著,P<0.01。【结论】尿 NMP22不但可以监测膀胱癌的复发,还可以大致判断膀胱癌的浸润性和恶性度。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 复发 核基质蛋白(NMP22)

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AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达 被引量：1

14

作者 岳殿超 李宝金 +3 位作者 徐辉雄 张泷涓 王瑛 吕明德 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期591-594,共4页

【目的】构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析。【方法】采用PCR法扩增人AFP基因启动子。回收纯化后克隆入pBluescript Ⅱ KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中... 【目的】构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析。【方法】采用PCR法扩增人AFP基因启动子。回收纯化后克隆入pBluescript Ⅱ KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中,构建成pEGFP-C1-AFP-TK。对获得的片段进行鉴定、细胞靶向和外源基因表达的鉴定。【结果】序列分析表明,该启动子含300bp核苷酸,与已报道的序列比较,100%相符。限制性酶切分析,重组质粒pEGFP-C1-AFP-TK已经克隆AFP启动子。RT-PCR及Western blotting分析pEGFP-C1-AFP-TK转染后的HepG2细胞后,表明TK基因在mRNA水平上能有效的表达,裂解后的HepG2细胞膜蛋白中有相对分子质量约61～83ku大小的特异性条带。【结论】人肝细胞癌(HepG2)靶向性质粒pEGFP-C1-AFP-TK构建成功。 展开更多

关键词 AFP启动子 HEPG2细胞 靶向表达 单纯疱疹病毒-胸腺嘧啶激酶1

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白三烯受体拮抗剂孟鲁斯特对小鼠气道炎症的抑制作用 被引量：1

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作者 李雯 夏金堂 +2 位作者 戚赐聪 徐鸿绪 邬扬源 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期659-663,共5页

【目的】探讨白三烯受体1拮抗剂孟鲁斯特(montelukast，MK)抑制小鼠气道炎症的作用及可能的机制。【方法】致敏的BALB／c小鼠持续吸入10g／L雾化卵白蛋白(OVA)30min，OVA吸入前2d开始连续3d或5d尾静脉给予MK或生理盐水(saline)，OVA吸入... 【目的】探讨白三烯受体1拮抗剂孟鲁斯特(montelukast，MK)抑制小鼠气道炎症的作用及可能的机制。【方法】致敏的BALB／c小鼠持续吸入10g／L雾化卵白蛋白(OVA)30min，OVA吸入前2d开始连续3d或5d尾静脉给予MK或生理盐水(saline)，OVA吸入后24h及72h取材，瑞氏染色观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中炎症细胞的渗出情况；ELISA方法检测血清、BALF和肺组织中有关细胞因子水平；HE、刚果红染色观察肺组织炎症细胞的渗出；免疫组化染色观察血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)和嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)的表达；原位杂交研究IL-5 mRNA的变化。【结果】给予MK5d减少BALF嗜酸性粒细胞渗出达90％以上，嗜酸性粒细胞减少随MK剂量(10、25、62.5mg／kg)的增加呈量效关系。ELISA结果表明给予3d MK使肺、血清和BALF中IL-5、IL-4水平显著降低，肺IL-13含量也明显减少(P＜0.05)。但MK组肺组织eotaxin下降与saline组比较无明显差异(P＞0.05)。免疫组化显示MK组肺组织VCAM-1和eotaxin表达比saline组明显减弱；原位杂交可见MK组肺组织IL-5 mRNA的表达比saline组减弱。【结论】MK减轻气道炎症，可能通过抑制VCAM-1表达和IL-5、IL-4、IL-13等细胞因子分泌起作用。急性哮喘中应用大剂量MK抗炎治疗值得进一步探讨。 展开更多

关键词 白三烯受体1拮抗剂MK 小鼠气道炎症 血管内皮细胞黏附分子 炎症细胞因子

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烟碱拮抗秋水仙碱诱导的乳大鼠大脑皮质神经元凋亡

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作者 黄晓卉 朱小南 +2 位作者 王琴 陈汝筑 汪雪兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期340-343,共4页

目的:探讨烟碱拮抗秋水仙碱诱导乳大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用机制。方法:培养Sprague-Dawley(SD)乳大鼠大脑皮层神经元,Hoechst33258核荧光染色进行凋亡率计数检测神经元凋亡,Akt(ser473)Western blotting分析试剂盒做激酶分析。结果... 目的:探讨烟碱拮抗秋水仙碱诱导乳大鼠大脑皮质神经元凋亡的作用机制。方法:培养Sprague-Dawley(SD)乳大鼠大脑皮层神经元,Hoechst33258核荧光染色进行凋亡率计数检测神经元凋亡,Akt(ser473)Western blotting分析试剂盒做激酶分析。结果:0.1μmol/L秋水仙碱可降低皮层神经元的存活率,诱导大鼠皮层神经元凋亡。但是,当10μmol/L烟碱预孵2 h后再加入0.1μmol/L秋水仙碱作用24 h,烟碱可拮抗秋水仙碱的此种凋亡作用,将凋亡率从(62±1)%降低到(38±2)%,P<0.05。Akt(ser473)磷酸化在0.5 h时开始下降,于6 h时最低,仅为对照组的1/3。且Akt(ser473)磷酸化水平随时间(0.5、1、6、12和18 h)呈钟型性改变,分别是对照组的1.3、3.7、2.4、2.1和1.9倍,P<0.05。结论:烟碱对大鼠皮质神经元凋亡的拮抗作用可能与其激活Akt有关。 展开更多

关键词 尼古丁 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 大脑皮质 神经元 秋水仙素 细胞凋亡

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重组人血管内皮抑素对人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226增殖和相关蛋白表达的影响 被引量：4

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作者 夏盈 郑冬 +2 位作者 张珑涓 李娟 郭小娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期826-832,共7页

目的:研究重组人血管内皮抑素(恩度)在体外对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226细胞增殖、细胞周期及细胞相关蛋白表达的影响。方法:用CCK-8检测恩度对RPMI 8226细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡和细胞周期的改变;Western blotting检测... 目的:研究重组人血管内皮抑素(恩度)在体外对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226细胞增殖、细胞周期及细胞相关蛋白表达的影响。方法:用CCK-8检测恩度对RPMI 8226细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡和细胞周期的改变;Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3表达变化;以实时定量PCR和Westernblotting检测RPMI 8226细胞血管细胞粘附因子1(VCAM-1)、白细胞介素6(IL-6)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA以及蛋白表达变化;ELISA检测细胞上清液中细胞因子IL-6和VEGF水平。结果:恩度对RPMI 8226细胞有增殖抑制作用,250 mg/L恩度对RPMI 8226细胞72 h增殖抑制率为(59.5±5.6)%(P<0.05),细胞G1期比例增加(P<0.05),但对细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3表达无显著影响;经恩度作用后RPMI 8226细胞VCAM-1表达下降(P<0.05),IL-6和VEGF表达及分泌降低(均P<0.05)。结论:恩度能通过改变细胞周期变化抑制RPMI 8226细胞增殖,并能减少VCAM-1表达及IL-6、VEGF分泌,对细胞凋亡无明显改变。 展开更多

关键词 白细胞介素6 重组人血管内皮抑素 多发性骨髓瘤 血管内皮生长因子 血管细胞粘附因子1

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硫化氢抑制骨肉瘤U2OS细胞的体外生长 被引量：1

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作者 郭海华 李敬春 +3 位作者 冯鉴强 张泷涓 雍碧城 黄纲 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期358-363,共6页

【目的】探讨硫化氢单独及与顺铂联用对骨肉瘤细胞生长的影响及其可能机制。【方法】分别用0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mmol/L NaHS(硫化氢载体)单独或与20 mg/L顺铂共同作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,CCK-8比色法法检测细... 【目的】探讨硫化氢单独及与顺铂联用对骨肉瘤细胞生长的影响及其可能机制。【方法】分别用0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mmol/L NaHS(硫化氢载体)单独或与20 mg/L顺铂共同作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,CCK-8比色法法检测细胞存活率;分别用0.4及1.0 mmol/L NaHS作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,1.0 mmol/L NaHS单独或与20 mg/L顺铂联用作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,细胞单克隆形成法检测各组单克隆数;1.0 mmol/L NaHS与20 mg/L顺铂共同作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,Western-Blot法检测Bcl-2、Bax、NFκB蛋白的表达。【结果】硫化氢对U2OS细胞生长的影响:0.2、0.4、0.6、0.8 mmol/L NaHS作用U2OS细胞24 h,细胞存活率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);1、2、3、4、5 mmol/L NaHS作用U2OS细胞24 h,细胞存活率分别为(90.01±7.49)%、(88.00±4.12)%、(87.26±4.05)%、(85.40±4.39)%和(82.99±4.65)%,与对照组比较,能不同程度抑制U2OS细胞的生长(P<0.05)。0.4 mmol/L NaHS组、1 mmol/L NaHS组细胞单克隆数分别为445.00±25.00、306.00±17.69,与对照组(464.33±8.32)比较,1 mmol/L NaHS组细胞单克隆数减少(P<0.01);0.4mmol/L NaHS组差异无统计学意义(P>0.05)。NaHS与顺铂联用对骨肉瘤细胞的影响:分别用0.8、1、2、3、4、5 mmol/L NaHS联合20 mg/L顺铂共同作用U2OS细胞24 h,细胞存活率分别为(54.13±4.03)%、(54.09±1.13)%、(50.37±4.56)%、(41.44±3.95)%、(40.00±4.34)%和(36.35±3.90)%,与单用顺铂组(59.76±3.15%)比较,存活率下降(P<0.05)。NaHS+顺铂组细胞单克隆数为231.00±13.52,与顺铂组(285.67±11.59)比较,细胞单克隆数下降(P<0.01);NaHS+顺铂组NFκB蛋白表达及Bcl-2/Bax蛋白表达比值较顺铂组下降。【结论】1 mmol/L浓度以上的NaHS能抑制骨肉瘤细胞的生长,0.8 mol/L浓度以上的NaHS通过减少NFκB入核,增加细胞的凋亡,从而增强顺铂对骨肉瘤细胞的抑制作用。 展开更多

关键词 硫化氢 顺铂 骨肉瘤U2OS细胞 抑制 NFΚB

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黄芪注射液对特发性肾病综合征患儿血清IL-10的影响

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作者 林飞进 高岩 +3 位作者 陈述枚 赵继宗 黄金城 崔敏娴 《医药导报》 CAS 2006年第5期415-417,共3页

目的 观察黄芪注射液对特发性肾病综合征（INS）患儿血清白细胞介素10（IL-10）水平的影响。方法 63例未用过糖皮质激素治疗或诊断为INS，但使用糖皮质激素治疗已完全缓解并停用激素〉3个月又复发的INS患儿，随机分为治疗组A33例和治疗... 目的 观察黄芪注射液对特发性肾病综合征（INS）患儿血清白细胞介素10（IL-10）水平的影响。方法 63例未用过糖皮质激素治疗或诊断为INS，但使用糖皮质激素治疗已完全缓解并停用激素〉3个月又复发的INS患儿，随机分为治疗组A33例和治疗组B30例。治疗组A给予泼尼松口服治疗，1．5～2．0mg·kg^-1·d^-1，qd；另加用黄芪注射液0．5mL·kg^-1·d^-1；同时给予利尿、抗感染等对症处理；治疗组B除不给予黄芪注射液外，其他治疗同治疗组A。两组均在INS初发期和治疗1个月后采用双抗体夹心ELISA方法检测血清IL-10水平。另设25例正常儿童为对照组。结果 发病初期，治疗组A和治疗组B血清IL-10水平均较正常对照组高（均P〈0．01）。治疗组B经泼尼松治疗后血清IL-10水平[（9．36±3．43）Pg·mL^-1较治疗前明显降低（P〈0．01），且与正常对照组比较，差异无显著性（P〉0．05）；治疗组A治疗后血清IL-10水平[（12．10±4．14）Pg·mL^-1]与本组治疗前比较，差异无显著性；仍较正常对照组和治疗组B治疗后高，且均差异有显著性（均P〈0．05）。结论 黄芪注射液能防止INS患儿血清IL-10水平降低，能对抗激素对IL-10产生的抑制作用，这可能是黄芪注射液降低INS患儿尿蛋白含量的作用机制之一。 展开更多

关键词 黄芪注射液 肾病综合征 特发性 白细胞介素10(IL-10)

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