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矢车菊素-3-葡萄糖苷通过降低STAT3活化抑制TNF-α诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖
被引量：
5
1
作者
方仕
罗小琴
+5 位作者
吴晓滨
麦海妍
彭俊生
卢味
卓淑雨
叶艳彬
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期716-722,共7页
【目的】探讨矢车菊素-3-葡萄糖苷(C3G)对TNF-α诱导的血管平滑肌增殖的影响及可能的机制。【方法】C57BL/6J小鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)购于ATCC,体外培养后以C3G对细胞进行预处理后观察TNF-α的促细胞增殖作用;Dihydroethidium(DHE)...
【目的】探讨矢车菊素-3-葡萄糖苷(C3G)对TNF-α诱导的血管平滑肌增殖的影响及可能的机制。【方法】C57BL/6J小鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)购于ATCC,体外培养后以C3G对细胞进行预处理后观察TNF-α的促细胞增殖作用;Dihydroethidium(DHE)荧光染色检测VSMC在TNF-α作用下的活性氧(ROS)生成情况;实时定量PCR检测细胞内NADPH氧化酶活化蛋白1(NoxA1)的mRNA水平;蛋白质印迹法检测细胞内NoxA1、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3及β-actin的表达水平。统计学方法采用单因素方差分析。【结果】C3G预处理能够抑制TNF-α诱导的VSMC增殖,该作用呈现剂量、时间依赖性。联合应用50μmol/L C3G及100μmol/L apocynin显著减少TNF-α诱导ROS的生成。C3G联合apocynin较C3G或apocynin单独孵育更能显著抑制TNF-α处理下VSMC内NoxA1基因的表达及STAT3蛋白的磷酸化。应用ROS清除剂触媒(catalase 2 000 U/mL)能显著抑制TNF-α诱导的VSMC增殖及STAT3蛋白活化。【结论】C3G对抗TNF-α诱导VSMC增殖的机制很可能是通过削弱NoxA1导致的ROS生成,从而抑制STAT3蛋白的激活。
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关键词
矢车菊素-3-葡萄糖苷
信号转导与转录激活因子3
活性氧
血管平滑肌细胞
NADPH氧化酶活化蛋白1
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职称材料
结肠癌干细胞样细胞的体外培养、鉴定及n-3多不饱和脂肪酸对结肠癌干细胞样细胞的抗增殖作用
被引量：
6
2
作者
方仕
龙健婷
+4 位作者
张冰
杨婷
卢味
李鹤平
石汉平
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期2135-2141,共7页
目的:采取无血清培养法培养出SW620细胞球,并对细胞球细胞进行干细胞鉴定;在细胞水平研究n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFAs)对结肠癌干细胞样细胞的作用。方法:正常培养人结肠癌细胞株SW620并使其逐步适应无血清培养条件,经无血清培养1周后...
目的:采取无血清培养法培养出SW620细胞球,并对细胞球细胞进行干细胞鉴定;在细胞水平研究n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFAs)对结肠癌干细胞样细胞的作用。方法:正常培养人结肠癌细胞株SW620并使其逐步适应无血清培养条件,经无血清培养1周后收集SW620细胞球。用免疫荧光法检测胚胎干细胞标志物SSEA-1和TRA-1-81;采用real-time PCR的方法检测干细胞相关基因Sox-2和Oct-4的表达情况;对比SW620贴壁细胞和干细胞样细胞(CSCLC)在软琼脂上的克隆形成能力;采用裸鼠移植瘤模型比较2种细胞的成瘤能力;用MTS法对比2种细胞在递增浓度的5-氟尿嘧啶(5-FU)或mitomycin C处理下的生长抑制情况;用MTS法、Annexin V/PI染色和台盼蓝染色分别观察递增浓度二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)作用于SW620 CSCLC后细胞生长抑制情况、凋亡情况和死亡情况;MTS法检测5-FU或mitomycin C联合n-3 PUFAs对结肠癌CSCLC增殖的影响。结果:无血清培养法成功从SW620中培养出细胞球。细胞球细胞高表达SSEA-1和TRA-1-81并一过性表达Sox-2和Oct-4基因;对5-FU及mitomycin C相对抵抗;在软琼脂上克隆形成率及在裸鼠皮下的成瘤率均显著高于贴壁细胞,表明这些细胞具有干细胞特性,即为来自于SW620的CSCLC。DHA和(或)EPA作用于SW620CSCLC能抑制细胞生长、诱导细胞凋亡,并能增强5-FU及mitomycin C对其抑制作用。结论:无血清培养法能够从SW620细胞中培养出具有干细胞特性的细胞,它们具有高克隆形成能力及高致瘤性,对化疗药物相对抗拒;DHA和EPA能够诱导SW620来源CSCLC发生凋亡并增强化疗药物的抗肿瘤活性。
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关键词
结肠肿瘤
肿瘤干细胞
无血清培养
N-3多不饱和脂肪酸
化学治疗
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职称材料
题名
矢车菊素-3-葡萄糖苷通过降低STAT3活化抑制TNF-α诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖
被引量：
5
1
作者
方仕
罗小琴
吴晓滨
麦海妍
彭俊生
卢味
卓淑雨
叶艳彬
机构
中山大学附属第一医院临床营养科
中山大学
公共卫生学院
营养
系
中山大学
附属
第六
医院
胃肠外
科
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期716-722,共7页
基金
国家"十一.五"科技支撑计划(2008BAD91B00)
广东省教育部产学研结合项目(2011B090400558)
文摘
【目的】探讨矢车菊素-3-葡萄糖苷(C3G)对TNF-α诱导的血管平滑肌增殖的影响及可能的机制。【方法】C57BL/6J小鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)购于ATCC,体外培养后以C3G对细胞进行预处理后观察TNF-α的促细胞增殖作用;Dihydroethidium(DHE)荧光染色检测VSMC在TNF-α作用下的活性氧(ROS)生成情况;实时定量PCR检测细胞内NADPH氧化酶活化蛋白1(NoxA1)的mRNA水平;蛋白质印迹法检测细胞内NoxA1、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3及β-actin的表达水平。统计学方法采用单因素方差分析。【结果】C3G预处理能够抑制TNF-α诱导的VSMC增殖,该作用呈现剂量、时间依赖性。联合应用50μmol/L C3G及100μmol/L apocynin显著减少TNF-α诱导ROS的生成。C3G联合apocynin较C3G或apocynin单独孵育更能显著抑制TNF-α处理下VSMC内NoxA1基因的表达及STAT3蛋白的磷酸化。应用ROS清除剂触媒(catalase 2 000 U/mL)能显著抑制TNF-α诱导的VSMC增殖及STAT3蛋白活化。【结论】C3G对抗TNF-α诱导VSMC增殖的机制很可能是通过削弱NoxA1导致的ROS生成,从而抑制STAT3蛋白的激活。
关键词
矢车菊素-3-葡萄糖苷
信号转导与转录激活因子3
活性氧
血管平滑肌细胞
NADPH氧化酶活化蛋白1
Keywords
cyanidin-3-glucoside
signal transducer and activator of transcription 3
reactive oxygen species
vascular smoothmuscle cell
NADPI-I oxidase activator 1
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
R543.3 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
结肠癌干细胞样细胞的体外培养、鉴定及n-3多不饱和脂肪酸对结肠癌干细胞样细胞的抗增殖作用
被引量：
6
2
作者
方仕
龙健婷
张冰
杨婷
卢味
李鹤平
石汉平
机构
中山大学附属第一医院临床营养科
中山大学
附属
第一
医院
肿瘤
科
中山大学
附属
第一
医院
核医学
科
中山
市人民
医院
重症治疗
科
中山大学
附属
第一
医院
普通外
科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期2135-2141,共7页
基金
国家"十一.五"科技支撑计划(No.2008BAD91B03)
广东省科技计划社会发展项目(No.2013B021800284)
广东省教育部产学研结合项目(No.2011B090400558)
文摘
目的:采取无血清培养法培养出SW620细胞球,并对细胞球细胞进行干细胞鉴定;在细胞水平研究n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFAs)对结肠癌干细胞样细胞的作用。方法:正常培养人结肠癌细胞株SW620并使其逐步适应无血清培养条件,经无血清培养1周后收集SW620细胞球。用免疫荧光法检测胚胎干细胞标志物SSEA-1和TRA-1-81;采用real-time PCR的方法检测干细胞相关基因Sox-2和Oct-4的表达情况;对比SW620贴壁细胞和干细胞样细胞(CSCLC)在软琼脂上的克隆形成能力;采用裸鼠移植瘤模型比较2种细胞的成瘤能力;用MTS法对比2种细胞在递增浓度的5-氟尿嘧啶(5-FU)或mitomycin C处理下的生长抑制情况;用MTS法、Annexin V/PI染色和台盼蓝染色分别观察递增浓度二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)作用于SW620 CSCLC后细胞生长抑制情况、凋亡情况和死亡情况;MTS法检测5-FU或mitomycin C联合n-3 PUFAs对结肠癌CSCLC增殖的影响。结果:无血清培养法成功从SW620中培养出细胞球。细胞球细胞高表达SSEA-1和TRA-1-81并一过性表达Sox-2和Oct-4基因;对5-FU及mitomycin C相对抵抗;在软琼脂上克隆形成率及在裸鼠皮下的成瘤率均显著高于贴壁细胞,表明这些细胞具有干细胞特性,即为来自于SW620的CSCLC。DHA和(或)EPA作用于SW620CSCLC能抑制细胞生长、诱导细胞凋亡,并能增强5-FU及mitomycin C对其抑制作用。结论:无血清培养法能够从SW620细胞中培养出具有干细胞特性的细胞,它们具有高克隆形成能力及高致瘤性,对化疗药物相对抗拒;DHA和EPA能够诱导SW620来源CSCLC发生凋亡并增强化疗药物的抗肿瘤活性。
关键词
结肠肿瘤
肿瘤干细胞
无血清培养
N-3多不饱和脂肪酸
化学治疗
Keywords
Colonic neoplasms
Neoplastic stem cells
Serum-free culture
n-3 Polyunsaturated fatty acids
Chemotherapy
分类号
R735.34 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
矢车菊素-3-葡萄糖苷通过降低STAT3活化抑制TNF-α诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖
方仕
罗小琴
吴晓滨
麦海妍
彭俊生
卢味
卓淑雨
叶艳彬
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
结肠癌干细胞样细胞的体外培养、鉴定及n-3多不饱和脂肪酸对结肠癌干细胞样细胞的抗增殖作用
方仕
龙健婷
张冰
杨婷
卢味
李鹤平
石汉平
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
6
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