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基因重组蛇毒纤溶因子rFII理化特性及纤溶能力的研究 被引量:4
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作者 江伟健 邱鹏新 颜光美 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期245-249,共5页
【目的】研究重组蛇毒纤溶因子的理化特性和纤溶能力。【方法】SDS鄄PAGE及高效液相法分析重组蛇毒纤溶因子rFII相对分子质量、纯度,等电聚焦分析其等电点;纤维平板和SDS鄄PAGE检测重组蛇毒纤溶因子对纤维蛋白及纤维蛋白原的水解能力。... 【目的】研究重组蛇毒纤溶因子的理化特性和纤溶能力。【方法】SDS鄄PAGE及高效液相法分析重组蛇毒纤溶因子rFII相对分子质量、纯度,等电聚焦分析其等电点;纤维平板和SDS鄄PAGE检测重组蛇毒纤溶因子对纤维蛋白及纤维蛋白原的水解能力。【结果】重组蛇毒纤溶因子rFII是一个相对分子质量在28000,等电点9.0的碱性蛋白酶。它水解纤维蛋白原的Aα、Bβ、酌亚基,水解能力随时间和浓度的增加而增加。它对纤维蛋白的水解能力比相同浓度下的纤溶酶强4倍。【结论】rFII是一种高效的水解纤维蛋白原和纤维蛋白的碱性蛋白酶。 展开更多
关键词 蛇毒 尖吻蝮蛇 纤维蛋白原 蛋白酶
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华支睾吸虫钙调节蛋白的生物学特性及与肝纤维化的关系 被引量:7
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作者 郑明慧 胡坤华 +1 位作者 刘炜 余新炳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期659-664,共6页
目的:对华支睾吸虫成虫(Clonorchis sinensis, Cs)钙调节蛋白(CaM)进行生物学及功能分析,以确定其在肝纤维化中的作用。方法从Cs cDNA质粒文库中寻找CsCaM全长序列,以BLASTx搜索其同源序列并进行比对分析。以生物信息学进行同源... 目的:对华支睾吸虫成虫(Clonorchis sinensis, Cs)钙调节蛋白(CaM)进行生物学及功能分析,以确定其在肝纤维化中的作用。方法从Cs cDNA质粒文库中寻找CsCaM全长序列,以BLASTx搜索其同源序列并进行比对分析。以生物信息学进行同源比对、理化性质分析及功能域预测。以分子生物学方法进行原核克隆,大肠杆菌表达,亲和层析纯化,并将纯化蛋白免疫大鼠,产生多克隆抗体。ELISA检测CsCaM抗体滴度及产生曲线。免疫印迹实验分析CsCaM重组蛋白纯化及其抗体识别效果。免疫组化分析其组织定位;腹腔注射法建立CsCaM致大鼠肝纤维化模型。结果重组、表达及纯化了CsCaM,其编码150位氨基酸,理论相对分子质量23400。结构域预测其具有EF手位模序。pET-30a-CsCaM重组质粒其目的蛋白表达于宿主菌BL21 E. coli上清,相对分子质量约23400。总IgG抗体滴度于2~4周达较高峰,效价大于1∶51200。免疫组织化学定位显示CsCaM在成虫睾丸表达丰富。CsCaM腹腔注射大鼠的肝脏均显示不同程度病变,HE染色可见炎症反应较严重,可见气球样变、门管区炎及碎片状坏死;网状纤维染色显示小胆管周围胶原增生,有轻到中度纤维化。结论 CsCaM促进大鼠肝脏炎症病变及纤维化的作用,提示其可能参与了华支睾吸虫病致肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 钙调节蛋白 肝纤维化
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抗CD59对CVF激活人血小板的影响 被引量:1
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作者 廖新学 王礼春 +3 位作者 马虹 黄守坚 麦炜颐 冯冲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期696-698,共3页
目的 :研究补体的激活对人血小板的作用及其抗CD5 9对该作用的影响。方法 :应用眼镜蛇毒因子(CVF)制成补体活化血小板的模型 ,通过测定健康成年男性血小板的聚集及释放曲线 ,观察抗CD5 9应用前后补体对血小板变形、聚集及释放功能的影... 目的 :研究补体的激活对人血小板的作用及其抗CD5 9对该作用的影响。方法 :应用眼镜蛇毒因子(CVF)制成补体活化血小板的模型 ,通过测定健康成年男性血小板的聚集及释放曲线 ,观察抗CD5 9应用前后补体对血小板变形、聚集及释放功能的影响。结果 :CVF能诱导健康成年男性的血小板显著、持久地变形和释放 ,但不能诱导血小板聚集。当CVF浓度在 12 .5 - 5 0 0g/L范围内 ,血小板的最大变形幅度与CVF浓度的对数呈线性相关 (r=0 970 ,P <0 .0 1,n =36 )。抗CD5 9能增强健康成年男性血小板的最大变形幅度 ,并与剂量相关 ,其血小板最大变形幅度的最大增加值为空白对照的 1.36倍 (P <0 .0 1)。同时抗CD5 9也促进补体诱导的血小板ATP分泌增多。结论 :活化补体后能诱导健康成年男性血小板发生变形、释放 ,但不诱导血小板的聚集 ,且抗CD5 展开更多
关键词 抗CD59 眼镜蛇毒因子 补体 激活 血小板
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出血性蛇毒纤溶酶
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作者 刘涛 邓文娟 陈家树 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期76-80,共5页
蛇毒纤溶酶是一种新型溶栓药,其溶栓效果已得到认可,但其致出血性限制了其临床应用。为解决这一难题,国内外学者对这类纤溶酶的结构特点和纤溶机制等方面做了详尽的研究,揭示了其与传统溶栓药不同的出血机制,并相应地提出了一些可能的... 蛇毒纤溶酶是一种新型溶栓药,其溶栓效果已得到认可,但其致出血性限制了其临床应用。为解决这一难题,国内外学者对这类纤溶酶的结构特点和纤溶机制等方面做了详尽的研究,揭示了其与传统溶栓药不同的出血机制,并相应地提出了一些可能的解决方案。 展开更多
关键词 出血 蛇毒 纤溶酶 基底膜 细胞凋亡
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