人工胸水协助超声引导肝穹窿部肿瘤治疗 被引量：12

1

作者 郑云 张亚奇 +4 位作者 邹如海 韩峰 黄俊 张昌卿 李锦清 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期696-699,共4页

【目的】探讨人工胸水在超声引导经皮局部治疗位于超声盲区的肝穹窿部肿瘤的应用价值及其安全性。【方法】7例肿瘤位于肝穹窿部的肝癌患者，右侧胸腔注入1～2L生理盐水，然后施行超声引导经皮微波固化或(和)无水乙醇瘤内注射治疗。【结... 【目的】探讨人工胸水在超声引导经皮局部治疗位于超声盲区的肝穹窿部肿瘤的应用价值及其安全性。【方法】7例肿瘤位于肝穹窿部的肝癌患者，右侧胸腔注入1～2L生理盐水，然后施行超声引导经皮微波固化或(和)无水乙醇瘤内注射治疗。【结果】人工胸水后，右肺底被推开，超声下肿瘤清晰显像，穿刺径路显现．局部治疗得以顺利进行。患者术后仅觉轻微胸闷，术后3～7d胸水消失，所有治疗均无相关并发症发生。【结论】人工胸水使位于超声盲区无法进行超声引导经皮局部治疗的肝穹窿部肿瘤变为可治。这种方法安全性高，值得推广。 展开更多

关键词 肝肿瘤/治疗 人工胸水 超声

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Bmi-1在胃癌组织中的表达及相关性研究 被引量：16

2

作者 黄开红 刘建化 +3 位作者 李学先 宋立兵 曾木圣 郭宝红 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第17期961-965,共5页

目的:探讨Bmi-1在胃癌组织和癌旁组织中的表达及其与临床病理特征的关系,初步评价Bmi-1在胃癌发生、发展中的作用及其意义。方法:随机收集20例胃癌患者的癌组织、癌旁正常对照组织,采用RT-PCR方法检测其Bmi-1mRNA表达情况;另外收集我院2... 目的:探讨Bmi-1在胃癌组织和癌旁组织中的表达及其与临床病理特征的关系,初步评价Bmi-1在胃癌发生、发展中的作用及其意义。方法:随机收集20例胃癌患者的癌组织、癌旁正常对照组织,采用RT-PCR方法检测其Bmi-1mRNA表达情况;另外收集我院2002～2004年146例有3年以上完整随访资料的胃癌术后患者,采用免疫组织化学法对手术标本石蜡切片进行染色,检测Bmi-1蛋白的表达,并分析Bmi-1与临床病理特征的相关性。结果:RT-PCR结果显示,胃癌组织中Bmi-1mRNA表达水平明显高于癌旁正常对照组织。免疫组化分析表明,Bmi-1蛋白在胃癌中阳性表达率为67.8%(99/146)。Bmi-1的表达与胃癌大小、临床分期、淋巴结转移和浸润深度密切相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度等无关(P>0.05)。结论:Bmi-1在胃癌组织表达状态与胃癌的生长和浸润转移关系密切,可以作为反映胃癌生物学行为的有效指标。 展开更多

关键词 胃癌 BMI-1 免疫组织化学 RT-PCR

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EB病毒相关性疾病病理学研究的进展 被引量：27

3

作者 宗永生 吴秋良 +2 位作者 林素暇 何洁华 张昌卿 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期481-487,492,共8页

报告作者及其同事在鼻咽癌高发的广州地区所做EB病毒相关性疾病病理学研究的进展。内容包括:①EB病毒病理生物学;②EB病毒相关性疾病病理学;③检测组织中的EB病毒;④EB病毒血清学。重点是EB病毒相关性疾病的病理学以及评估各种检测EB病... 报告作者及其同事在鼻咽癌高发的广州地区所做EB病毒相关性疾病病理学研究的进展。内容包括:①EB病毒病理生物学;②EB病毒相关性疾病病理学;③检测组织中的EB病毒;④EB病毒血清学。重点是EB病毒相关性疾病的病理学以及评估各种检测EB病毒相关性疾病患者组织和血清中EB病毒的方法。 展开更多

关键词 EB病毒 EB病毒相关性疾病 病理学 血清学

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癌基因BMI-1对中心体复制的调节作用 被引量：3

4

作者 宋立兵 张玲 +4 位作者 曾木圣 廖雯婷 李满枝 郭宝红 汪慧民 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期377-379,共3页

【目的】探讨BMI-1在中心体扩增中的作用。【方法】通过磷酸钙转染法在细胞中高表达野生型、带有Myc-tag的Myc-BMI-1质粒及两个BMI-1的RNAi序列,Westernblot检测BMI-1蛋白的表达,免疫荧光观察中心体数目的变化。【结果】首先检测了抗BM... 【目的】探讨BMI-1在中心体扩增中的作用。【方法】通过磷酸钙转染法在细胞中高表达野生型、带有Myc-tag的Myc-BMI-1质粒及两个BMI-1的RNAi序列,Westernblot检测BMI-1蛋白的表达,免疫荧光观察中心体数目的变化。【结果】首先检测了抗BMI-1抗体特异识别重组和内源性BMI-1蛋白;高表达BMI-1于HeLa和MCF-7细胞中导致中心体的扩增;在Cos7和U2OS中因RNAi降低BMI-1翻译而抑制了中心体的扩增。【结论】癌基因BMI-1在中心体复制扩增的调节中起着重要的作用。 展开更多

关键词 癌基因 调节作用 复制 Western MCF-7细胞 磷酸钙转染法 BLOT检测 RNAi 中心体扩增 免疫荧光 HELA 特异识别 Cos7 高表达 BMI 野生型 内源性 蛋白

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当前临床研究大环境下研究护士/研究协调员在研究团队中的参与模式探讨 被引量：11

5

作者 何莲珠 孔秋焕 +1 位作者 葛洁英 吴跃瀚 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第20期3457-3459,共3页

当前中国临床试验支持环境较国外不成熟，新药或干预型的临床试验项目缺少管理经验，机构和强大的伦理委员会（institutional review board， IRB）审核能力不强［1］，专职有经验的研究护士少，研究科室缺少临床试验经验，新的缺少经... 当前中国临床试验支持环境较国外不成熟，新药或干预型的临床试验项目缺少管理经验，机构和强大的伦理委员会（institutional review board， IRB）审核能力不强［1］，专职有经验的研究护士少，研究科室缺少临床试验经验，新的缺少经验和医学背景的现场管理组织（Site Manage Organization， SMO）的研究协调员（clinical research coordinator， CRC）开始加入研究助理的团队，所以很多临床研究机构面临临床试验质量管理和CRC任用难题。作为临床试验里的专职人员研究护士／CRC是试验的管理者，对试验质量起到把关的作用，而现有的CRC库里CRC的来源和资质不同，管理和任用没有规范性，不同来源的CRC在医院这个特殊医疗环境下有不同的职责。而属于医院机构的研究护士较其他来源的CRC经过更规范、更专业的临床试验相关培训，不但有医学知识和技能且更有试验协调管理经验，是CRC队伍里的中坚力量，最能肩负起试验管理者的职责；而医院受编制所限在不能培养更多研究护士情况下，其他来源的CRC是对研究护士工作不可缺少的补充，能对临床试验项目的整体运作起到分担的作用。本文根据医院和临床科室客观现实情况，提出统筹分配研究护士／CRC资源、选用不同的研究护士／CRC参与模式，让有经验的研究护士配置到新的研究科室、重要的临床研究以保证试验的质量，起到有经验的护士带领新的CRC管理好临床试验，有的放矢地任用研究护士／CRC来达到最好的发挥有限的研究护士／CRC力量来管理好更多试验项目的效果。 展开更多

关键词 护士工作 临床研究 支持环境 协调员 研究团队 临床试验 管理经验 医院机构

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靶向And-1增强卵巢癌细胞对PARP抑制剂尼拉帕利的敏感性

6

作者 郑佳慧 杨枭 +3 位作者 詹靖 刘同征 李苏 张建萍 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 北大核心 2025年第3期261-270,共10页

目的:阐明在卵巢癌细胞中靶向酸性核质DNA结合蛋白1(acidic nucleoplasmic DNA-binding protein 1, And-1)对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase, PARP)抑制剂尼拉帕利敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:首先,利... 目的:阐明在卵巢癌细胞中靶向酸性核质DNA结合蛋白1(acidic nucleoplasmic DNA-binding protein 1, And-1)对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase, PARP)抑制剂尼拉帕利敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:首先,利用GEO数据库和TCGA数据库分析And-1在卵巢癌组织和正常组织中表达水平差异,并进一步探讨And-1表达水平对卵巢癌患者生存结局的影响。接着,采用shRNA技术构建And-1稳定敲低的卵巢癌细胞系,并通过生长曲线评估癌细胞的增殖能力。随后,利用CCK-8实验检测细胞对尼拉帕利的敏感性,并通过克隆形成实验进一步验证;采用Western blot检测尼拉帕利处理后凋亡相关蛋白cleaved PARP1的表达水平,并通过流式细胞术检测分析细胞凋亡率。结果:And-1在卵巢癌组织中的表达显著高于正常组织,并且And-1高表达与较差的预后显著相关(HR>1,P<0.05)。在细胞实验中,And-1敲低的A2780和OVCAR3卵巢癌细胞株增殖能力显著降低(P<0.05);And-1敲低显著降低了尼拉帕利的IC50值(P<0.05),克隆形成实验证实了卵巢癌细胞对尼拉帕利的敏感性增强(P<0.05)。Western blot结果显示,cleaved PARP1的表达显著上调(P<0.05),流式细胞术结果显示细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。结论:靶向抑制And-1可增强卵巢癌细胞对尼拉帕利的敏感性,潜在机制可能与其促进细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 卵巢癌 酸性核质DNA结合蛋白1 PARP抑制剂 尼拉帕利

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胃癌患者预后及病理因素与Bmi-1表达的相关性研究 被引量：4

7

作者 刘建化 黄开红 +4 位作者 李学先 宋立兵 郭宝红 冯艳 曾木圣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期2018-2022,共5页

目的:探讨胃癌组织中Bmi-1蛋白的表达与胃癌患者病理因素及预后的相关性。方法:收集我院2002-2004年146例有3年以上完整随访资料的胃癌术后患者,采用免疫组织化学法对手术标本石蜡切片进行染色,检测Bmi-1蛋白的表达情况,并分析该蛋白表... 目的:探讨胃癌组织中Bmi-1蛋白的表达与胃癌患者病理因素及预后的相关性。方法:收集我院2002-2004年146例有3年以上完整随访资料的胃癌术后患者,采用免疫组织化学法对手术标本石蜡切片进行染色,检测Bmi-1蛋白的表达情况,并分析该蛋白表达对胃癌患者临床病理因素及预后的影响。结果:Bmi-1蛋白在本组胃癌中阳性表达率为67.8%(99/146)。Bmi-1的表达与胃癌大小、临床分期、淋巴结转移和侵润深度密切相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度等无关(P>0.05)。Bmi-1阳性表达者生存率明显低于阴性者(P<0.01)。多因素分析显示,Bmi-1表达、癌侵润深度、淋巴结转移、远处转移、肿瘤大小、术后化疗均为具有显著统计学意义的影响预后的因素。结论:Bmi-1在胃癌组织表达状态与胃癌的生长和侵润转移关系密切,可以作为反映胃癌生物学行为和判断预后的有效指标。 展开更多

关键词 胃肿瘤 BMI-1 肿瘤侵润 预后

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HLA-A、B、DRB1等位基因多态性与中国南方鼻咽癌的相关性研究 被引量：5

8

作者 曾学辉 肖露露 +2 位作者 李疆 吕建新 王小宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期819-820,823,共3页

目的:探讨南方人群中鼻咽癌(NPC)易感性与HLA多态性之间的关联。方法:应用聚合酶链反应/序列特异性引物(PCR-SSP)方法对35例NPC患者及60例正常对照进行HLA-A、HLA-B及DRB1基因分型。结果:NPC患者的HLA-A*02、HLA-B*58及HLA-DRB1*03基因... 目的:探讨南方人群中鼻咽癌(NPC)易感性与HLA多态性之间的关联。方法:应用聚合酶链反应/序列特异性引物(PCR-SSP)方法对35例NPC患者及60例正常对照进行HLA-A、HLA-B及DRB1基因分型。结果:NPC患者的HLA-A*02、HLA-B*58及HLA-DRB1*03基因位点的频率高于正常对照组,HLA-B*40基因位点的频率低于正常对照组。结论:HLA-A*02、HLA-B*58及HLA-DRB1*03可能是NPC的易感性基因,HLA-B*40可能是NPC的保护性基因。 展开更多

关键词 鼻咽癌 人类白细胞抗原 多态性 等位基因

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中国广东汉族人群核苷酸修复基因hMTH1遗传多态性研究 被引量：1

9

作者 江高峰 庄志雄 +3 位作者 刘起展 徐雷 何云 杜柳涛 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期25-29,共5页

为研究中国南方汉族人群核苷酸修复基因hMTH1遗传多态性,应用聚合酶链反应 单链构象多态性技术检测172名健康人外周血白细胞hMTH1基因启动子及全部5个外显子多态性,并进行DNA测序。结果发现hMTH1基因启动子及外显子1序列保守,未见突变;... 为研究中国南方汉族人群核苷酸修复基因hMTH1遗传多态性,应用聚合酶链反应 单链构象多态性技术检测172名健康人外周血白细胞hMTH1基因启动子及全部5个外显子多态性,并进行DNA测序。结果发现hMTH1基因启动子及外显子1序列保守,未见突变;外显子2第73位碱基存在T→C杂合型突变,基因型TT和TC频率分别为93 02%、6 98%,等位基因T和C频率分别为96 51%、3 49%;外显子3第45位遗传密码存在T→C杂合型突变,基因型TT和TC频率分别为95 35%、4 65%,等位基因T和C频率分别为97 67%、2 33%,该多态性为首次发现;外显子4第83位遗传密码存在G→A杂合型突变,基因型GG和GA频率分别为89 53%、10 47%,等位基因G和A频率分别为94 77%、5 23%;外显子5第119位氨基酸遗传密码存在C→T杂合型突变,基因型CC和CT频率分别为95 93%、4 07%,等位基因C和T频率分别为97 97%、2 03%。 展开更多

关键词 hMTH1 基因 遗传多态性 聚合酶链反应 单链构象多态性

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组织芯片制备及在肝癌研究中的应用体会 被引量：1

10

作者 余杏娟 许静 郑利民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1089-1092,共4页

目的:探讨采用全自动组织芯片仪进行组织芯片制作,以及组织芯片在肝癌研究中的应用体会。方法:利用组织芯片仪制备肝癌组织芯片16枚,共包含313例肝癌患者肝癌组织。通过免疫组化方法检测了HLA-DR抗体,并比较其在肝癌癌旁及肿瘤内的表达... 目的:探讨采用全自动组织芯片仪进行组织芯片制作,以及组织芯片在肝癌研究中的应用体会。方法:利用组织芯片仪制备肝癌组织芯片16枚,共包含313例肝癌患者肝癌组织。通过免疫组化方法检测了HLA-DR抗体,并比较其在肝癌癌旁及肿瘤内的表达情况。结果:采用全自动组织芯片仪能更加完好地构建肝癌组织芯片。用此组织芯片检测HLA-DR抗原在肝癌中高阳性表达率为51.1%,而在癌旁组织为76.4%,两者具有统计学差异(P<0.000 1)。结论:全自动组织芯片仪制备的组织芯片能简单、快捷检测相关蛋白在肝癌组织中的表达。组织芯片在肝癌研究中具有高效、快速、方便、经济等特点。 展开更多

关键词 组织芯片 肝癌 HLA—DR

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大剂量分割照射人肝癌细胞系移植瘤的实验研究 被引量：1

11

作者 黄莹 高远红 +3 位作者 郭芬芬 田莹 罗容珍 何洁华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第16期2687-2689,共3页

目的:研究不同大剂量分割照射模式对BALB/c-nu裸鼠移植瘤(人原发性肝细胞癌细胞系HepG2)抑制肿瘤作用的差异。方法:将原发性肝细胞癌移植瘤种鼠的肿瘤组织制备成1mm3大小的肿瘤组织块,选择实验裸鼠右后肢外侧小腿腓肠肌处接种,建立原发... 目的:研究不同大剂量分割照射模式对BALB/c-nu裸鼠移植瘤(人原发性肝细胞癌细胞系HepG2)抑制肿瘤作用的差异。方法:将原发性肝细胞癌移植瘤种鼠的肿瘤组织制备成1mm3大小的肿瘤组织块,选择实验裸鼠右后肢外侧小腿腓肠肌处接种,建立原发性肝细胞癌细胞系移植瘤裸鼠照射模型。待肿瘤直径达1.0cm时将40只实验裸鼠分成4个组:未照射空白对照组、5Gy×6次分割组(5Gy组)、10Gy×3次分割组(10Gy组)、15Gy*2次分割组(15Gy组)。各照射组均在2周内完成照射,照射完成后继续观察裸鼠肿瘤体积的变化。结果:实验过程中无出现裸鼠死亡,亦未观察到明显的裸鼠进食、活动减少,皮疹、腹泻、脱皮等不良反应。三种大剂量分割方案均对裸鼠的移植瘤有明显抑制作用。5Gy组、10Gy组和15Gy组肿瘤抑制率分别为30.2%,68.4%,73.1%。相对于5Gy和10Gy照射组,15Gy组对移植瘤的抑制作用更显著。结论:BALB/c-nu裸鼠移植瘤(人肝细胞癌细胞系HepG2)对大剂量分割照射模式能较好耐受。在相同总剂量情况下,剂量越高,移植瘤的生长抑制作用越强。15Gy×2次较10Gy×3次和5Gy×6次有更强的肿瘤生长抑制作用。 展开更多

关键词 肝细胞癌 大剂量分割照射 立体定向放疗 裸鼠模型

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癌基因Bmi-1引起中心体扩增的可能机制 被引量：3

12

作者 翁桂香 徐理华 +5 位作者 冯艳 俞春萍 宋立兵 李隽 曾木圣 张玲 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期131-134,共4页

【目的】探讨Bmi-1引起中心体扩增的可能机制。【方法】体外建立Bmi-1稳定高表达和Bmi-1-RNAi稳定起作用的细胞株,采用免疫荧光染色法计数中心体(Microtub)异常复制的比率及定位细胞周期素蛋白D1(cyclinD1)和P27的表达,同时进行Westernb... 【目的】探讨Bmi-1引起中心体扩增的可能机制。【方法】体外建立Bmi-1稳定高表达和Bmi-1-RNAi稳定起作用的细胞株,采用免疫荧光染色法计数中心体(Microtub)异常复制的比率及定位细胞周期素蛋白D1(cyclinD1)和P27的表达,同时进行Westernblot检测cyclinD1和p27在核中的表达量。【结果】Microtub染色计数发现与对照细胞相比,中心体异常复制的比率在6-10B/Bmi-1细胞中升高,而在CNE2/Bmi-1-RNAi细胞中下降;免疫荧光染色和Westernblot检测均发现cyclinD1蛋白在6-10B/Bmi-1细胞核内表达升高,而在CNE2/Bmi-1-RNAi细胞核内表达降低,P27蛋白则在两株细胞株中均呈现相反的变化。【结论】Bmi-1可能通过调控cyclinD1-P27途径引起中心体扩增。 展开更多

关键词 癌基因 BMI-1 中心体扩增 cyclinDl-P27 基因表达

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鼻咽癌中EB病毒启动子Qp的突变及其功能学研究 被引量：2

13

作者 黄宇帆 廖奕佶 +5 位作者 刘文举 花文峰 邓海霞 买世娟 谢丹 宗永生 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期23-27,共5页

【目的】探讨鼻咽癌细胞中启动EB病毒核抗原1(EBNA1蛋白)表达的EB病毒Q启动子(Qp)的变异特征,比较有第62225位点(g→a)和第62422位点(g→c)两个点突变的Qp与原型Qp(B95.8型)的功能学差异及其生物学意义。【方法】采用PCR的方法扩增29例... 【目的】探讨鼻咽癌细胞中启动EB病毒核抗原1(EBNA1蛋白)表达的EB病毒Q启动子(Qp)的变异特征,比较有第62225位点(g→a)和第62422位点(g→c)两个点突变的Qp与原型Qp(B95.8型)的功能学差异及其生物学意义。【方法】采用PCR的方法扩增29例鼻咽癌组织石蜡标本和14例健康成人外周血标本(总共43例)中的Qp序列,PCR产物测序后分析其突变情况,统计学分析Qp中的点突变与鼻咽癌的相关性。把突变型和原型Qp分别克隆到荧光素酶报告基因载体上,检测相对光强度(RLU),比较突变型与原型Qp启动转录的活性。使用染色质免疫共沉淀(ChIP)实验来比较突变型和原型Qp与Sp1蛋白的亲和力。【结果】通过PCR扩增和测序实验,证实Qp的突变与鼻咽癌有密切的相关性(P=0.0395,<0.05)。突变型Qp启动转录的活性明显高于原型(RLU之比约为2.5:1,P<0.05),并且突变型Qp与Sp1的亲和力较原型Qp增强约1.52倍。【结论】在鼻咽癌组织中,突变型Qp可能通过增强与Sp1亲和力的机制,使其启动转录的活性明显增强。Qp特定位点的突变在EB病毒对鼻咽上皮细胞的感染和转化过程中可能起了重要的作用。 展开更多

关键词 鼻咽癌 EB病毒 EB病毒核抗原1 变异型 启动子

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DNA修复基因和EB病毒的交互作用与鼻咽癌易感性初步研究 被引量：2

14

作者 苏伟扬 黄珂 +3 位作者 左晓宇 郝元涛 贾卫华 饶绍奇 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期828-833,共6页

【目的】探讨在鼻咽癌群体中DNA修复基因与EB病毒的交互作用。【方法】选取广东地区以广东话为主要语言的人群建立匹配的鼻咽癌病例和健康对照(病例/对照=755/755),收集其临床流行病学资料、采集外周血样并进行EB病毒抗体检测和SNP基因... 【目的】探讨在鼻咽癌群体中DNA修复基因与EB病毒的交互作用。【方法】选取广东地区以广东话为主要语言的人群建立匹配的鼻咽癌病例和健康对照(病例/对照=755/755),收集其临床流行病学资料、采集外周血样并进行EB病毒抗体检测和SNP基因型分型。利用决策森林方法,分析DNA修复通路104个基因中768个SNP位点和EB病毒在鼻咽癌中的交互作用。【结果】MDC1、ATM、GTF2H4、MLH1、RAD51L1、XPC、GTF2H1与EB病毒的交互作用达到Bonferroni多重检验校正的显著性水准(0.05),P值皆<0.001;其鼻咽癌患病风险比OR(95%CI)分别为15.97(4.17～61.11)、11.32(7.22～25.45)、15.94(4.17～64.01)、5.38(4.88～6.74)、151.47(53.79～380.39)、40.92(15.09～112.67)和142.38(53.38～377.5)。进一步生物信息学基因网络分析表明,这些基因可能通过影响EB病毒DNA复制过程等多种直接或间接的方式,改变广东人群鼻咽癌的易感性。【结论】EB病毒与修复基因的交互作用可能是鼻咽癌的另一重要的易感性机制。 展开更多

关键词 鼻咽癌 DNA修复基因 EB病毒 基因环境互作 易感性

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EBV阳性鼻咽癌相关性中性粒细胞抑制肿瘤微环境中的CD8^(+)T细胞活化 被引量：3

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作者 欧阳蒂君 陈楠 +3 位作者 杨洁莹 陈媛媛 向橦 夏建川 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期399-409,共11页

目的:分析鼻咽癌(NPC)肿瘤微环境(TME)中的肿瘤相关中性粒细胞(TAN)浸润与患者的预后和临床病理特征之间的相关性,初步探讨EBV阳性NPC的TAN对CD8^(+)T细胞活化的作用。方法:收集2008年至2012年间中山大学肿瘤防治中心收治的118例初治且... 目的:分析鼻咽癌(NPC)肿瘤微环境(TME)中的肿瘤相关中性粒细胞(TAN)浸润与患者的预后和临床病理特征之间的相关性,初步探讨EBV阳性NPC的TAN对CD8^(+)T细胞活化的作用。方法:收集2008年至2012年间中山大学肿瘤防治中心收治的118例初治且无转移的EBV阳性NPC患者的肿瘤组织标本,通过免疫组织化学染色法观察并分析NPC组织中CD8^(+)T细胞、TAN浸润和EBV感染之间的关系,检测NPC组织标本中的TAN浸润程度并分析其与患者预后和临床病理特征之间的关系;流式细胞术检测HK1-EBV细胞培养上清液对TAN极化的N2型标志物(CD182和CD206)表达水平的影响,并进一步检测极化后的TAN对CD8^(+)T细胞活化标志物(CD69和PD-1)表达水平的影响。结果:EBV阳性NPC组织中CD8^(+)T细胞和TAN浸润增多且两者在数量上呈负相关关系(P=0.005 2);EBV阳性NPC组织中高水平浸润的TAN与患者的不良预后密切相关(OS:P=0.025,PFS:P=0.027),TAN浸润水平是EBV阳性NPC患者总生存时间(P=0.035)的独立预后因子;与对照组相比,HK1-EBV细胞培养上清液可诱导TAN极化并高表达N2型标志物(CD182:P<0.001;CD206:P<0.01);极化后的TAN可抑制CD8^(+)T细胞CD69的表达并促进PD-1的表达(P<0.001)。结论:EBV阳性NPC能够促进TME中的TAN浸润增多并使其极化成N2型,从而抑制CD8+T细胞的活化,发挥免疫抑制作用,与NPC患者的不良预后密切相关。 展开更多

关键词 EB病毒 鼻咽癌 肿瘤相关中性粒细胞 CD8^(+)T细胞 肿瘤微环境

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抗咽喉细菌复合抗原的IgY抗体活性研究 被引量：1

16

作者 蒙永祥 张玲 +1 位作者 黄春龙 林学颜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期393-395,共3页

目的 :应用咽喉分离的细菌混合抗原免疫母鸡 ,提取鸡蛋黄中IgY ,通过ELISA方法证实IgY抗体的特异活性。方法 :采取咽喉炎相关的多种细菌作抗原免疫产蛋母鸡 ,收集鸡蛋 ,从蛋黄中提取IgY ,经纯化后进行SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳和抗体活性... 目的 :应用咽喉分离的细菌混合抗原免疫母鸡 ,提取鸡蛋黄中IgY ,通过ELISA方法证实IgY抗体的特异活性。方法 :采取咽喉炎相关的多种细菌作抗原免疫产蛋母鸡 ,收集鸡蛋 ,从蛋黄中提取IgY ,经纯化后进行SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳和抗体活性的ELIAS测定。结果 :电泳呈现 1 2条带 ,证明IgY抗体中至少有 1 2种抗体成分 ,ELISA结果表明IgY抗体效价为1∶5 1 2。热稳定性试验结果显示 ,在 37℃温度下 ,IgY抗体活性无改变。结论 :应用多种混合的细菌抗原免疫母鸡 ,其鸡蛋黄中含有相应的IgY抗体成分 。 展开更多

关键词 鸡蛋黄 免疫球蛋白IgY 细菌复合抗原 抗体

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Bmi-1基因过度表达与胃癌分化、转移及预后的关系 被引量：32

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作者 黄开红 刘建化 +2 位作者 李学先 宋立兵 曾木圣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期973-975,979,共4页

目的探讨胃癌组织中Bmi-1基因mRNA表达与胃癌分化、转移及临床预后的关系。方法收集我院2006年5月～2006年11月共42例行胃癌手术切除标本,提取肿瘤及癌旁组织配对标本的总RNA,用RT-PCR方法测定Bmi-1基因表达,并结合临床资料,对Bmi-1基... 目的探讨胃癌组织中Bmi-1基因mRNA表达与胃癌分化、转移及临床预后的关系。方法收集我院2006年5月～2006年11月共42例行胃癌手术切除标本,提取肿瘤及癌旁组织配对标本的总RNA,用RT-PCR方法测定Bmi-1基因表达,并结合临床资料,对Bmi-1基因差异表达与胃癌病人临床表现的相关性进行分析研究。结果42例配对标本分别进行Bmi-1mRNA荧光检测比较,29例标本的肿瘤组织中Bmi-1基因mRNA表达明显高于癌旁正常胃组织。Bmi-1mRNA的表达与胃癌大小、淋巴结转移和浸润深度密切相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度等无关(P>0.05)。并且Bmi-1mRNA阳性表达者生存率明显低于阴性者。结论Bmi-1基因在胃癌组织中表达状态与胃癌的生长和浸润转移关系密切,Bmi-1基因mRNA可望作为胃癌病情发展及指导临床治疗的标记物之一,Bmi-1mRNA的测定有助于判断肿瘤预后。 展开更多

关键词 胃癌 BMI-1 基因表达 肿瘤转移 预后

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Wnt/β-catenin通路在鼻咽癌分化中的作用 被引量：8

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作者 林琼琼 李锦添 王敏 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期384-387,共4页

【目的】探讨Wnt/β-catenin通路的枢纽分子β-catenin和β-catenin/Tcf复合体在不同分化程度鼻咽癌中的表达,进而阐明Wnt/β-catenin通路对鼻咽癌分化的作用。【方法】采用免疫组化方法检测13例鼻咽粘膜慢性炎症和74例不同分化类型的... 【目的】探讨Wnt/β-catenin通路的枢纽分子β-catenin和β-catenin/Tcf复合体在不同分化程度鼻咽癌中的表达,进而阐明Wnt/β-catenin通路对鼻咽癌分化的作用。【方法】采用免疫组化方法检测13例鼻咽粘膜慢性炎症和74例不同分化类型的鼻咽癌组织中β-catenin的表达;转染野生型和突变型Tcf荧光素酶报告质粒,检测β-catenin/Tcf复合体在高低分化鼻咽癌细胞株中的含量。【结果】β-catenin在鼻咽癌中的异常表达主要出现在细胞浆内过表达。在角化性鳞癌、分化型非角化性癌中β-catenin胞浆内的过表达相对少,而在未分化癌中胞浆内累积明显增多。未分化癌与角化性癌、未分化癌与分化型非角化性癌相比较,β-catenin的表达有统计学差异,P值分别为0.0195和0.0003。通过检测转染后荧光素酶活性发现β-catenin/Tcf复合体在低分化鼻咽癌细胞株(CNE-2和HONE-1)中的表达是高分化鼻咽癌细胞株(CNE-1)的80～123.6倍。【结论】低分化鼻咽癌细胞比高分化鼻咽癌细胞有更高水平的胞浆内β-catenin和核内β-catenin/Tcf的表达,说明前者的Wnt/β-catenin通路比后者明显地处于更高的活化状态中,提示Wnt/β-catenin通路可能在抑制鼻咽癌细胞的分化中起重要作用。 展开更多

关键词 β-catenin 通路 鼻咽癌细胞株 非角化性癌 免疫组化方法 未分化癌 荧光素酶活性 转染野生型 鼻咽癌组织 统计学差异 胞浆内 复合体 低分化 分化程度 慢性炎症 鼻咽粘膜 异常表达 活化状态 过表达 分化型 高分化 突变型

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人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定 被引量：7

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作者 王鸿鹤 朱孝峰 +3 位作者 谢冰芬 冯公侃 沈竞康 刘宗潮 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期444-447,共4页

【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质... 【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定表达蛋白。【结果】用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Westernblot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体,后两者在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。 展开更多

关键词 人细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白激酶CDK4 HL-60细胞 肿瘤

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BAC_5-scFv的表达、复性及活性检测 被引量：6

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作者 唐彩华 肖锡宾 +2 位作者 吴涛 梁昌盛 刘长征 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期67-70,共4页

目的探讨以包涵体形式表达的抗鼻咽癌单克隆抗体(mAb)BAC5的单链抗体(BAC5-scFv)的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。方法扩增pET-22b-scFv质粒转化的大肠杆菌BL21(DE3)菌株,培养、破菌后,分离和变性包涵体,用Ni-NTA His Bind层析柱... 目的探讨以包涵体形式表达的抗鼻咽癌单克隆抗体(mAb)BAC5的单链抗体(BAC5-scFv)的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。方法扩增pET-22b-scFv质粒转化的大肠杆菌BL21(DE3)菌株,培养、破菌后,分离和变性包涵体,用Ni-NTA His Bind层析柱纯化变性的scFv。经稀释、透析及尿素梯度凝胶层析柱3种方法进行复性。用细胞免疫组化染色和蛋白印迹法(Western blot),鉴定复性后的BAC5-scFv的免疫活性。结果Ni-NTA His Bind亲和层析柱能有效纯化变性的scFv。以尿素梯度凝胶层析柱复性的蛋白回收率最高。免疫细胞化学染色法检测及Western blot分析证实,复性后的BAC5-scFv可与CNE2细胞上的抗原特异性结合。结论以包涵体形式表达的BAC5-scFv经变性、纯化及复性后,获得良好的免疫活性,为大量制备具有活性的BAC5-scFv,并用于鼻咽癌的放射免疫显像和治疗研究奠定了基础。 展开更多

关键词 包涵体 单链抗体 复性 鼻咽癌

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