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四逆汤对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌纤维化和TGF-β_1表达的影响
被引量：
23
1
作者
廖火城
刘勇
+3 位作者
周彬
吴琳
吴伟康
钱孝贤
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期1316-1320,共5页
目的:观察四逆汤对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌纤维化的干预作用并探讨其相关机制。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和四逆汤组。模型组及四逆汤组给予注射异丙肾上腺素,而对照组注射生理盐水。四逆汤组给予四逆汤灌胃,对照组和...
目的:观察四逆汤对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌纤维化的干预作用并探讨其相关机制。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和四逆汤组。模型组及四逆汤组给予注射异丙肾上腺素,而对照组注射生理盐水。四逆汤组给予四逆汤灌胃,对照组和模型组均给予生理盐水灌胃。4周后,各组测定左室心功能、心肌羟脯氨酸水平;测定血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;通过免疫组化方法检测心肌TGF-β1蛋白的表达;RT-PCR法检测TGF-β1mRNA表达。结果:(1)模型组羟脯氨酸水平明显高于对照组和四逆汤组,而四逆汤组明显高于对照组(P<0.05);(2)四逆汤组与模型组比较,明显改善心肌舒张功能(P<0.05);(3)模型组血浆AngⅡ及TGF-β1水平明显高于四逆汤组和对照组(P<0.05);(4)模型组心肌TGF-β1蛋白和mR-NA表达明显高于四逆汤组和对照组(P<0.05)。结论:四逆汤可以有效抑制异丙肾上腺素所致的大鼠心肌纤维化,其机制可能与减少AngⅡ生成,抑制大鼠心肌TGF-β1的表达有关。
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关键词
心肌纤维化
四逆汤
异丙肾上腺素
转化生长因子Β
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职称材料
广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌的流行情况及其emm基因分型
被引量：
8
2
作者
丁月霞
倪琼琼
刘金来
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期411-414,共4页
【目的】了解近期广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌(BHS)的流行情况及其emm基因分型。【方法】对我院儿科门急诊1190例急性咽扁桃体炎的患儿进行咽拭子培养。鉴定为BHS者包括A、B、C和G组溶血性链球菌(groupA、B、C、Gstreptococcal,GAS...
【目的】了解近期广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌(BHS)的流行情况及其emm基因分型。【方法】对我院儿科门急诊1190例急性咽扁桃体炎的患儿进行咽拭子培养。鉴定为BHS者包括A、B、C和G组溶血性链球菌(groupA、B、C、Gstreptococcal,GAS、GBS、GCS和GGS)进行细菌组DNA的提取;通过PCR扩增emm基因并测序;其结果与NCBI和CDCHome中已知的基因序列进行同源性比对大于95%则认为是同型菌株,藉此确定其分型。【结果】在1190例符合条件的患儿咽拭子标本中[男:678例,(6.96±2.73)岁;女:512例,(6.70±2.60)岁],鉴定为BHS的共有46例(3.87%)。其中GAS、GBS、GCS和GGS分别有4例、20例、2例和20例,分别占BHS约8.7%、43.5%、4.3%和43.5%;而GAS、GBS、GCS和GGS的阳性率分别约为0.37%、1.68%、0.17%和1.68%。男患儿BHS的阳性率约为5.01%,女患儿约为2.34%,两组比较(χ2=26.431,P<0.001)有统计学意义。除了GBS外,其他BHS(GAS、GC/GS)均有emm基因表达(1000～1500bp)。经测序共有15型emm,其中4株GAS分别表达emm1和emm12(7.69%)。【结论】致咽炎GAS阳性率低于0.5%,而GBS、GGS阳性率接近2%。但GBS无emm表达,GAS表达emm1和emm12,而GCS、GGS无明确的emm优势型。
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关键词
Β溶血性链球菌
急性咽扁桃体炎
emm基因
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职称材料
A组链球菌M蛋白重组多肽原核表达载体构建及融合蛋白的表达
被引量：
2
3
作者
丁月霞
倪琼琼
刘金来
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期29-34,共6页
目的:设计针对A组β溶血性链球菌M1和M12蛋白的复合多肽;构建含M蛋白基因(emm基因)1型和12型特异性抗原决定簇基因及其保守区J14肽基因的GST标签的重组表达载体;并诱导和优化GST融合蛋白的表达。方法:在NCBI Genebank和Oligo 6引物设计...
目的:设计针对A组β溶血性链球菌M1和M12蛋白的复合多肽;构建含M蛋白基因(emm基因)1型和12型特异性抗原决定簇基因及其保守区J14肽基因的GST标签的重组表达载体;并诱导和优化GST融合蛋白的表达。方法:在NCBI Genebank和Oligo 6引物设计软件中选择分别编码M蛋白emm基因1型和12型信号肽后35个氨基酸及其相同的保守区14肽基因序列(全长270 bp),通过重叠PCR(Overlap PCR)合成所需的核苷酸序列,经测序确定序列完全和设计的相匹配后,将该重组片段克隆到pGEX-4T-1表达载体中,阳性克隆经双酶切和测序鉴定正确后建立稳定表达该重组质粒的大肠杆菌BL21株系(pE/B);通过聚丙烯酰胺凝胶的考马斯亮蓝染色和Western blot来检测在不同时间(0、2、6、8、18和24小时)和温度(25℃、30℃和37℃)以及不同浓度(0.01、0.1、1 mmol/L)异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导GST融合蛋白(GST/emm)表达情况,并对诱导表达的GST/emm切胶进行质谱分析鉴定。结果:成功构建含有emm1和emm12抗原决定簇及M蛋白保守区J14肽基因的原核表达载体;并诱导其稳定表达,在1 mol/L IPTG诱导6～8小时达高峰,不同温度下均有过量表达;质谱检测诱导蛋白GST/emm条带结果正确。结论:成功构建A组β溶血性链球菌的emm1型和emm12型原核表达载体,并稳定诱导GST/emm表达,为下一步研究GST/emm的纯化、酶切以及免疫原性的鉴定和疫苗研制打下夯实的基础。
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关键词
A组β溶血性链球菌
emm基因
M蛋白
GST融合蛋白
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职称材料
题名
四逆汤对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌纤维化和TGF-β_1表达的影响
被引量：
23
1
作者
廖火城
刘勇
周彬
吴琳
吴伟康
钱孝贤
机构
中山大学第三附属医院心血管内科
中山大学
中西医结合研究所
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期1316-1320,共5页
基金
广东省科技计划资助项目(No.2006B36007009)
文摘
目的:观察四逆汤对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌纤维化的干预作用并探讨其相关机制。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和四逆汤组。模型组及四逆汤组给予注射异丙肾上腺素,而对照组注射生理盐水。四逆汤组给予四逆汤灌胃,对照组和模型组均给予生理盐水灌胃。4周后,各组测定左室心功能、心肌羟脯氨酸水平;测定血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;通过免疫组化方法检测心肌TGF-β1蛋白的表达;RT-PCR法检测TGF-β1mRNA表达。结果:(1)模型组羟脯氨酸水平明显高于对照组和四逆汤组,而四逆汤组明显高于对照组(P<0.05);(2)四逆汤组与模型组比较,明显改善心肌舒张功能(P<0.05);(3)模型组血浆AngⅡ及TGF-β1水平明显高于四逆汤组和对照组(P<0.05);(4)模型组心肌TGF-β1蛋白和mR-NA表达明显高于四逆汤组和对照组(P<0.05)。结论:四逆汤可以有效抑制异丙肾上腺素所致的大鼠心肌纤维化,其机制可能与减少AngⅡ生成,抑制大鼠心肌TGF-β1的表达有关。
关键词
心肌纤维化
四逆汤
异丙肾上腺素
转化生长因子Β
Keywords
Myocardial fibrosis
Sini decoction
Isoproterenol
Transforming growth factor beta
分类号
Q953 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌的流行情况及其emm基因分型
被引量：
8
2
作者
丁月霞
倪琼琼
刘金来
机构
中山大学第三附属医院心血管内科
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期411-414,共4页
基金
广东省科技计划项目(2008B080701023)
文摘
【目的】了解近期广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌(BHS)的流行情况及其emm基因分型。【方法】对我院儿科门急诊1190例急性咽扁桃体炎的患儿进行咽拭子培养。鉴定为BHS者包括A、B、C和G组溶血性链球菌(groupA、B、C、Gstreptococcal,GAS、GBS、GCS和GGS)进行细菌组DNA的提取;通过PCR扩增emm基因并测序;其结果与NCBI和CDCHome中已知的基因序列进行同源性比对大于95%则认为是同型菌株,藉此确定其分型。【结果】在1190例符合条件的患儿咽拭子标本中[男:678例,(6.96±2.73)岁;女:512例,(6.70±2.60)岁],鉴定为BHS的共有46例(3.87%)。其中GAS、GBS、GCS和GGS分别有4例、20例、2例和20例,分别占BHS约8.7%、43.5%、4.3%和43.5%;而GAS、GBS、GCS和GGS的阳性率分别约为0.37%、1.68%、0.17%和1.68%。男患儿BHS的阳性率约为5.01%,女患儿约为2.34%,两组比较(χ2=26.431,P<0.001)有统计学意义。除了GBS外,其他BHS(GAS、GC/GS)均有emm基因表达(1000～1500bp)。经测序共有15型emm,其中4株GAS分别表达emm1和emm12(7.69%)。【结论】致咽炎GAS阳性率低于0.5%,而GBS、GGS阳性率接近2%。但GBS无emm表达,GAS表达emm1和emm12,而GCS、GGS无明确的emm优势型。
关键词
Β溶血性链球菌
急性咽扁桃体炎
emm基因
Keywords
beta-hemolytic streptococci
acute throat infection or tonsillitis
emm gene type
分类号
R183 [医药卫生—流行病学]
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职称材料
题名
A组链球菌M蛋白重组多肽原核表达载体构建及融合蛋白的表达
被引量：
2
3
作者
丁月霞
倪琼琼
刘金来
机构
广州医学院第五
附属
医院
心血管
内科
中山大学第三附属医院心血管内科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期29-34,共6页
基金
广东省科技计划项目(2008B080701023)
文摘
目的:设计针对A组β溶血性链球菌M1和M12蛋白的复合多肽;构建含M蛋白基因(emm基因)1型和12型特异性抗原决定簇基因及其保守区J14肽基因的GST标签的重组表达载体;并诱导和优化GST融合蛋白的表达。方法:在NCBI Genebank和Oligo 6引物设计软件中选择分别编码M蛋白emm基因1型和12型信号肽后35个氨基酸及其相同的保守区14肽基因序列(全长270 bp),通过重叠PCR(Overlap PCR)合成所需的核苷酸序列,经测序确定序列完全和设计的相匹配后,将该重组片段克隆到pGEX-4T-1表达载体中,阳性克隆经双酶切和测序鉴定正确后建立稳定表达该重组质粒的大肠杆菌BL21株系(pE/B);通过聚丙烯酰胺凝胶的考马斯亮蓝染色和Western blot来检测在不同时间(0、2、6、8、18和24小时)和温度(25℃、30℃和37℃)以及不同浓度(0.01、0.1、1 mmol/L)异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导GST融合蛋白(GST/emm)表达情况,并对诱导表达的GST/emm切胶进行质谱分析鉴定。结果:成功构建含有emm1和emm12抗原决定簇及M蛋白保守区J14肽基因的原核表达载体;并诱导其稳定表达,在1 mol/L IPTG诱导6～8小时达高峰,不同温度下均有过量表达;质谱检测诱导蛋白GST/emm条带结果正确。结论:成功构建A组β溶血性链球菌的emm1型和emm12型原核表达载体,并稳定诱导GST/emm表达,为下一步研究GST/emm的纯化、酶切以及免疫原性的鉴定和疫苗研制打下夯实的基础。
关键词
A组β溶血性链球菌
emm基因
M蛋白
GST融合蛋白
Keywords
Group A of beta-hemolytic streptococcus
emm gene
M protein
GST fusion protein
分类号
R541.2 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
四逆汤对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌纤维化和TGF-β_1表达的影响
廖火城
刘勇
周彬
吴琳
吴伟康
钱孝贤
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
23
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职称材料
2
广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌的流行情况及其emm基因分型
丁月霞
倪琼琼
刘金来
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2011
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
A组链球菌M蛋白重组多肽原核表达载体构建及融合蛋白的表达
丁月霞
倪琼琼
刘金来
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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职称材料
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