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成人骨髓间质干细胞在脑梗塞模型鼠的迁移和分化
被引量:
8
1
作者
姚晓黎
张成
+3 位作者
卢锡林
冯善伟
邓宇斌
刘祖国
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期1056-1060,共5页
目的:探讨成人骨髓间质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSC)在脑梗塞模型鼠脑内的迁移和分化,是否影响模型大鼠的运动功能。方法:体外扩增培养hMSC,建立左大脑中动脉梗塞模型(MACO)大鼠,将标记Hoeschst33342的hMSC,经参芪液诱导30mi...
目的:探讨成人骨髓间质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSC)在脑梗塞模型鼠脑内的迁移和分化,是否影响模型大鼠的运动功能。方法:体外扩增培养hMSC,建立左大脑中动脉梗塞模型(MACO)大鼠,将标记Hoeschst33342的hMSC,经参芪液诱导30min后注入模型鼠脑内,观察hMSC在大鼠脑内的存活、迁移、分化,以及能否改善模型鼠运动功能。结果:第5代呈集落生长的hMSC,均一性好。hMSC可在脑内存活6周以上;随着时间的延长,hMSC在脑内迁移的范围越来越大;间接免疫荧光表明hMSC在大鼠脑内表达人神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP);模型鼠的肢体运动功能有明显改善。结论:hMSC可在大鼠脑内分化为神经细胞,有望成为治疗脑梗塞的理想的种子细胞。
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关键词
骨髓间质干细胞
脑梗塞
细胞分化
细胞运动
参芪液
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职称材料
人中期胚胎、新生儿脐血及成人骨髓间质干细胞基本生物学特性的比较
被引量:
5
2
作者
朱美玲
陈汝光
+5 位作者
刘华
胡燕芬
娜晓东
雷俊霞
张秀明
李树浓
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期504-507,共4页
【目的】比较人中期胚胎脐血、新生儿脐血以及成人骨髓3种来源的间质干细胞(MSC)生物学特性,为临床治疗选择细胞来源提供实验依据。【方法】采用L-DMEM培养液分离培养3种来源MSC,流式细胞仪进行细胞表型、细胞周期、细胞凋亡分析,成骨...
【目的】比较人中期胚胎脐血、新生儿脐血以及成人骨髓3种来源的间质干细胞(MSC)生物学特性,为临床治疗选择细胞来源提供实验依据。【方法】采用L-DMEM培养液分离培养3种来源MSC,流式细胞仪进行细胞表型、细胞周期、细胞凋亡分析,成骨、成脂诱导液分别诱导细胞分化,携带绿色荧光蛋白报告基因的重组腺病毒转染MSC,荧光显微镜和流式细胞仪检测3种细胞表达外源基因特性。【结果】3种来源标本中均可分离培养出MSC,但新生儿脐血中阳性获得率最低,为29.17%(7/24);3者细胞形态、表面抗原表达、体外分化特性相似,但2种脐血MSC原代培养时间长达30d左右,处于G0/G1期细胞百分比大于成人骨髓;3者均能转染表达外源基因,但胚胎脐血MSC中表达率最高,达(56.32±3.28)%。【结论】胚胎、新生儿脐血以及成人骨髓中均可分离培养出MSC;中期胚胎脐血MSC适用于胎儿自体宫内基因转移/治疗(IUGT)靶细胞;成人骨髓MSC在组织工程、细胞治疗、基因治疗等领域具有广阔的临床应用前景;而新生儿脐血MSC的临床应用有待进一步研究。
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关键词
新生儿脐血
临床应用
胚胎
中期
人中
成人骨髓
间质干细胞
外源基因
DMEM
绿色荧光蛋白
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职称材料
成人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的逆转化现象
被引量:
8
3
作者
姚晓黎
张成
+3 位作者
冯善伟
冯慧宇
刘祖国
邓宇斌
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第5期513-516,共4页
目的研究成人骨髓间充质干细胞(hMSC)分化为神经元样细胞后的逆转化现象。方法从成人骨髓分离、培养和扩增hMSC。用参芪液诱导hMSC分化为神经元样细胞,并用免疫组化方法鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋...
目的研究成人骨髓间充质干细胞(hMSC)分化为神经元样细胞后的逆转化现象。方法从成人骨髓分离、培养和扩增hMSC。用参芪液诱导hMSC分化为神经元样细胞,并用免疫组化方法鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。采用RT-PCR方法检测10个基因(内胚层基因ceruloplasmin;中胚层基因SM22;外胚层基因Amyloidprecursorprotein、syntaxin;生殖系基因protamine;神经元特异性基因NeuroD、NF、NSE、GFAP、Tau)在诱导分化为神经元样细胞的动态变化以及逆转化细胞的基因表达变化。结果hMSC经参芪液诱导后,可见神经元样细胞。免疫组化显示诱导出的神经元样细胞表达NSE、NF阳性,GFAP阴性。去除参芪液,观察到神经元样细胞又恢复为hMSC的外形,呈现宽大扁平或长梭形。基因检测显示逆转化的细胞基因表达与未分化hMSC相似。结论参芪液可以促进hMSC分化为神经元样细胞,诱导分化过程可以出现逆转化现象。
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关键词
间质干细胞
神经元
基凶
参芪液
逆转化
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职称材料
抗-D抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
被引量:
2
4
作者
付涌水
江朝富
+3 位作者
李树浓
徐霖
袁广卿
曹开源
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期152-155,共4页
目的:于大肠杆菌表达抗-D抗体Fab段基因,为真核载体表达完整的人抗-D抗体奠定基础。方法:将已克隆测序的Fab段基因亚克隆到pComb3噬粒载体,用PCR和限制性内切酶酶切鉴定后于大肠杆菌进行表达,表达产物用SDS-PAGE和ELISA等方法分析。结果...
目的:于大肠杆菌表达抗-D抗体Fab段基因,为真核载体表达完整的人抗-D抗体奠定基础。方法:将已克隆测序的Fab段基因亚克隆到pComb3噬粒载体,用PCR和限制性内切酶酶切鉴定后于大肠杆菌进行表达,表达产物用SDS-PAGE和ELISA等方法分析。结果:SDS-PAGE电泳表明重组克隆表达了1条约48kD的蛋白条带,ELISA结果显示,所表达的抗体和Rh+的人红细胞呈阳性反应,和Rh-红细胞反应为阴性,阴性对照和Rh+及Rh-红细胞反应均为阴性。结论:于大肠杆菌表达了具有抗原结合特性的人抗-D抗体Fab段抗体分子。
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关键词
抗体
抗-D
基因克隆
基因表达
大肠杆菌
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职称材料
题名
成人骨髓间质干细胞在脑梗塞模型鼠的迁移和分化
被引量:
8
1
作者
姚晓黎
张成
卢锡林
冯善伟
邓宇斌
刘祖国
机构
中山大学
附属第一医院神经科
中山大学病理生理教研室
中山大学
眼科中心
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期1056-1060,共5页
基金
卫生部临床学科重点项目(No.2001321)
广东省科技计划项目(No.2KM05501S)
+1 种基金
广东省科技计划项目重大专项(No.2003A3020106)
国家自然科学基金资助项目(No.30270732)
文摘
目的:探讨成人骨髓间质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSC)在脑梗塞模型鼠脑内的迁移和分化,是否影响模型大鼠的运动功能。方法:体外扩增培养hMSC,建立左大脑中动脉梗塞模型(MACO)大鼠,将标记Hoeschst33342的hMSC,经参芪液诱导30min后注入模型鼠脑内,观察hMSC在大鼠脑内的存活、迁移、分化,以及能否改善模型鼠运动功能。结果:第5代呈集落生长的hMSC,均一性好。hMSC可在脑内存活6周以上;随着时间的延长,hMSC在脑内迁移的范围越来越大;间接免疫荧光表明hMSC在大鼠脑内表达人神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP);模型鼠的肢体运动功能有明显改善。结论:hMSC可在大鼠脑内分化为神经细胞,有望成为治疗脑梗塞的理想的种子细胞。
关键词
骨髓间质干细胞
脑梗塞
细胞分化
细胞运动
参芪液
Keywords
Bone marrow mesenchymal stem cells
Cerebral infarction
Cell differentiation
Cell movement
Shenqiye
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
人中期胚胎、新生儿脐血及成人骨髓间质干细胞基本生物学特性的比较
被引量:
5
2
作者
朱美玲
陈汝光
刘华
胡燕芬
娜晓东
雷俊霞
张秀明
李树浓
机构
中山大学病理生理教研室
深圳市宝安区西乡人民医院
深圳市宝安区血站脐血库
出处
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期504-507,共4页
基金
国家重点基础研究课题(973)基金资助项目(2001CB509904)
广东省十五重大攻关基金资助项目(2001A3020101)
文摘
【目的】比较人中期胚胎脐血、新生儿脐血以及成人骨髓3种来源的间质干细胞(MSC)生物学特性,为临床治疗选择细胞来源提供实验依据。【方法】采用L-DMEM培养液分离培养3种来源MSC,流式细胞仪进行细胞表型、细胞周期、细胞凋亡分析,成骨、成脂诱导液分别诱导细胞分化,携带绿色荧光蛋白报告基因的重组腺病毒转染MSC,荧光显微镜和流式细胞仪检测3种细胞表达外源基因特性。【结果】3种来源标本中均可分离培养出MSC,但新生儿脐血中阳性获得率最低,为29.17%(7/24);3者细胞形态、表面抗原表达、体外分化特性相似,但2种脐血MSC原代培养时间长达30d左右,处于G0/G1期细胞百分比大于成人骨髓;3者均能转染表达外源基因,但胚胎脐血MSC中表达率最高,达(56.32±3.28)%。【结论】胚胎、新生儿脐血以及成人骨髓中均可分离培养出MSC;中期胚胎脐血MSC适用于胎儿自体宫内基因转移/治疗(IUGT)靶细胞;成人骨髓MSC在组织工程、细胞治疗、基因治疗等领域具有广阔的临床应用前景;而新生儿脐血MSC的临床应用有待进一步研究。
关键词
新生儿脐血
临床应用
胚胎
中期
人中
成人骨髓
间质干细胞
外源基因
DMEM
绿色荧光蛋白
Keywords
msenchymal stem cells
cord blood
bone marrow
fetal
newborn
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R714.246 [医药卫生—妇产科学]
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职称材料
题名
成人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的逆转化现象
被引量:
8
3
作者
姚晓黎
张成
冯善伟
冯慧宇
刘祖国
邓宇斌
机构
中山大学
第一医院神经科
中山大学
眼科中心
中山大学病理生理教研室
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第5期513-516,共4页
基金
卫生部临床学科重点项目(2001321)
广东省科技计划项目(2KM05501S)
+1 种基金
广东省科技计划项目重大专项(2003A3020106)
国家自然科学基金(30270732)~~
文摘
目的研究成人骨髓间充质干细胞(hMSC)分化为神经元样细胞后的逆转化现象。方法从成人骨髓分离、培养和扩增hMSC。用参芪液诱导hMSC分化为神经元样细胞,并用免疫组化方法鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。采用RT-PCR方法检测10个基因(内胚层基因ceruloplasmin;中胚层基因SM22;外胚层基因Amyloidprecursorprotein、syntaxin;生殖系基因protamine;神经元特异性基因NeuroD、NF、NSE、GFAP、Tau)在诱导分化为神经元样细胞的动态变化以及逆转化细胞的基因表达变化。结果hMSC经参芪液诱导后,可见神经元样细胞。免疫组化显示诱导出的神经元样细胞表达NSE、NF阳性,GFAP阴性。去除参芪液,观察到神经元样细胞又恢复为hMSC的外形,呈现宽大扁平或长梭形。基因检测显示逆转化的细胞基因表达与未分化hMSC相似。结论参芪液可以促进hMSC分化为神经元样细胞,诱导分化过程可以出现逆转化现象。
关键词
间质干细胞
神经元
基凶
参芪液
逆转化
Keywords
mesenchymal stem cells
neurons
genes
Shenqiye
re-differentiation
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
抗-D抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
被引量:
2
4
作者
付涌水
江朝富
李树浓
徐霖
袁广卿
曹开源
机构
广州血液中心临床输血研究所
中山大学病理生理教研室
中山大学
临床检验标准化研究中心
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期152-155,共4页
基金
广东省自然科学基金资助项目(No.021798)
广州市科技公关重点项目资助(No.2003Z2-E4093)
文摘
目的:于大肠杆菌表达抗-D抗体Fab段基因,为真核载体表达完整的人抗-D抗体奠定基础。方法:将已克隆测序的Fab段基因亚克隆到pComb3噬粒载体,用PCR和限制性内切酶酶切鉴定后于大肠杆菌进行表达,表达产物用SDS-PAGE和ELISA等方法分析。结果:SDS-PAGE电泳表明重组克隆表达了1条约48kD的蛋白条带,ELISA结果显示,所表达的抗体和Rh+的人红细胞呈阳性反应,和Rh-红细胞反应为阴性,阴性对照和Rh+及Rh-红细胞反应均为阴性。结论:于大肠杆菌表达了具有抗原结合特性的人抗-D抗体Fab段抗体分子。
关键词
抗体
抗-D
基因克隆
基因表达
大肠杆菌
Keywords
Antibodies, anti- D
Gene cloning
Gene expression
Escherichia coli
分类号
R392.32 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
成人骨髓间质干细胞在脑梗塞模型鼠的迁移和分化
姚晓黎
张成
卢锡林
冯善伟
邓宇斌
刘祖国
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
8
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职称材料
2
人中期胚胎、新生儿脐血及成人骨髓间质干细胞基本生物学特性的比较
朱美玲
陈汝光
刘华
胡燕芬
娜晓东
雷俊霞
张秀明
李树浓
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
5
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职称材料
3
成人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的逆转化现象
姚晓黎
张成
冯善伟
冯慧宇
刘祖国
邓宇斌
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005
8
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职称材料
4
抗-D抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
付涌水
江朝富
李树浓
徐霖
袁广卿
曹开源
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
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职称材料
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引证文献
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