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首例肺病变型犬细小病毒的发现及防治 被引量:4
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作者 杨德威 杨林 +1 位作者 刘福安 王珣章 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期125-127,共3页
将在华南地区分离到的犬细小病毒 (Canineparvoviurs,CPV)致病和致死强毒株经 6 5℃高温处理纯化后 ,得到一株新型犬小病毒株HN 1,HN 1基因组成部分序列测定结果显示与犬细小病毒CPV ,N株比较有 85%以上的同源性 .人工攻毒发现能导致犬... 将在华南地区分离到的犬细小病毒 (Canineparvoviurs,CPV)致病和致死强毒株经 6 5℃高温处理纯化后 ,得到一株新型犬小病毒株HN 1,HN 1基因组成部分序列测定结果显示与犬细小病毒CPV ,N株比较有 85%以上的同源性 .人工攻毒发现能导致犬肺病变 ,为世界首列能引起肺病变的犬细小病毒的报道 . 展开更多
关键词 犬细小病毒 肺病变 防治 犬瘟热病 混合感染
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猪生长激素基因在昆虫细胞中的分泌表达 被引量:8
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作者 欧阳菁 龙綮新 +1 位作者 杨林 王珣章 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期482-485,共4页
将PCR扩增得到的 pGH基因插入到带有 polh启动子和 gp6 7强信号肽序列的杆状病毒转移载体pAcGP6 7 A中 ,构建重组质粒 pGP6 7pGH ,并与线性化致死缺失型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 (AcMNPV OCC-)基因组DNA共转染Sf9细胞 ,构建出重组病毒A... 将PCR扩增得到的 pGH基因插入到带有 polh启动子和 gp6 7强信号肽序列的杆状病毒转移载体pAcGP6 7 A中 ,构建重组质粒 pGP6 7pGH ,并与线性化致死缺失型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 (AcMNPV OCC-)基因组DNA共转染Sf9细胞 ,构建出重组病毒AcMNPV pGP6 7 pGH OCC-。感染重组病毒的Hi5细胞的表达产物的SDS PAGE和Westernblot结果表明 ,细胞可溶蛋白和培养液上清中均有一条分子量约为 2 2kDa的猪生长激素特异性反应带 ,且培养液上清中的目的蛋白分子量比天然pGH略大一些。薄层扫描仪扫描估测可知 ,重组pGH分别占细胞可溶蛋白的 8 98%和培养液上清总蛋白的 3 6 1%。将表达 96h的培养液上清浓缩液进行N 糖基化分析 ,结果显示重组 pGH无N 糖基化加工修饰。 展开更多
关键词 生长激素基因 昆虫细胞 杆状病毒表达载体系统 基因表达 N-糖基化分析
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云芝多糖在NO诱导的巨噬细胞凋亡中的分子基础 被引量:6
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作者 王瑾雯 陈瑗 王珣章 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期68-71,共4页
在应用云芝多糖的基础上 ,用NO诱导巨噬细胞凋亡 ,发现云芝多糖可加强NO诱导的细胞凋亡 ;通过RT PCR观察诱生性一氧化氮合酶基因的表达情况 ,结果表明云芝多糖能诱导一氧化氮合酶基因表达 ,并可增强γ干扰素和脂多糖的诱导作用 ,提示云... 在应用云芝多糖的基础上 ,用NO诱导巨噬细胞凋亡 ,发现云芝多糖可加强NO诱导的细胞凋亡 ;通过RT PCR观察诱生性一氧化氮合酶基因的表达情况 ,结果表明云芝多糖能诱导一氧化氮合酶基因表达 ,并可增强γ干扰素和脂多糖的诱导作用 ,提示云芝多糖在动脉粥样硬化中的防治作用是通过诱导诱生性一氧化氮合酶表达而实现的 . 展开更多
关键词 云芝多糖 细胞凋亡 诱生性-氧化氮合酶 动脉粥样硬化 巨噬细胞 诱导 分子基础
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重组人源性抗HBsAg Fab抗体的特性分析 被引量:5
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作者 邓宁 向军俭 +2 位作者 陈文吟 王珣章 粟宽源 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2004年第5期656-660,共5页
 通过噬菌体展示技术从含高滴度抗乙肝表面抗原(HBsAg)抗体的人外周血淋巴细胞获得抗HBsAgFab抗体的轻、重链基因.将Fab的轻、重链基因分别整合到巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115菌株的染色体上,成功构建了高效分泌表达抗HBsAgFa...  通过噬菌体展示技术从含高滴度抗乙肝表面抗原(HBsAg)抗体的人外周血淋巴细胞获得抗HBsAgFab抗体的轻、重链基因.将Fab的轻、重链基因分别整合到巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115菌株的染色体上,成功构建了高效分泌表达抗HBsAgFab抗体的酵母工程菌.对酵母表达的重组Fab抗体进行了纯化,并对其相对分子质量、糖基化以及抗原结合能力等特性进行了分析,结果显示重组酵母分泌表达的重组人源性抗HBsAgFab是一个相对分子质量为50000左右的低糖基化糖蛋白.1mg重组Fab抗体相当于40U的抗乙肝表面抗原抗体(20U/mg).表明重组Fab抗体具有较强的结合HBsAg的能力. 展开更多
关键词 FAB抗体 亲和纯化 毕赤酵母
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人白血病抑制因子(LIF)基因的人工合成 被引量:1
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作者 杨林 王全忠 +2 位作者 吴无畏 龙綮新 王珣章 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第S1期86-89,共4页
根据人白血病抑制因子基因的c D N A 序列, 通过合理的引物设计、链延伸反应、 P C R 反应以及分子克隆等步骤, 成功地合成出编码成熟 L I F 蛋白的基因片段, 并将其克隆至p U C18 载体质粒上. 序列分析和酶切鉴定显... 根据人白血病抑制因子基因的c D N A 序列, 通过合理的引物设计、链延伸反应、 P C R 反应以及分子克隆等步骤, 成功地合成出编码成熟 L I F 蛋白的基因片段, 并将其克隆至p U C18 载体质粒上. 序列分析和酶切鉴定显示 L I F 基因得到了正确合成和克隆, 同时还就基因人工合成的优越性和特殊序列的甲基化问题进行了探讨. 展开更多
关键词 人白血病抑制因子 基因 人工合成
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EM益菌于东亚钳蝎养殖的应用 被引量:4
6
作者 杨德威 黄德成 刘福安 《广东畜牧兽医科技》 2001年第4期30-31,共2页
本研究将具有不同性质及作用的厌氧菌和好氧菌的有效微生物群共 1 0属 80多种EM (Effec tiveMicro organisms)进行单克隆后 ,对 6组东亚钳蝎进行了EM养殖方法与传统养殖法的比较。结果 ,EM养殖方法对东亚钳蝎的生长。
关键词 东亚钳蝎 饲养环境 EM益菌
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犬病毒病ELISA检测方法浅析 被引量:3
7
作者 杨德威 刘福安 《广东畜牧兽医科技》 2000年第3期33-34,共2页
报道了 1 999年 9月至今的 2 6宗经不同途径作犬细小病毒弱毒疫苗 2次免疫后仍然发生致死的出血性肠炎 ,而不同的犬主将各自的犬饲料交到所属地区的动物医院作犬细小病毒ELISA检测时 ,出现细小病毒的阳性反应。经分子病毒学的理化特性... 报道了 1 999年 9月至今的 2 6宗经不同途径作犬细小病毒弱毒疫苗 2次免疫后仍然发生致死的出血性肠炎 ,而不同的犬主将各自的犬饲料交到所属地区的动物医院作犬细小病毒ELISA检测时 ,出现细小病毒的阳性反应。经分子病毒学的理化特性、细菌学及寄生虫实验犬的回归实验证明这是不同种类犬寄生虫或耐抗性的细菌所致的出血性肠炎。 展开更多
关键词 犬细小病毒 犬病毒病 ELISA检测 弱毒疫苗 诊断
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人白介素-12(P40)亚基在巴斯德毕赤酵母中的表达
8
作者 陈新华 杨林 +2 位作者 陈曲侯 王珣章 龙綮新 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期72-74,100,共4页
运用PCR技术特异性地扩增了人IL 1 2p4 0亚基cDNA的编码区序列 ,得到 94 0bp的扩增片段 ,将其克隆于毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαC的ClaⅠ ,XbaⅠ位点 ,构建成重组表达质粒pPICZαC p4 0 .经LiCl2 转化 ,Zeocin抗性筛选 ,... 运用PCR技术特异性地扩增了人IL 1 2p4 0亚基cDNA的编码区序列 ,得到 94 0bp的扩增片段 ,将其克隆于毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαC的ClaⅠ ,XbaⅠ位点 ,构建成重组表达质粒pPICZαC p4 0 .经LiCl2 转化 ,Zeocin抗性筛选 ,得到含多拷贝p4 0基因的酵母工程菌PichiapastorisX 3 3 /p4 0 ,在 φ =0 5%甲醇诱导下 ,p4 0基因得到了分泌型表达 ,培养上清的SDS PAGE及Western blot均显示表达产物相对分子质量约 4 40 0 0 ,与预计大小相符 ,薄层凝胶扫描结果表明 ,分泌型表达蛋白占培养上清总蛋白量质量的 4 7% . 展开更多
关键词 IL-12 P40亚基 表达 白介素-12 巴斯德毕赤酵母 PCR技术 免疫调节因子
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犬基因疫苗与犬抗生素抗性 被引量:1
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作者 杨德威 刘福安 《广东畜牧兽医科技》 2001年第1期31-32,共2页
2 0 0 0年 1 0~ 1 2月 ,华南地区某犬场一部份曾经接受犬基因疫苗免疫的犬群 ,虽然含有对犬病毒病的抗体 ,但在细菌病发病时对氨苄青霉素及新霉素产生抗性反应 ,对此现象作了研究和分析。
关键词 基因疫苗 抗生素 病毒病 抗性反应 第三代基因疫苗
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