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论应用多基因转化策略综合改良生物体遗传性研究方向的前景 Ⅰ .多基因转化的基因来源与技术平台 被引量:15
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作者 李宝健 朱华晨 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期11-16,共6页
随着后基因组时代的到来,人类将克隆到越来越多的、生物学意义明确的有用基因应用于基因工程对生物体的遗传改良中。但生物体的绝大多数性状和生理功能都是依靠多基因的协调表达而实现的。因此,多基因转化策略必将成为今后基因工程在基... 随着后基因组时代的到来,人类将克隆到越来越多的、生物学意义明确的有用基因应用于基因工程对生物体的遗传改良中。但生物体的绝大多数性状和生理功能都是依靠多基因的协调表达而实现的。因此,多基因转化策略必将成为今后基因工程在基础理论与实际应用研究中的主流方向。结合中山大学生物工程研究中心∥基因工程教育部重点实验室10多年来研究工作的实践体会,对发展多基因转化策略的意义和由来、多基因转化可用的基因资源和技术思路,进行了详细的论述。 展开更多
关键词 多基因转化策略 基因工程 后基因组 遗传改良
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aroA基因的克隆和优化 被引量:12
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作者 何鸣 曾海燕 +1 位作者 徐培林 叶长明 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期76-79,共4页
除草剂草甘膦 (glyphosate ,N_phosphonomethylglycine )的靶标酶是由aroA基因编码的EPSP (5_烯醇式丙酮酰莽草酸_3_磷酸 ,5_enolpyruvylshikimate_3_phosphate)合成酶。采用先进的基因优化技术 ,以鼠伤寒沙门氏杆菌和大肠杆菌的EPSP合... 除草剂草甘膦 (glyphosate ,N_phosphonomethylglycine )的靶标酶是由aroA基因编码的EPSP (5_烯醇式丙酮酰莽草酸_3_磷酸 ,5_enolpyruvylshikimate_3_phosphate)合成酶。采用先进的基因优化技术 ,以鼠伤寒沙门氏杆菌和大肠杆菌的EPSP合成酶基因为模板 ,通过随机结合 ,交错延伸的PCR扩增过程 ,克服定点突变的局限性 ,使基因获得多位点突变 ,并使之在大肠杆菌中得到表达。对纯化后的表达产物的酶动力学性质的测定结果表明 ,获得了与作为模板的野生型相比 ,具有高得多的酶活力 (降低的Km (PEP) )和大大增强的草甘膦抗性 (升高的Ki(glyphosate) ) 展开更多
关键词 5-稀醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸 EPSP合成酶 草甘膦 除草剂 基因克隆 基因优化 转基因作物 aroA基因 酶活力
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