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人白血病仰制因子基因在酵母中的融合表达
1
作者
王全忠
杨林
+2 位作者
欧阳菁
龙綮新
王珣章
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期96-99,共4页
用ＰＣＲ突变的方法使人白血病抑制因子基因的终止密码子缺失，并与质粒ｐＰＩＣＺαＡ上的ｍｙｃ表位及６个组氨酸处于同一读码框，构建融合表达载体ｐＰＩＣＺαＡ－ｈＬＩＦＭ．通过氯化理化学转化法使表达载体整合到毕赤巴斯德酵母...
用ＰＣＲ突变的方法使人白血病抑制因子基因的终止密码子缺失，并与质粒ｐＰＩＣＺαＡ上的ｍｙｃ表位及６个组氨酸处于同一读码框，构建融合表达载体ｐＰＩＣＺαＡ－ｈＬＩＦＭ．通过氯化理化学转化法使表达载体整合到毕赤巴斯德酵母Ｘ－３３的基因组ＤＮＡ中。转化子经甘油增菌和甲醇诱导，实现了ｈＬＩＦ基因在毕赤酵母表达载体系统中的表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析结果表明在相对分子质量为６１ ０００处有一条人白血病抑制因子特异蛋白带．凝胶薄层扫描分析结果显示表达的目的蛋白占培养液上清总蛋白的 ３３．３％．且该表达产物具有抑制小鼠畸胎瘤细胞Ｆ９克隆形成的活性．
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关键词
人白血病抑制因子基因
毕赤酵母
融合表达
生物活性测定
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职称材料
题名
人白血病仰制因子基因在酵母中的融合表达
1
作者
王全忠
杨林
欧阳菁
龙綮新
王珣章
机构
中山大学生物医药中心 //生物防治国家重点实验室
出处
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期96-99,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(39800108)
文摘
用ＰＣＲ突变的方法使人白血病抑制因子基因的终止密码子缺失，并与质粒ｐＰＩＣＺαＡ上的ｍｙｃ表位及６个组氨酸处于同一读码框，构建融合表达载体ｐＰＩＣＺαＡ－ｈＬＩＦＭ．通过氯化理化学转化法使表达载体整合到毕赤巴斯德酵母Ｘ－３３的基因组ＤＮＡ中。转化子经甘油增菌和甲醇诱导，实现了ｈＬＩＦ基因在毕赤酵母表达载体系统中的表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析结果表明在相对分子质量为６１ ０００处有一条人白血病抑制因子特异蛋白带．凝胶薄层扫描分析结果显示表达的目的蛋白占培养液上清总蛋白的 ３３．３％．且该表达产物具有抑制小鼠畸胎瘤细胞Ｆ９克隆形成的活性．
关键词
人白血病抑制因子基因
毕赤酵母
融合表达
生物活性测定
Keywords
human leukemia inhibitory factor gene
Pichica pastoris
fusion expression
bioactivity assay
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
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1
人白血病仰制因子基因在酵母中的融合表达
王全忠
杨林
欧阳菁
龙綮新
王珣章
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001
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