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海洋病原细菌的氯霉素耐药菌株筛选鉴定及质粒消除
被引量:
2
1
作者
孟繁梅
汪凯
+2 位作者
潘子强
尹德胜
艾云灿
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第7期437-441,共5页
目的从污染海域筛选非临床氯霉素耐药株,研究耐药基因定位及耐药机制多样性。方法TCBS和EMB选择平板筛选,结合16SrDNA序列分析鉴定耐药株。MIC测定、基因组DNA-RAPD分型和质粒消除评估多样性。结果评估187株氯霉素耐药株的MIC值分布、...
目的从污染海域筛选非临床氯霉素耐药株,研究耐药基因定位及耐药机制多样性。方法TCBS和EMB选择平板筛选,结合16SrDNA序列分析鉴定耐药株。MIC测定、基因组DNA-RAPD分型和质粒消除评估多样性。结果评估187株氯霉素耐药株的MIC值分布、属种分布、耐药基因定位及耐药机制。发现80株耐药MIC25~128μg/ml是CLSI/NCCLS(1995年)定义临床标准(MIC12.5μg/ml)的2~10倍,分布在弧菌科和肠杆菌科主要属种;58株MIC>25μg/ml基因组DNA-RAPD分型与菌落表型分组结果吻合,显示多样性丰富。采用多轮高温(~43℃)和高浓度(~1%)SDS双重处理和交替培养,77株MIC>25μg/ml分离株的质粒消除效率为28.6%;55株不能消除耐药表型,暗示染色体编码耐药基因;22株可消除氯霉素耐药表型,其中16株完全消除,暗示质粒独立编码耐药基因,6株部分消除,暗示质粒和染色体分别编码耐药基因。结论来自污染海域环境的非临床氯霉素耐药株可作为新模型,提供耐药基因定位及耐药机制多样性的新视野。
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关键词
海洋环境
病原细菌
氯霉素
耐药性
基因定位
质粒
消除
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职称材料
海洋噬菌体EJ(3)9P1 ORF172基因的克隆与表达
被引量:
1
2
作者
董浩
艾云灿
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期1253-1256,共4页
通过PCR的方法对海洋噬菌体EJ(3)9P1中ORF172基因进行克隆,并构建了表达载体pET28-ORF172,转入大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下进行表达,并通过SDS-PAGE对表达结果进行分析。结果成功构建了ORF172的表达体系,为进一步开展噬菌体EJ(3)9P1的尾...
通过PCR的方法对海洋噬菌体EJ(3)9P1中ORF172基因进行克隆,并构建了表达载体pET28-ORF172,转入大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下进行表达,并通过SDS-PAGE对表达结果进行分析。结果成功构建了ORF172的表达体系,为进一步开展噬菌体EJ(3)9P1的尾丝基因结构与功能研究奠定基础。
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关键词
海洋噬菌体
ORF172
克隆
表达
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职称材料
转基因植物中Bt Cry2Ab蛋白的抗原表位特征预测
3
作者
高洁荣
何颖
+2 位作者
邹泽红
陶爱林
艾云灿
《安徽农业科学》
CAS
2012年第25期12400-12402,12586,共4页
[目的]通过生物信息学方法了解转基因作物中Bt Cry2Ab蛋白的二级结构、三级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位等结构特征,为今后的抗体设计奠定基础。[方法]以在NCBI数据库中获得Cry2Ab蛋白序列为材料,应用DNAStar中的多种方法预测其...
[目的]通过生物信息学方法了解转基因作物中Bt Cry2Ab蛋白的二级结构、三级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位等结构特征,为今后的抗体设计奠定基础。[方法]以在NCBI数据库中获得Cry2Ab蛋白序列为材料,应用DNAStar中的多种方法预测其B细胞表位,并通过在线预测软件NetMHCII 2.2分析Cry2Ab蛋白与MHC-II类分子的结合能力,从而预测其T细胞抗原表位。[结果]对Cry2Ab蛋白B细胞抗原表位的预测表明,Cry2Ab蛋白的第208~215区域是潜在的B细胞抗原表位;对Cry2Ab蛋白与MHC-II类分子结合能力的分析表明,Cry2Ab蛋白的第177~185区域、299~307区域和255~263区域是潜在的T细胞抗原表位,暗示含有HLA-DRB10101和HLA-DRB10701等位基因的人群对Cry2Ab蛋白更敏感。[结论]该研究有助于深入了解Cry2Ab蛋白的生物学特征,为完善转基因食品过敏原性的评估方法提供新线索。
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关键词
转基因植物
过敏原性
Cry2Ab蛋白
B细胞表位
T细胞表位
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职称材料
苏云金芽孢杆菌Cry2Aa蛋白的体外表达及纯化
4
作者
高洁荣
何颖
+1 位作者
邹泽红
艾云灿
《湖北农业科学》
北大核心
2013年第3期702-705,共4页
根据大肠杆菌密码子偏好性对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)cry2Aa基因进行优化,并合成全长基因,将cry2Aa基因克隆到表达载体pET-44a上,转化到大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达,优化表达条件,采用亲和层析和SDS-PAGE胶回收纯化,W...
根据大肠杆菌密码子偏好性对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)cry2Aa基因进行优化,并合成全长基因,将cry2Aa基因克隆到表达载体pET-44a上,转化到大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达,优化表达条件,采用亲和层析和SDS-PAGE胶回收纯化,Western blot鉴定回收产物。结果表明,IPTG浓度为0.50 mmol/L、27℃诱导4 h时Cry2Aa蛋白表达量最高,SDS-PAGE胶回收Cry2Aa纯化蛋白所得的产量高于亲和层析法。
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关键词
苏云金芽孢杆菌(Bacillus
thuringiensis)
Cry2Aa蛋白
表达
纯化
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职称材料
题名
海洋病原细菌的氯霉素耐药菌株筛选鉴定及质粒消除
被引量:
2
1
作者
孟繁梅
汪凯
潘子强
尹德胜
艾云灿
机构
中山大学生命科学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室
出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第7期437-441,共5页
基金
国家自然科学基金(No.39870579
No.30270064
+6 种基金
No.40376046)
广东省自然科学基金(No.031624)
教育部回国留学人员科研启动基金
教育部高等学校骨干教师资助计划
广东省科技计划重点项目(No.2005B20501001)
中山大学测试科学基金
985-II期专项资助项目
文摘
目的从污染海域筛选非临床氯霉素耐药株,研究耐药基因定位及耐药机制多样性。方法TCBS和EMB选择平板筛选,结合16SrDNA序列分析鉴定耐药株。MIC测定、基因组DNA-RAPD分型和质粒消除评估多样性。结果评估187株氯霉素耐药株的MIC值分布、属种分布、耐药基因定位及耐药机制。发现80株耐药MIC25~128μg/ml是CLSI/NCCLS(1995年)定义临床标准(MIC12.5μg/ml)的2~10倍,分布在弧菌科和肠杆菌科主要属种;58株MIC>25μg/ml基因组DNA-RAPD分型与菌落表型分组结果吻合,显示多样性丰富。采用多轮高温(~43℃)和高浓度(~1%)SDS双重处理和交替培养,77株MIC>25μg/ml分离株的质粒消除效率为28.6%;55株不能消除耐药表型,暗示染色体编码耐药基因;22株可消除氯霉素耐药表型,其中16株完全消除,暗示质粒独立编码耐药基因,6株部分消除,暗示质粒和染色体分别编码耐药基因。结论来自污染海域环境的非临床氯霉素耐药株可作为新模型,提供耐药基因定位及耐药机制多样性的新视野。
关键词
海洋环境
病原细菌
氯霉素
耐药性
基因定位
质粒
消除
Keywords
Marine environment
Pathogenic bacteria
Chloramphenicol
Antibiotic resistance
Gene location
Plasmid
Elimination
分类号
R378.99 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
海洋噬菌体EJ(3)9P1 ORF172基因的克隆与表达
被引量:
1
2
作者
董浩
艾云灿
机构
中山大学
生命
科学院
吉林农业
大学
生命
科学
学院
出处
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期1253-1256,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2006AA09Z420)
文摘
通过PCR的方法对海洋噬菌体EJ(3)9P1中ORF172基因进行克隆,并构建了表达载体pET28-ORF172,转入大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下进行表达,并通过SDS-PAGE对表达结果进行分析。结果成功构建了ORF172的表达体系,为进一步开展噬菌体EJ(3)9P1的尾丝基因结构与功能研究奠定基础。
关键词
海洋噬菌体
ORF172
克隆
表达
Keywords
marine bacteriophase
ORF172
cloning
expression
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
转基因植物中Bt Cry2Ab蛋白的抗原表位特征预测
3
作者
高洁荣
何颖
邹泽红
陶爱林
艾云灿
机构
中山大学生命科学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室
广州医
学院
第二附属医院呼吸疾病
国家
重点
实验室
变态反应研究室过敏反应与临床免疫
重点
实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
2012年第25期12400-12402,12586,共4页
基金
国家科技重大专项重大课题(2011ZX08011-005)及重点课题(2009ZX08011-004B)
国家自然基金(30771240)
呼吸疾病国家重点实验室(广州医学院)课题研究基金
文摘
[目的]通过生物信息学方法了解转基因作物中Bt Cry2Ab蛋白的二级结构、三级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位等结构特征,为今后的抗体设计奠定基础。[方法]以在NCBI数据库中获得Cry2Ab蛋白序列为材料,应用DNAStar中的多种方法预测其B细胞表位,并通过在线预测软件NetMHCII 2.2分析Cry2Ab蛋白与MHC-II类分子的结合能力,从而预测其T细胞抗原表位。[结果]对Cry2Ab蛋白B细胞抗原表位的预测表明,Cry2Ab蛋白的第208~215区域是潜在的B细胞抗原表位;对Cry2Ab蛋白与MHC-II类分子结合能力的分析表明,Cry2Ab蛋白的第177~185区域、299~307区域和255~263区域是潜在的T细胞抗原表位,暗示含有HLA-DRB10101和HLA-DRB10701等位基因的人群对Cry2Ab蛋白更敏感。[结论]该研究有助于深入了解Cry2Ab蛋白的生物学特征,为完善转基因食品过敏原性的评估方法提供新线索。
关键词
转基因植物
过敏原性
Cry2Ab蛋白
B细胞表位
T细胞表位
Keywords
Transgenic crops
Allergenicity
Cry2Ab
B cell epitopes
T cell epitopes
分类号
S182 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
苏云金芽孢杆菌Cry2Aa蛋白的体外表达及纯化
4
作者
高洁荣
何颖
邹泽红
艾云灿
机构
中山大学
生命
科学院
/
有害生物
控制与
资源
利用
国家
重点
实验室
广州医
学院
第二附属医院/呼吸疾病
国家
重点
实验室
变态反应研究室/广州市过敏反应与临床免疫
重点
实验室
出处
《湖北农业科学》
北大核心
2013年第3期702-705,共4页
基金
国家自然科学基金(30771240)
国家科技重大专项重大课题(2011ZX08011-005)
+1 种基金
国家科技重大专项重点课题(2009ZX08011-004B)
呼吸疾病国家重点实验室(广州医学院)课题研究基金
文摘
根据大肠杆菌密码子偏好性对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)cry2Aa基因进行优化,并合成全长基因,将cry2Aa基因克隆到表达载体pET-44a上,转化到大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达,优化表达条件,采用亲和层析和SDS-PAGE胶回收纯化,Western blot鉴定回收产物。结果表明,IPTG浓度为0.50 mmol/L、27℃诱导4 h时Cry2Aa蛋白表达量最高,SDS-PAGE胶回收Cry2Aa纯化蛋白所得的产量高于亲和层析法。
关键词
苏云金芽孢杆菌(Bacillus
thuringiensis)
Cry2Aa蛋白
表达
纯化
Keywords
Bacillus thuringiensis
Cry2Aa protein
expression
purify
分类号
S [农业科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
海洋病原细菌的氯霉素耐药菌株筛选鉴定及质粒消除
孟繁梅
汪凯
潘子强
尹德胜
艾云灿
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
海洋噬菌体EJ(3)9P1 ORF172基因的克隆与表达
董浩
艾云灿
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
转基因植物中Bt Cry2Ab蛋白的抗原表位特征预测
高洁荣
何颖
邹泽红
陶爱林
艾云灿
《安徽农业科学》
CAS
2012
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
苏云金芽孢杆菌Cry2Aa蛋白的体外表达及纯化
高洁荣
何颖
邹泽红
艾云灿
《湖北农业科学》
北大核心
2013
0
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职称材料
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