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内皮细胞抑制素酵母工程菌的高密度发酵及产物纯化和活性分析
被引量：
2
1
作者
吴江雪
符武钊
+2 位作者
张添元
罗进贤
吴群悦
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期224-228,共5页
用 30升发酵罐研究了内皮细胞抑制素 (EDN)酵母工程菌P .pastorisGS115 (pPIC9K EDN)的高密度发酵工艺 ,摸索出发酵培养基 ,pH ,诱导时间等对菌体生长和基因表达的影响 .根据所确定的最适条件进行发酵 ,通过补料和甲醇诱导 4 8h后 ,工程...
用 30升发酵罐研究了内皮细胞抑制素 (EDN)酵母工程菌P .pastorisGS115 (pPIC9K EDN)的高密度发酵工艺 ,摸索出发酵培养基 ,pH ,诱导时间等对菌体生长和基因表达的影响 .根据所确定的最适条件进行发酵 ,通过补料和甲醇诱导 4 8h后 ,工程菌GS115 (pPIC9K EDN)生物量的A60 0 值达到 2 5 0 ,分泌量为 15 0mg L .发酵液经StreamlineSP ,SepharoseSPFF离子交换柱和Sepharose HeparinHiTrap亲和柱纯化 ,产物纯度达 97%以上 ,回收率为 6 0 % .Western印迹结果表明 ,酵母工程菌GS115 (pPIC9K EDN)表达的重组人内皮细胞抑制素具有天然EDN的免疫原性 .MTT法和抑癌实验结果显示 :纯化产物能抑制人脐静脉内皮细胞的增殖并能抑制移植于小鼠的黑色素瘤的生长 ,其平均抑瘤率是 94 2 % .
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关键词
内皮细胞抑制素
酵母工程菌
发酵
产物
纯化
毕赤酵母
生物活性
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职称材料
色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用
被引量：
26
2
作者
刘朝
王冬梅
+1 位作者
白洁
杨得坡
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期572-576,共5页
介绍了气相色谱、高效液相色谱、超临界流体色谱和高速逆流色谱等几种色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用现状,以及使用模糊聚类分析和人工神经网络分析指纹图谱对中药进行模式识别和质量鉴定的方法。
关键词
中药
指纹图谱
药材鉴定
气相色谱
高效液相色谱
高速逆流色谱
超临界流体色谱
人工神经网络
模糊聚类分析
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职称材料
题名
内皮细胞抑制素酵母工程菌的高密度发酵及产物纯化和活性分析
被引量：
2
1
作者
吴江雪
符武钊
张添元
罗进贤
吴群悦
机构
中山大学生命科学院基因工程教育部重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期224-228,共5页
基金
广东省重点科技项目 (No .2KMO2 5 0 2G)资助~~
文摘
用 30升发酵罐研究了内皮细胞抑制素 (EDN)酵母工程菌P .pastorisGS115 (pPIC9K EDN)的高密度发酵工艺 ,摸索出发酵培养基 ,pH ,诱导时间等对菌体生长和基因表达的影响 .根据所确定的最适条件进行发酵 ,通过补料和甲醇诱导 4 8h后 ,工程菌GS115 (pPIC9K EDN)生物量的A60 0 值达到 2 5 0 ,分泌量为 15 0mg L .发酵液经StreamlineSP ,SepharoseSPFF离子交换柱和Sepharose HeparinHiTrap亲和柱纯化 ,产物纯度达 97%以上 ,回收率为 6 0 % .Western印迹结果表明 ,酵母工程菌GS115 (pPIC9K EDN)表达的重组人内皮细胞抑制素具有天然EDN的免疫原性 .MTT法和抑癌实验结果显示 :纯化产物能抑制人脐静脉内皮细胞的增殖并能抑制移植于小鼠的黑色素瘤的生长 ,其平均抑瘤率是 94 2 % .
关键词
内皮细胞抑制素
酵母工程菌
发酵
产物
纯化
毕赤酵母
生物活性
Keywords
human endostatin,Pichia pastoris, high density culture, purification, bioactivity
分类号
R979.19 [医药卫生—药品]
TQ925.9 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用
被引量：
26
2
作者
刘朝
王冬梅
白洁
杨得坡
机构
中山大学
药
学院
生药学与天然药物化学
实验室
中山大学生命科学院基因工程教育部重点实验室
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期572-576,共5页
基金
广州市科技局重大项目资助(项目号2000 Z 101 01).
文摘
介绍了气相色谱、高效液相色谱、超临界流体色谱和高速逆流色谱等几种色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用现状,以及使用模糊聚类分析和人工神经网络分析指纹图谱对中药进行模式识别和质量鉴定的方法。
关键词
中药
指纹图谱
药材鉴定
气相色谱
高效液相色谱
高速逆流色谱
超临界流体色谱
人工神经网络
模糊聚类分析
Keywords
gas chromatography
high performance liquid chromatography
high speed counter current chromatography
supercritical fluid chromatography
artificial neural network
fuzzy cluster analysis
fingerprint
Chinese traditional medicine
分类号
R282.5 [医药卫生—中药学]
R284.1 [医药卫生—中药学]
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作者
出处
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被引量
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1
内皮细胞抑制素酵母工程菌的高密度发酵及产物纯化和活性分析
吴江雪
符武钊
张添元
罗进贤
吴群悦
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
2
在线阅读
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职称材料
2
色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用
刘朝
王冬梅
白洁
杨得坡
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2003
26
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